10厂家小剂量阿司匹林肠溶片含量及水杨酸限量对比分析*

刘泳珊，陈小祝，梁伟光，张焰明 ，聂 鑫△

（1.广东省佛山市南海区人民医院，广东 佛山 528200； 2.佛山科学技术学院，广东 佛山 528000）

阿司匹林酸性较强，小剂量长期应用会导致胃溃疡、消化道出血和小肠黏膜糜烂等[1-8]，且在生产和贮存过程中又易水解为水杨酸，对胃黏膜有更强的刺激性和损伤[9]。因此小剂量阿司匹林肠溶片中阿司匹林含量和水杨酸限量的控制尤为重要。目前，国内小剂量阿司匹林肠溶片生产厂家众多，本研究中参考文献[10-14]，建立了双波长紫外分光光度测定法，快速测定小剂量阿司匹林肠溶片中阿司匹林含量和水杨酸限量。现报道如下。

1 仪器与试药

1.1 仪器

UV-1600PC型紫外可见分光光度计（上海美谱达仪器有限公司）；BS-110S型分析天平（十万分之一，北京赛多利斯天平有限公司）；SK2200H型超声清洗器（上海科导超声仪器有限公司）；DHG-9240A型恒温干燥箱（巩义市予华仪器有限责任公司）。

1.2 试药

阿司匹林对照品（批号为100113-201405），水杨酸对照品（批号为100106-201104），均购于中国食品药品检定研究院；阿司匹林肠溶片（市售），生产厂家及批号见表1；乙醇等均为分析纯。

表1 阿司匹林肠溶片的生产厂家及批号

2 方法与结果

2.1 检测波长确定

称取适量阿司匹林对照品和水杨酸对照品，用适量乙醇分别溶解，在230～360 nm波长范围内扫描，结果阿司匹林最大吸收波长为275 nm，此时水杨酸也有吸收。为了消除水杨酸的干扰，同时选择325 nm波长，且水杨酸吸光度（A）与275 nm波长处相等，但阿司匹林A值很小，而与275 nm波长处的A值相差很大，故阿司匹林测定双波长确定为275 nm和325 nm。水杨酸的最大吸收波长为304 nm，此处阿司匹林的A值接近基线，可忽略不计，故水杨酸测定波长确定为304 nm。紫外吸收光谱见图1。

图1 紫外吸收光谱图

2.2 方法学考察

线性关系考察：取阿司匹林对照品50.2 mg，精密称定，置50mL容量瓶中，加无水乙醇溶解至刻度，分别制成 20.08，40.16，60.24，80.32，100.40，120.48 μg ／mL系列质量浓度的对照品溶液，以乙醇为空白对照，按拟订测定波长测定吸光度，以质量浓度（C）对ΔA进行线性回归，得阿司匹林线性回归方程Y＝148.63X＋2.6523，r＝0.999 2（n＝5）。同法将水杨酸对照品配制成 8.01，12.01，16.01，20.02，24.02，28.02 μg ／mL 系列质量浓度的对照品溶液，得水杨酸的线性回归方程Y＝38.196X＋0.520 6，r＝0.999 0（n＝6）。可见，阿司匹林和水杨酸质量浓度分别在 20.08 ～100.40 μg／mL 和8.0064～24.0192μg／mL范围内与吸光度线性关系良好。

稳定性试验：将线性关系考察项下阿司匹林和水杨酸对照品溶液分别于 0，0.5，1.0，1.5，2.0 h 时测定A。结果的RSD分别为 0.674% 和 0.472% （n＝5），表明在此条件下供试品溶液稳定性良好。

精密度试验：将线性关系考察项下阿司匹林和水杨酸对照品溶液，分5次取样，测定吸光度。阿司匹林溶液在连续5次测定中，测得的ΔA几乎不变，平均为0.484，RSD为 0.092 4% （n＝5）；水杨酸在 304 nm 波长处连续 5次测得A的平均值为 0.518，RSD为0.286%（n＝5）。结果表明，仪器精密度良好。

重复性试验：取A厂同批号样品5份，依法测定。结果阿司匹林平均含量为96.35%、RSD为0.513%（n＝5），水杨酸限量平均为 0.52% 、RSD为 1.724%（n＝5），表明方法重复性良好。

水杨酸干扰试验：取阿司匹林对照品适量，精密称定，制备阿司匹林质量浓度相同（100.4 μg ／mL）而水杨酸质量浓度（1.2，1.6，2.0 μg ／mL）不同的溶液，其中水杨酸质量浓度的取值设定在药典限量值附近。结果阿司匹林的 ΔA＝0.590，RSD为 0.204%，表明在 275 nm及325 nm波长处测定阿司匹林含量受到水杨酸的干扰极小，双波长测定阿司匹林含量方法可靠。

加样回收试验：取已知含量的样品（批号为31843）10片，研磨，取100 mg，精密称定，加乙醇溶解并定容于100 mL 容量瓶中，精密量取 0.8，1.0，1.2 mL 续滤液，分置3个25 mL容量瓶中，备用。称取阿司匹林对照品约25 mg，精密称定，用乙醇溶解定容至25 mL容量瓶中，取0.8，1.0，1.2 mL，分别加入上述 3 个容量瓶中。同理，配制质量浓度约为40 μg／mL的水杨酸对照品溶液，向上述3个容量瓶中均精密加入2 mL。分别用乙醇定容，摇匀，测定各溶液的A值，依法计算回收率。结果见表2。

表2 阿司匹林加样回收试验结果（n＝9）

2.3 样品含量及限度测定

阿司匹林的含量测定：分别取标示量为100 mg的阿司匹林肠溶片样品10片，标示量为50 mg的样品20片、标示量为25 mg的样品40片，精密称定，研细，并称取约相当于阿司匹林100 mg的样品，精密称定，置100 mL容量瓶中，定容，过滤，取续滤液2 mL置25 mL容量瓶中，定容，摇匀，测定A并计算ΔA及含量。结果见表 3。按 2015 年版《中国药典 （二部 ）》[15]规定，小剂量阿司匹林标示量的百分含量应为93.0% ～107.0%，9个样品阿司匹林的含量合格，1个（F厂家）不合格。

表3 10个厂家样品中阿司匹林含量测定结果（n＝3）

水杨酸限量测定：同法操作，测吸光度A，计算限量，结果见表4。根据2015年版《中国药典（二部）》规定，水杨酸限量不得超过阿司匹林标示量的1.5%，本次测定符合2015年版《中国药典（二部）》规定的样品只有4个，不合格率达60%，限量最高的为3.18%（B厂家），超过规定标准的1倍。

表4 10个厂家样品中水杨酸限量测定结果（n＝3）

2.4 统计学处理

采用SPSS 19.0统计学软件分析，对样品测定数据进行分组（各厂家各对应1组）独立样本t检验分析，以判断样品间阿司匹林含量和水杨酸限量的差异。将使用者反馈较好、价格较高的2个样品：某合资药品（A厂家）及某国产药品（H厂家），与其他药品的数据进行独立样本t检验。结果，A组阿司匹林含量与其他9组间无差异（P＞0.05），而A组＋H组与其他8组间差异显著（P＜0.01）；A组与其他 9组、A组＋H组与其他 8组间水杨酸限量差异均显著（P＜0.01）。详见表5。

表5 统计分析结果

3 讨论

10个厂家的样品中，绝大多数阿司匹林含量都符合药典规定，但水杨酸限量不合格比例超过60%，甚至个别厂家的药品超过药典规定的2倍以上。另外，不同厂家生产的药品间差异也较大；水杨酸限量差异极其显著（P＜0.01）。本研究中仅限于随机购买的10份市售药品，但可能在其他市售药品中也存在，需要引起管理部门的重视。本研究结果表明，我国近来推进的药品一致性评价工作非常必要，对于提高我国药品质量、维护百姓用药安全意义重大。

应用紫外分光光度法对国内10个厂家的小剂量阿司匹林肠溶片进行了定量分析，方法简便、快速、准确，成本低廉。市售的10种小剂量阿司匹林肠溶片中，阿司匹林含量90%都合格，而水杨酸限量则60%不合格。本研究是建立在紫外分光光度法基础上的，可能存在一定的方法学局限，有待今后应用高效液相色谱等方法进行对比。建议国家相关部门加大执法力度，严格管理，尤其是加大对小型药企的管理，确保人民群众的用药安全。