血清新型细胞角蛋白联合肿瘤标志物检测在非小细胞肺癌诊断中的应用

张宇

【摘要】 目的：探讨血清新型细胞角蛋白标志物Monototal联合其他肿瘤标志物在非小细胞肺癌诊断的临床价值。方法：检测非小细胞肺癌患者126例（肺鳞癌67例、肺腺癌59例，非小细胞肺癌组）、肺部良性疾病患者68例（肺部良性疾病组）和健康人群45例（健康对照组）血清中细胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）、糖类抗原153（CA153）、神经元特异烯醇化酶（NSE）及新型细胞角蛋白标志物Monototal水平，并统计分析其敏感性和特异性。结果：非小细胞肺癌组血清CYFRA21-1、CA153、NSE及Monototal水平均显著高于肺部良性疾病组及健康对照组，比较差异均有统计学意义（P<0.05）;非小细胞肺癌组血清CYFRA21-1、CA153、NSE及Monototal阳性率显著高于肺部良性疾病组及健康对照组，比较差异均有统计学意义（P<0.05），敏感性分别为66.7%、32.5%、40.4%及77.8%;各项肿瘤标志物单检对非小细胞肺癌诊断的灵敏度分别为66.7%、32.5%、40.4%和77.8%，4项指标联合检测的敏感性为89.7%，显著高于单项检测指标，比较差异均有统计学意义（P<0.05）。结论：Monototal联合CYFRA21-1、CA153、NSE检测能提高非小细胞肺癌诊断的灵敏性。

【关键词】 新型细胞角蛋白; 非小细胞肺癌; 联合诊断; 灵敏性; 特异性

【Abstract】 Objective：To observe the clinical value of combined detection of novel cytokeratin biomarker Monototal and tumor markers in diagnosis of non-small cell lung cancer.Method：Levels of serum CYFRA21-1，CA153，NSE and Monototal in 126 non-small cell lung cancer patients（67 squamous carcinoma cases，59 adenocarcinoma cases，non-small cell lung cancer group），68 benign pulmonary diseases patients（benign pulonary diseases group）and 45 healthy volunteers（healthy control group）were measured and their sensitivity and specificity were analyzed.Result：The levels of serum CYFRA21-1，CA153，NSE and Monototal in non-small cell lung cancer group were greatly increased compared with the benign pulmonary diseases group and healthy control group（P<0.05）.The non-small cell lung cancer group had significantly higher positive rate in serum CYFRA21-1，CA153，NSE and Monototal than the benign pulmonary diseases group and health control group（P<0.05），with sensitivity respectively as 66.7%，32.5%，40.4% and 77.8%.Single indicator detection had sensitivity of nonsmall cell lung cancer respectively as 66.7%，32.5%，40.4% and 77.8%，which was 89.7% in combined detection of 4 indicators.The combined detection had higher sensitivity than single indicator detection，the difference had statistical significance（P<0.05）.Conclusion：Combined detection of serum CYFRA21-1，CA153，NSE and Monototal can improve the sensitivity of non-small cell lung cancer diagnosis.

【Key words】 Novel cytokeratin biomarker monototal; Non-small cell lung cancer; Combined detection; Sensitivity; Specificity

First-authors address：Jingzhou Chest Hospital，Jingzhou 434020，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2019.04.016

肺癌是我國发病率和死亡率最高的一种恶性肿瘤，其中非小细胞肺癌高达80%，术后5年内生存率较低，主要因为此类肿瘤术后容易复发和转移[1-2]。当下对于非小细胞肺癌的诊断技术主要依赖于细胞学和组织学检查，并且组织的获取会引起患者较大的创伤，还会导致其他并发症的发生[3]。血清肿瘤标志物的检测可以很好地避免细胞组织学检测方法带来的弊端，具有创伤小、检测标本来源方便、方法重复性好等优点[4]，并且研究发现血清肿瘤标志物在癌症诊断、分类及预后等方面都有较好的临床应用价值[5]。细胞角蛋白（cytokeratin，CK）属于上皮细胞中特异表达的一种中间微丝蛋白[6]。近年来，一种新型细胞角蛋白Monototal试剂盒能够同时用于CK8、18和19单克隆片段，并且研究发现Monototal对非小细胞肺癌的诊断具有较好敏感性[7-8]，但其联合其他肿瘤标志物对非小细胞肺癌的诊断研究尚缺乏。因此，本文研究了Monototal联合血清中细胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）、糖类抗原153（CA153）、神经元特异烯醇化酶（NSE）检测在非小细胞肺癌诊断中的临床价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 非小细胞肺癌组：收集2016年3月-2017年10月本院肿瘤科确诊的非小细胞肺癌患者126例，其中男81例，女45例，年龄33～78岁，平均（54.7±14.2）岁，均通过细胞学和组织学确诊;其中肺鳞癌患者67例，肺腺癌患者59例。纳入标准：（1）非小细胞肺癌组及肺部良性疾病组患者入院确诊为该类疾病便被纳入研究，在此之前一个月内未服用任何药物，以排除药物对血清中各项研究指标的影响;（2）所有研究对象均接受支气管镜及临床病理明确的诊断;（3）不存在其他并发症、内分泌性疾病及其他恶性肿瘤;（4）签署知情同意书的患者。排除标准：（1）并发有严重器官衰竭性疾病及内分泌性疾病;（2）未能确诊的患者;（3）正在接受放化疗及拒绝参加的患者;（4）患者病情加重急需马上治疗的患者。肺部良性疾病组：纳入同期在本院就诊的肺部良性疾病患者68例，男45例，女23例;年龄31～80岁，平均（52.5±12.9）岁，均通过细胞学和组织学检测确诊。健康对照组纳入同期本院体检中心的健康人群45例，男31例，女14例;年龄29～77岁，平均（51.4±11.8）岁，无胃肠道、肝脏和生殖系统病变。三组年龄、性别比较，差异均无统计学有意义（P>0.05），具有可比性。并且此研究获得医院伦理委员会批准。

1.2 方法 收集所有研究对象清晨空腹静脉血4 mL，于5 000 r/min离心8 min，分离血清储存于-80 ℃超低温冰箱中待测。采用罗氏Cobas E601电化学发光免疫分析仪检测血清中细胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）、糖类抗原153（CA153）及神经元特异烯醇化酶（NSE）含量。采用Monototal试剂盒（德国，ILD biotech）检测血清角蛋白8、18、19浓度。

1.3 观察指标 观察非小细胞肺癌患者、肺部良性疾病患者、健康体检者中CYFRA21-1（0～3.3 ng/mL）、CA153（0～35 U/mL）、NSE（0～25 ng/mL）及Monototal（0～75 U/L）水平差异及阳性率，观察比较4种肿瘤标志物及联合检测对非小细胞肺癌诊断的灵敏度和特异度。4种指标联合诊断时只要其中1种指标含量为阳性即确定为阳性患者。

1.4 统计学处理 使用SPSS 20.0统计学软件进行分析，计量资料以（x±s）表示，比较采用t检验，计数资料以率（%）表示，比较采用字2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组纳入对象肿瘤标志物含量比较 非小细胞肺癌组患者血清CYFRA21-1、CA153、NSE及Monototal水平均显著高于肺部良性疾病组及健康对照组，三组比较差异均有统计学意义（P<0.05）。见表1。

2.2 三组纳入对象血清肿瘤标志物在各组中阳性率比较 非小细胞肺癌组患者血清CYFRA21-1、CA153、NSE及Monototal阳性率明显高于肺部良性疾病组和健康对照组，比较差异均有统计学意义（P<0.05）。见表2。

2.3 肿瘤标志物单检和联合检测对非小细胞肺癌的诊断价值 CYFRA21-1、CA153、NSE及Monototal单检对非小细胞肺癌诊断的灵敏度分别为66.7%、32.5%、40.4%和77.8%，4项指标联合检测的敏感性为89.7%，显著高于单项检测指标，比较差异均有统计学意义（P<0.05）。4项肿瘤标志物CYFRA21-1、CA153、NSE及Monototal在肺部良性疾病组及健康对照组中均正常的有98例，特异性为86.7%，低于CYFRA21-1、CA153、NSE及Monototal单一指标诊断的特异度（96.5%、98.2%、97.3%和92.3%）。见表3。

3 讨论

细胞角蛋白在正常细胞演变为恶性肿瘤细胞后阶段过程中是稳定表达的，并且通常持续表达[9-10]。在癌症演变过程中，角蛋白碎片和其他蛋白水解产物会进入血液循环中，对这些标志物进行检测分析可以促使非小细胞肺癌的早期诊断。目前，已报道的细胞角蛋白有二十余种，其中CK19可作为上皮恶性肿瘤细胞活性的标志物，并应用于肿瘤的诊断、预后及疗效评估[11-13]。细胞角蛋白只有被降解为可溶性小片段后才能释放入血，血清学检查只针对某些特异抗体，其中CYFRA21-1就是CK19的一种水解片段[14]。Monototal试剂盒为角蛋白新型检测方法，可以同时检测识别CK8、18和19单克隆片段。本文结果提示，非小细胞肺癌组血清Monototal水平均显著高于肺部良性疾病组及健康对照组，并且血清Monototal阳性率显著高于肺部良性疾病组及健康对照组，说明新型细胞角蛋白Monototal标志物可以很好地区分非小细胞肺癌和非肺癌患者。血清Monototal诊断非小细胞肺癌的敏感性和特异性分别为77.8%和92.3%。前期也有相关研究探讨了Monototal在非小细胞肺癌临床监测中的价值，表明非小细胞肺癌患者血清Monototal水平与肿瘤负荷存在相关性[15-17]。本试验发现Monototal对肺鳞癌诊断的敏感性为94.0%，显著高于肺腺癌，说明Monototal可以很好地區分肺腺癌和肺鳞癌。在理论上Monototal包括细胞角蛋白8、18、19三个单克隆抗体，三种细胞角蛋白片段均属于细胞角蛋白家族，但三种单克隆抗体之间是否存在相互作用或干扰尚需进一步研究。

同时，本文也检测分析了血清CYFRA21-1、CA153及NSE肿瘤标志物对非小细胞肺癌诊断的临床价值，结果发现非小细胞肺癌组血清CYFRA21-1、CA153及NSE水平均显著高于肺部良性疾病组及健康对照组，非小细胞肺癌组血清CYFRA21-1、CA153及NSE阳性率显著高于肺部良性疾病组及健康对照组，敏感性分别为66.7%、32.5%及40.4%，各项肿瘤标志物单检对非小细胞肺癌诊断的灵敏度分别为66.7%、32.5%和40.4%，然而4项指标联合检测的敏感性为89.7%，显著高于单项检测指标。因此，在以后临床诊断非小细胞肺癌过程中应将新型细胞角蛋白Monototal联合其他肿瘤标志物进行检测，可以更好地提高检测灵敏度。早期研究也发现CYFRA21-1联合NSE检测对非小细胞肺癌诊断的灵敏度和特异度均较高，进一步研究发现CYFRA21-1对鳞癌诊断价值更高，NSE对腺癌诊断价值更高[18]。潘传四等[19]研究发现CYFRA21-1、CA125及NSE可以发挥互补作用，显著提高非小细胞肺癌的阳性检出率，并且非小细胞肺癌阳性检出率与癌症发展进程相关。吕翠红等[20]采用中药联合干扰素对晚期非小细胞肺癌患者进行治疗发现，治疗后患者血清中VEGF、CA153及CYFRA21-1水平均显著降低，提示CA153及CYFRA21-1可以作为预后判断的指标。

綜上所述，Monototal对非小细胞肺癌的诊断具有较好的敏感性，可以用于非小细胞肺癌的辅助诊断，而Monototal联合其他肿瘤标志物可以更好地提高检测的敏感性。

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（收稿日期：2018-07-17） （本文编辑：周亚杰）