泰州地区宠物弓形虫感染流行现状调查与防治

2019-08-20卓国荣周红蕾卢炜魏宁刘俊栋高雪敏

江苏农业科学 2019年8期

卓国荣　周红蕾　卢炜　魏宁　刘俊栋　高雪敏

摘要：为调查泰州地区宠物犬猫弓形虫感染流行现状，随机采集泰州地区不同来源犬与猫的血液样本，采用弓形虫抗体ELISA试剂盒与弓形虫抗体胶体金试纸条2种方法对该地区犬猫弓形虫感染情况进行流行病学调查，并开展治疗试验。结果表明，该地区597份宠物血清样本经ELISA试剂盒与胶体金试纸条2种方法检测出的弓形虫抗体阳性率分别为12.06%（犬8.05%，猫19.34%）、11.60%（犬7.79%，猫18.40%）;且农村散养犬和猪与流浪犬和猫的血清弓形虫抗体阳性率最高;成年犬和猫的弓形虫抗体阳性率明显高于幼年犬和猫;春季采集的犬和猫血清样本弓形虫抗体阳性率最高;阳性样本宠物主人血清弓形虫抗体阳性率为8.57%;对于具有临床症状的感染犬猫通过综合治疗措施，治愈率达81.82%。同时数据显示，ELISA试剂盒检测敏感性高于胶体金试纸条，但两者差异不显著。

关键词：泰州地区;犬;猫;弓形虫;流行病学;调查;防治

中图分类号： S852.7文献标志码： A

文章编号：1002-1302（2019）08-0191-03

弓形虫病是一种发生于世界各地的人畜共患寄生虫病，由刚地弓形虫（Toxoplasma gondii）感染引起的，可造成人及动物流产、畸胎、胎儿发育缺陷、生长受阻、死亡等不同程度的危害[1]，并加重艾滋病患者、肿瘤患者病情[2-3]。弓形虫的宿主范围广泛，包括人、猪、马、牛、羊、犬、猫、老鼠等多种哺乳动物及鸡、鸭、鹅、鸟等禽类[4]，其中猫及猫科动物是弓形虫的终末宿主，人与犬等为中间宿主，据2011年1月至2016年12月间文献报道我国各地犬、猫、人血清弓形虫抗体阳性率分别为2.60%[5]～47.22%[6]、11.10%[7]～39.08%[8]、5.17%[9]～16.30%[10]。

近5年来，我国饲养宠物数量急剧增加，人与犬猫接触更加密切，增加了犬猫将弓形虫传播给人类的机会，有文献表明密切接触过宠物犬猫的人的弓形虫感染率明显高于无接触者[11-13]，因此，犬猫传播弓形虫的危害应引起宠物犬猫饲养者高度重视。

为了解江苏省泰州地区犬猫弓形虫感染流行现状，本研究于2016年9月至2017年8月间采用弓形虫抗体ELISA试剂盒与弓形虫抗体胶体金试纸条2种方法对本地区犬猫进行弓形虫抗体检测，同时针对患病宠物开展弓形虫病治疗试验，以调查出泰州地区宠物弓形虫感染流行特点，对本地区宠物弓形虫病的临床诊疗与防控以及公共卫生安全具有重要的指导意义。

1材料与方法

1.1调查对象

随机采集江苏省泰州海陵区、高港区、姜堰区、兴化、泰兴与靖江地区的犬与猫血清样本共597份（犬385份，猫212份），其中来源于宠物医院就诊与体检犬、猫血清样本399份（犬278份，猫121份），来源于宠物市场犬、猫血清样本118份（犬75份，猫43份），来源于农村散养与流浪犬、猫血清样本80份（犬32份，猫48份）。对所采集的每份血清样本登记样本来源、临床症状、性别、年龄与采集时间，并做好编号与标记，于-18 ℃冻存。

1.2试剂与仪器

弓形虫抗体胶体金试纸条（GICA），泰州三联百晗生物科技有限公司研制，产品在有效期内;动物弓形虫IgG抗体检测试剂盒（ELISA），珠海经济特区海泰生物制药有限公司生产，产品在有效期内;仪器包括酶标仪、离心机、冰箱、10～100 μL可调移液器等。

1.3检查方法

1.3.1临床症状检查

患弓形虫病的犬、猫会出现相应的临床症状。犬弓形虫病主要表现精神萎靡、饮食欲降低至废绝，体温升高至40～42 ℃，并表现为稽留热，患犬往往有眼分泌物与鼻分泌物、呼吸次数增加、严重的呼吸困难或喘息，严重感染的患犬出现贫血、尿液深黄甚至血尿;消化系统受破坏，出现轻度腹泻至出血性腹泻。有些患犬在患病后期表现出抽搐、运动共济失调等神经症状，逐渐体温下降，衰竭而亡。妊娠母犬发病会出现早产、流产，产出死胎或弱胎。很多犬感染弓形虫后不发病，表现为隐性感染，临床症状不明显，但可向体外排出弓形虫包囊。弓形虫病在临床症状上与犬瘟热、犬布鲁氏杆菌病等有类似之处，须要鉴别诊断。

猫弓形虫病急性期主要表现精神萎靡不振，食欲下降，发热至40 ℃以上。有些患猫表现出对光反应迟钝、眼结膜充血、呕吐、腹泻等症状。有些患猫出现黄疸、运动无力、走路困难。怀孕猫发病可表现流产、产死胎等现象。慢性期主要表现为厌食、发热（体温在39.7～41.1 ℃之间，持续时间长的可达1周）。有些猫出现运动失调、惊厥、瞳孔不均、视觉丧失、抽搐等中枢神经症状，怀孕猫同样可出现流产或死胎。猫弓形虫病应与猫流感、猫瘟热等病进行鉴别诊断。

采集样本时对犬猫进行临床检查，记录临床症状，测量体温，对于发热犬、猫及有类似症状的犬、猫做好标记。

1.3.2犬猫血清样本弓形虫抗体检测

使用动物弓形虫IgG抗体检测试剂盒与弓形虫抗体胶体金试纸条分别对犬、猫血清样本進行弓形虫抗体检测，检测操作方法严格按照产品说明书进行。

1.3.3宠物主人血清弓形虫抗体检测

对于犬猫血清弓形虫抗体检测结果为阳性的样本，将检测结果反馈给宠物主人，由宠物主人到医院进行自身弓形虫抗体检测，并记录检测结果。

1.4治疗方案

根据患犬状况，治疗原则为抗弓形虫感染，对症治疗（退热、控制继发感染、补液、补充电解质、增强肝脏解毒能力），以及饲养环境消毒。

驱杀弓形虫用药为磺胺嘧啶注射液0.06 g/kg+甲氧苄胺嘧啶（14 mg/kg TMP），肌肉注射，2次/d，连用3 d;3 d后若血检仍有炎症，给予头孢噻呋钠5 mg/kg，皮下注射;补液与补充体能给予复方氯化钠注射液30 mL/kg、维生素C注射液100～500 mg/次、三磷酸腺苷二钠注射液10～20 mg/次、注射用辅酶A 25～50 U/次、50%葡萄糖5～10 g/次，混匀后静脉滴注，滴注频率为1次/d，连用5～7 d;将犬猫日常活动的区域进行环境消毒，对猫排泄的粪便单独消毒并深埋。

2结果与分析

2.1血清弓形虫抗体结果

由表1可知，597份血清样本中，ELISA法检测出阳性样本72份（犬31份，猫41份），阳性率12.06%;GICA法检测出阳性样本69份（犬30份，猫39份），阳性率11.56%。ELISA法与GICA法检测犬血清弓形虫抗体阳性率分别为 8.05%、7.79%，检测出猫血清弓形虫抗体阳性率分别为 19.34%、18.40%。经分析可知，猫血清弓形虫抗体阳性率明显高于犬血清弓形虫抗体阳性率，ELISA法与GICA法检测总样本阳性率差别不显著（P>0.05），但ELISA法敏感性高。

2.23种不同来源犬猫血清样本弓形虫抗体结果

由表2可知，597份血清样本中，ELISA法对来源于就诊与体检犬与猫血清样本、宠物市场犬与猫血清样本、农村散养与流浪犬猫血清样本的弓形虫抗体阳性检出数量分别为42份（犬22份，猫20份）、12份（犬5份，猫7份）与18份（犬4份，猫14份），阳性率分别为10.53%（犬7.91%，猫 16.53%）、10.17%（犬6.67%，猫16.28%）、22.50%（犬 12.50%，猫29.17%）;GICA法对就诊与体检犬猫血清样本、宠物市场犬猫血清样本、农村散养与流浪犬猫血清样本的弓形虫抗体阳性检出数量分别为40份（犬21份，猫19份）、12份（犬5份，猫7份）与17份（犬4份，猫13份），阳性率分别为10.03%（犬7.55%，猫15.70%）、10.17%（犬6.67%，猫16.28%）、21.25%（犬12.50%，猫27.08%）。

分析表明，在不同来源血清样本中，猫的弓形虫抗体阳性率均高于犬的阳性率，其中农村散养与流浪犬猫的血清弓形虫抗体阳性率最高，宠物市场犬猫弓形虫抗体阳性率最低，表明卫生条件差，更容易导致弓形虫感染。ELISA法与GICA法检测不同来源犬与猫的血清弓形虫抗体阳性率差别不显著（P>0.05），但ELISA法检出率稍高于GICA法。

2.3幼年与成年犬猫血清样本弓形虫抗体结果

由表3可知，597份血清样本中，年龄<12月龄的幼年犬、猫血清样本为360份，年龄>12月龄的成年犬、猫血清样本为237份。ELISA法对幼年犬猫、成年犬猫血清样本的弓形虫抗体阳性检出数分别为28份（犬13份，猫15份）、44份（犬18份，猫26份），阳性率分别为7.78%（犬5.53%，猫12.00%）、18.57%（犬12.00%，猫29.89%）;GICA法对幼年犬猫、成年犬猫血清样本的弓形虫抗体阳性检出数分别为27份（犬13份，猫14份）、42份（犬17份，猫25份），阳性率分别为7.50%（犬5.53%，猫11.20%）、17.72%（犬 11.33%，猫28.74%）。

分析发现，2种方法检测的成年犬猫血清样本弓形虫抗体阳性率均高于幼年犬猫弓形虫抗体阳性率，并且差异显著（P<0.05），表明随着犬猫年龄的增长，被弓形虫感染的机会增加。2种方法对于幼年犬猫、成年犬猫的血清样本检测结果差异不显著（P>0.05）。

2.4不同季节采集血清样本弓形虫抗体结果

由表4可知，597份血清样本中，春季采样127份（犬73份，猫54份），夏季采样175份（犬101份，猫74份），秋季采样210份（犬142份，猫68份），冬季采样85份（犬69份，猫16份）。ELISA法对春季、夏季、秋季与冬季采集的犬猫血清样本弓形虫抗体阳性检出数量分别为23份（犬7份，猫16份）、11份（犬6份，猫5份）、31份（犬14份，猫17份）、7份（犬4份，猫3份），阳性率分别为18.11%（犬9.59%，猫 29.63%）、6.29%（犬5.94%，猫6.76%）、14.76%（犬 9.86%，猫25.00%）、8.24%（犬5.80%，猫18.75%）;GICA法对春季、夏季、秋季与冬季采集的犬猫血清样本弓形虫抗体阳性检出数量分别为22份（犬7份，猫15份）、11份（犬6份，猫5份）、30份（犬14份，猫16份）、6份（犬3份，猫3份），阳性率分别为17.32%（犬9.59%，猫27.78%）、6.29%（犬5.94%，猫6.76%）、14.29%（犬9.86%，猫23.53%）、7.06%（犬4.35%，猫18.75%）。

表明春季采集的犬猫总血清样本弓形虫抗体阳性率最高，秋季次之，夏季最低;猫的血清弓形虫抗体阳性率也是春季最高，秋季次之，夏季最低，但犬的血清弓形虫抗体阳性率秋季最高，春季次之，冬季最低，这可能与犬秋季外出活动觅食增加有关。2种方法检测结果差异不显著（P>0.05）。

2.5部分宠物主人血清弓形虫抗体结果

犬、猫血清弓形虫抗体检测为阳性的宠物主人有35人至医院进行了个人血清弓形虫抗体检测，结果有3位宠物主人血清弓形虫抗体为阳性，阳性率为8.57%，表明宠物感染弓形虫会增加宠物主人遭受弓形虫感染概率。

2.6治疗效果

对具有临床症状的11只抗体阳性犬、猫开展了治疗试验，经过1个疗程治疗，9只临床症状消失，恢复正常，有2只幼年宠物死亡，治疗有效率81.82%，表明弓形虫病经过综合治疗治愈率较高。

3讨论与结论

目前，我国检测弓形虫感染的方法有显微镜镜检、动物接种、萨宾-费尔德曼染色试验（DT）、间接血凝试验（IHA）、改良凝集试验（MAT）、间接荧光抗体试验（IFA）、酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫胶体金技术（GICA）以及分子生物学诊断技术（PCR）等检查方法[14-16]。临床中应用较多的方法为IHA、ELISA与GICA，本研究表明ELISA法与GICA法检测出的阳性结果具有较高的符合率（95.83%），两者没有明显差异。ELISA法操作相对复杂，更利于大批量样本同時检测，免疫胶体金试纸条操作简便，适合对单个样本的快速检测，便于临床推广使用。

2005年公布的我国人群弓形虫平均感染率为 7.88%[17]，由于弓形虫对母体与胎儿具有严重危害，因此是人类优生优育的大敌，做好弓形虫感染的预防工作，对于阻止弓形虫病的发生具有重要意义。目前，我国宠物犬猫饲养量大，人与犬猫接触密切率增加，是引起人类弓形虫感染的危险因素，因此，做好犬猫弓形虫感染筛查工作，对于预防人类弓形虫感染具有重要意义。本次流行病学调查显示，泰州地区犬的弓形虫感染率为8.05%，猫的弓形虫感染率为19.34%，比2012年泰州地区犬猫弓形虫抗体阳性率有所下降[18]，低于江苏省南京市市区犬弓形虫抗体阳性率19.5%[7]、宿迁地区猫弓形虫抗体阳性率35.85%[19]，但阳性样本宠物主人弓形虫抗体阳性率达到8.57%，仍应引起泰州地区饲养宠物者高度重视，一方面要加强弓形虫危害宣传，另一方面宠物主人要养成良好卫生习惯，不给宠物吃生食、生肉，对宠物活动的区域经常消毒，对犬猫粪便消毒深埋，定期给犬猫口服驱虫药物，定期带犬猫至宠物医院进行弓形虫抗体检查，以便早发现早治疗。

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