某区120例男性不育患者的细胞遗传学分析

鄢 磊* 张雪瑞 曹东华

（1 大连市妇幼保健院遗传代谢实验中心，辽宁 大连 116001；2 大连市妇幼保健院遗传代谢中心，辽宁 大连 116001）

近来随人们社会压力、环境污染及食品安全等多方面影响，使不孕不育的患者病发率呈大幅度的上升趋势。给生殖医学健康带来许多问题。性染色体数目或结构异常可引起性器官结构或功能异常，可引发性器官发育不全，染色体病患的主要临床特征一般发生病患的本身带有先天性多发畸形，智力发育和生长发育都比较迟缓，还存在特殊性的改变皮肤纹理；内外生殖器存在异常或畸形例如性腺的不良发育，第二特征不发育等[1-2]。不育症作为全世界主要的一个医学社会问题，在育龄阶段约8%夫妇患不育病，但约多由男性因素引发。无精子症作为男性不育首因。男性不育影响因素之一为生精障碍，临床表现有无精子、严重少精子、弱精子。致男性不育原因很多，目前细胞遗传学研究显示染色体异常作为不孕不育的一个首要因素。在男性不育患者中病发率较高，据世界卫生统计，已婚夫妇不育不孕症占比达10%～15%，其中染色体异常率可以达到3.5%左右，逐年呈上升趋势。目前治疗染色体异常病尚未存在有效防治手段，且遗传因素致男性不育临床就诊除做免疫、内分泌及必要的常规检查外，染色体相关检查具有十分必要性，明确病因做好优生及遗传咨询工作[3]。有效避免患者盲目治疗，对指导患者选取可行的临床辅助手段解决生育问题，预防染色体异常患儿出生，有助于促进指导人们优生优育，大大提高生殖健康水平。

随科学技术领域不断大力发展，人工授精、卵细胞胞质内单精子注射技术、胚胎移植等辅助生殖技术可有利于解决男性不育问题。男性生殖主要在中枢神经系统、下丘脑、垂体、睾丸性轴系内分泌激素调节，经精子发生、精子成熟、精子运输、精子获能和精子顶体反应等发生系列生理活动。精子发生因受诸多有序表达基因控制，染色体的结构、数目畸变对这些基因功能造成影响。对严重少或弱精子症、无精子症者常规行染色体核型分析有助于临床诊断与处理。对男性不育患者进行细胞遗传学分析明确不育病因，并运用辅助生殖术为男性不育提供遗传学依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料：在2014年～2017年末入我院的大连生殖医学中心不孕不育优生遗传咨询门诊就诊的不孕不育120例，不育男性患者作为本次的研究对象，均为在婚后未采取任何的避孕措施手段导致发生不孕或不育病患，年龄在23～41岁，平均年龄为（27±4.6）岁，不育时程最短为2年，最长达8年。均按WHO国际标准行CASA计算机辅助的精液分析检查后确诊，其精液检查结果显示其中存在无精子者45例，严重少、弱精子75例。所有患者均以排除生殖道梗阻发生可能性，精索静脉曲张、附睾损伤、阻塞性无精症、生殖道感染、内分泌失调等因素致不育患者。经AZF基因检测AZFa微缺失4例，AZFb微缺失1例为Klinefelter综合征患者。配偶方也进行相关生殖检查均显示正常。

1.2 方法：主要通过染色体制备-外周血淋巴细胞培养及细胞遗传学检查进行分析。采用常规方法抽取患者外周静脉血对其进行外周血淋巴细胞培养，细胞遗传检查处于无菌条件下取其外周血1.5 mL，肝素抗凝，用肝素抗凝的外周血培养淋巴细胞72 h，接种于5 mL的1640培养基中，37 ℃常规行淋巴细胞培养72 h。在终止培养前1.5～2 h加入收获前1.5 h加秋水仙素0.1 mL，促进细胞分裂终止在中期，收集细胞。首先行染色体标本制备制片，G显带染色体进行核型分析（对某特殊核型需加做C显带）。在cytovision下计数15个核型，分析3～5个核型，数目异常核型计数100个，G显带合并C显带按“人类细胞学命名国际体制”予以染色体核型分析[3-4]。

2 结 果

从分析结果可知在120例检查者中经细胞遗传检查总共检出性染色异常的核型有28例，经计算异常发生率为23.3%（28/120），在发生性染色体异常核型中有18例属于数目异常，占性染色异常核型的15%；可知主要为性染色体异常。

表1 男性性染色体异常核型

3 讨 论

染色体为基因的一种遗传物质载体，也在遗传性病中作为一个重要组成部分，染色体数目异常及结构发生畸变均会导致不同的遗传效应，其发生病种中主要含常染色体异常、性染色体疾病及染色体多态性均是造成染色体病形成的根本原因。染色体异常控制机体性状的各类基因极易造成基因异常使得其基因发生缺失、增加或其他方面的一些改变，最后对身体正常发挥功能造成一定影响，使其发生遗传性病，而染色体性相关病患也会存在较严重或明显的临床症状。有报道称Y染色体在体内大约的长度为60 Mb。一般由染色体两端部的拟常染色体区和男性特异性区域。在本次研究中显示Y染色体的异常主要是结构和数目异常。数目异常状态主要包括无精子，精子少导致不育等症状[5]。染色体异常引发男性不育使用药物治疗无效，早期确诊可有效避免盲目求治，减轻负担及社会医疗压力，因此，对患者进行染色体检查具有重要的临床价值。

本文研究结果显示染色体异常作为男性不育的首因。染色体畸变发生易致性器官发育不良及不良孕产间粗存在一定密切相关性。针对此类病患，不仅要从传统上行常规医院检查，且还需在临床上进行细胞遗传学检查。因此，为明确遗传学诊断有效避免盲目性采取治疗措施，为更好的指导其采取辅助手段解决不育不育难题。