种植体周围炎中NF-κB的表达及其与RANKL的相关性初探

李洪波　黄鹤　李巧梅　石磊

【摘要】 目的：探究种植体周围炎中NF-κB的表达及其与RANKL的相关性。方法：选取本院2017年1月-2018年6月间行种植修复后发生种植体周围炎的患者45例（种植体61颗），纳入观察组;同时选择同时期行种植治疗且无种植体周围炎发生的患者45例（种植体52颗），纳入对照组。记录并对比种植体周围探诊深度（PPD）、牙槽骨丧失深度（DSB）、改良龈沟探诊出血指数（mSBI）和改良菌斑指数（mPLI），同时测定龈沟液中核转录因子（Nuclear factor-κB，NF-κB）和核因子受体活化因子配体（Receptor activator of NF-κB ligand ，RANKL），并分析两者的相关性。结果：轻、中、重度种植体周围炎及健康种植体的PPD、DSB、mSBI及mPLI比较差异均有统计学意义（F=0.214，0.233，0.257，0.313;P=0.012，0.011，0.008，0.024），且各指标组内比较差异均有统计学意义（P<0.05）;各组龈沟液中NF-κB、RANKL比较，差异均有统计学意义（F=0.872，1.017;P=0.001，0.000）。Pearson相关分析显示种植体周围炎龈沟液中NF-κB及RANKL存在正相关（r=0.631，P=0.000）。结论：种植体周围炎龈沟液中NF-κB表达显著增高，且与RANKL存在明显相关，其随炎症严重程度的增加而升高。

【关键词】 NF-κB; RANKL; 种植体周围炎; 相关性

【Abstract】 Objective：To explore the expression of NF-κB and its correlation with RANKL in peri-implantitis.Method：From January 2017 to June 2018，45 patients（61 implants）with peri-implantitis after implant restoration were selected into the observation group，45 patients（52implants）with no peri-implantitis after implant restoration were selected into the control group.The periimplant detection depth（PPD），alveolar bone loss depth（DSB），modified sulcus bleeding index（mSBI）and modified plaque index（mPLI）were recorded and compared，the Nuclear Factor-KappaB（NF-κB）and the Receptor activator of NF-κB ligand（RANKL）in gingival crevicular fluid were measured and the correlation was analyzed.Result：There were significant differences in PPD，DSB，mSBI and mPLI in light，medium and severe periimplant inflammation and healthy implants（F=0.214，0.233，0.257，0.313;P=0.012，0.011，0.008，0.024），and there were significant differences within each indicator group（P<0.05）.There were significant differences in NF-κB and RANKL in gingival crevicular fluid of each group（F=0.872，1.017;P=0.001，0.000）.Correlation analysis showed that there was a positive correlation between NF-κB and RANKL in gingival crevicular fluid of peri-implantitis（r=0.631，P=0.000）.Conclusion：The expression of NF-κB in gingival crevicular fluid is significantly increased，has a significant correlation with RANKL，and it related to the severity of inflammatory.

【Key words】 NF-κB; RANKL; Peri-implantitis; Correlation

First-authors address：Shenzhen Dental Hospital to Southern Medical University（Guangdong Shenzhen Dental Medical Center），Shenzhen 518001，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2019.10.004

随着种植牙体技术的不断探索及发展[1]，使用种植牙体技术修复牙缺失的患者也越来越多，同时种植体周围炎作为种植修复后常见的并发症之一[2]，在临床工作中也越来越常见，其严重影响了种植修复效果及治疗后咬合功能，极大降低了患者治疗满意度及生活质量[3]，为此寻求种植体周围炎的发生机制及治疗途径已成为当前研究热点。文献[4-5]指出NF-κB和RANKL在骨性相关疾病患者中的表达显著增加，并与种植体周围炎的发生存在一定相关性，可能成为治疗种植体周围炎的方向，但其两者在种植体周围炎中的表達及关系尚不明确，本研究主要探究种植体周围炎中NF-κB与RANKL的表达及其相关性，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 采用前瞻性对照研究，选取本院2017年1月-2018年6月间行种植修复后发生种植体周围炎的患者45例（种植体61颗）纳入观察组。纳入标准：（1）符合种植体周围炎诊断标准[6]，种植体周围软组织存在炎症并累及骨组织，可表现为探查出血及骨组织吸收，PPD≥4 mm，放射骨损失量≥2 mm;（2）种植修复过程顺利，术中未出现明显并发症;（3）治疗依从性好。排除标准：（1）既往存在口腔疾病及治疗史;（2）伴有全身代谢或免疫系统相关疾病;（3）未服用抗生素、免疫抑制剂或非甾体消炎药;（4）女性患者在非妊娠期或月经期。本研究已充分告知患者并经过本院伦理委员会审批。同时根据种植体周围炎严重程度进行分组[7]，观察组1共21例，轻度种植体周围炎，4 mm≤PPD<6 mm，DSB<種植体长度25%;观察组2共14例，中度种植体周围炎，6 mm≤PPD<8 mm，DSB<种植体长度50%;观察组3共10例，重度种植体周围炎，PPD>8 mm，DSB>种植体长度50%。同时选择同时期行种植治疗且无种植体周围炎发生的患者45例（种植体52颗）纳入对照组。

1.2 方法 由同一人员测量患者PPD、DSB，并记录患者mSBI和mPLI[8]，mSBI分为0～3级：0级，种植体表面无菌斑;1级，种植体表面用探针轻柔划过可发现菌斑;2级，种植体表面肉眼可见菌斑;3级，种植体表面有大量的软垢堆积。mPLI分为0～3级：0级，探诊种植体龈缘没有出血;1级，探诊种植体龈缘有分散的点状出血;2级，探诊种植体龈缘在龈沟内呈线状出血;3级，种植体龈缘有重度或者自发出血。龈沟液的收集：去除牙龈周边菌斑及软垢，使用干燥无菌棉球擦拭种植体龈沟周边，放置棉卷隔湿，并用气枪空气吹干，以防止唾液污染，将合适大小的消毒滤纸条插入种植体的牙冠近中、远中颊侧和舌（鄂）1 mm并维持30 s，随后放入样品稀释管中，于-70℃保存，使用NF-κB及RANKL的ELISA试剂盒（R&D Systems公司）检测其中含量。

1.3 统计学处理 采用SPSS 23.0进行数据处理，计量资料用（x±s）表示，多组比较使用F检验，组间比较使用LSD-t检验，并使用Pearson相关性分析，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 观察组与对照组基线资料比较 各组一般资料比较差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性。见表1。

2.2 各组患者种植情况对比 四组的PPD、DSB、mSBI及mPLI比较差异均有统计学意义（F=0.214，0.233，0.257，0.313;P=0.012，0.011，0.008，0.024），且各指标组内比差异均有统计学意义（P<0.05）。见表2。

2.3 龈沟液中NF-κB及RANKL比较 各组龈沟液中NF-κB、RANKL比较，差异均有统计学意义（F=0.872，1.017;P=0.001，0.000）。见表3。

2.4 观察组龈沟液中NF-κB及RANKL相关性分析 Pearson相关分析显示观察组龈沟液中NF-κB与RANKL存在正相关（r=0.631，P=0.000）。见图1。

3 讨论

文献[9]显示我国种植体周围炎于患者间发生率为28%～56%，于种植体间发生率为12%～43%，其本质为口腔感染类疾病，病理改变为种植体周围软、硬组织的炎症反应[10]，局部可见典型充血水肿反应，严重影响种植体及口腔功能;此外炎症会破坏种植体周围组织对种植体的支持作用，导致种植体稳定性下降[11]。因此探究其发生机制、危险因素对于指导临床治疗显得尤为重要，NF-κB及RANKL在许多骨性相关疾病中存在着数量和功能的异常，但与种植体周围炎的关系尚不明确，且两者间相互关系也未见报道，为此本研究主要探究种植体周围炎中NF-κB与RANKL的表达及其相关性。

NF-κB最早由Baltimore于1986年报道[12]，是一类能与多种基因启动子发生特异性结合并增强其转录的蛋白质因子，已有研究表明其在免疫应答、炎性反应、细胞黏附、细胞增殖与凋亡等方面扮演着重要角色[13]，其在外界某些刺激下被激活并进入细胞核，并与特定基因的启动子或增强子上相应位点结合，启动或调控特定基因的转录，最终促使IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8、IFN-γ等炎症因子的释放[14]，从而造成局部或全身的炎症状态，其中RANKL正是激活NF-κB的细胞因子之一。有研究发现，RANKL在骨吸收、骨坏死等方面扮演着重要角色，RANKL活性的失控将导致哺乳动物某些系统骨组织疾病如骨质疏松、类风湿性关节炎、牙周炎等的发生[15]。同时有研究，表明RANKL与种植体周围炎关系密切，RANKL的过度活化可能在种植体周围炎中发挥重要作用[16]。

PPD、DSB、mSBI及mPLI可直观反应种植体周围炎症严重程度，是临床检查中最直观、简便的方法[17]。本研究结果表明，发生种植体周围炎的上述指标明显高于健康种植体，证明种植体周围炎确实存在炎性反应，且种植体周围炎越严重，其上述炎症指标也越来越高，这与郑德春等[18]研究结果一致。

通过测定不同组别龈沟液中NF-κB及RANKL含量，结果表明轻、中、重度种植体周围炎龈沟液中NF-κB及RANKL均显著高于健康种植体，且重度种植体周围炎中含量显著高于中、低度炎症，中度显著高于低度炎症，表明NF-κB及RANKL通路在种植体周围炎的发生中具有一定作用，且随着炎症程度增加，其表达水平也显著增加，李岩等[12]对犬类种植体周围炎模型中NF-κB的研究也得出了类似结论。相关性分析显示种植体周围炎龈沟液中NF-κB与RANKL存在正相关，Li等[19]研究发现，RANKL与其受体的结合，可导致NF-κB的活化，进而引发破骨细胞分化和促进炎性细胞因子的产生，同时阻止炎性细胞的凋亡，增加局部破骨性炎症的发生。

综上所述，种植体周围炎龈沟液中NF-κB表达显著增高，且与RANKL存在明显相关，其随炎症严重程度的增加而升高。

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（收稿日期：2018-09-30）（本文编辑：周亚杰）