血清胃蛋白酶原水平在胃食管反流病诊断中的应用价值

张巧云，欧红玲，王 岩，吴继敏，李 娜，白 静，李晓宁，王欣茹

（1.火箭军特色医学中心医学检验科，北京100088；2.火箭军特色医学中心胃食管反流中心，北京100088）

胃食管反流病（gastroesophageal reflux disease，GERD）是常见的消化道疾病，指胃内容物或十二指肠内容物反流入食管、咽喉甚至呼吸道等部位，从而引起烧心、不典型胸痛、吞咽困难等不适感。近几年GERD发病率越来越高［1］，严重影响了人们的生活质量，该类疾病临床表现多样，缺少特异体征，导致诊断较为困难。目前临床GERD的诊断多数采用临床症状加24 h食管pH监测、内镜、钡餐等有创检查综合评价［2］，患者的依从性差，检查费用高、普及率不高。临床急需简单快速、创伤性小、经济的新型检验技术协助诊断。体外检测具有标本易得（血液、痰、唾液或反流物）、检测简便、费用低、检出率高、病人检查前后无不适反应等优势，易于患者接受。本研究探讨血清胃蛋白酶原水平检测在GERD诊断中的价值，旨在为临床诊断提供新的检验指标。现报告如下。

材料和方法

1 一般资料

选取本院2018年8月至2019年2月确诊的胃食管反流病患者40例，其中男22例，女18例，年龄28～84岁，平均49.0±17.3岁。胃食管反流组纳入标准（以下任一项符合）［3］：①胃镜提示食管炎；②病理性酸反流（24 h pH-阻抗监测DeMeester评分＞14.7或者反流总次数＞73）；③典型症状＋抑酸治疗有效。另选择40例同期健康体检者为对照组，其中男24例，女16例，年龄29～73岁，平均44.0±12.5岁。两组研究对象均为同期在院，随机选择获得，在性别、年龄构成上差异无统计学意义（P＞0.05）。本研究均获得患者知情同意，并在血清采集检测前均未采取过任何治疗措施。排除标准为：①有严重的心、肺，腹基础疾病者或有精神异常者。②有凝血功能障碍或正在服用阿司匹林、华法林等抗凝药者。③胃癌、萎缩性胃炎患者或曾行胃部手术史。

2 方法

被检者空腹采集静脉血5mL置于真空促凝管内，离心分离血清，-80℃冰冻保存备用。采用全自动化学发光微粒子免疫检测法（雅培I2000及配套试剂）检测PGI、PGII，并计算PGI／PGII比值（PGR）。另2种比对试剂盒分别采用化学发光法（国产某A产品）和速率散射比浊POCT法（国产某B产品）。所有质控品、标准品及检测试剂均由各公司提供。各指标参考范围［4］：PGI＞70ng／mL，PGI／PGII＞3。

3 比对试验

随机选取42份标本，包含有低、中、高各浓度水平，标本均无黄疸、溶血或脂血，本研究以雅培I2000作为参考仪器，国产某A产品与国产某B产品作为实验仪器。将所选取的标本分别在3台仪器上平行检测PGI与PGII，对检测结果进行相关性分析［5］。

4 统计学处理

采用SPSS19.0统计学软件进行数据处理分析，计量资料用表示，组间比较采用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。ROC曲线下面积评估三项指标对GERD的临床诊断价值，用EXCEL软件做线性回归统计，得到回归方程：Y＝b X＋a及相关系数。

结 果

1 胃食管反流组与健康对照组血清中PGI、PGII及PGR水平比较

胃食管反流组PGI、PGR水平与对照组比较明显升高，差异有统计学意义（P＜0.05），胃食管反流组PGII水平与对照组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

表1 2组患者血清PGI、PGII及PGR水平的比较（）

表1 2组患者血清PGI、PGII及PGR水平的比较（）

组别 例数 PGI（ng／mL）PGII（ng／mL） PGR GERD 40 106.71±57.89 13.72±8.91 8.41±2.96健康对照组 40 62.15±43.98 10.52±7.95 6.47±2.87 t值 2.677 1.195 2.115 P值0.01 0.239 0.04

2 PGI、PGII及PGR对胃食管反流的诊断

根据ROC数据分析，PGI用于诊断胃食管反流病的曲线下面积为0.739，介于0.7～0.9之间，表明PGI具有诊断价值，对于胃食管反流的诊断具有一定的指示性。PGII用于诊断胃食管反流病的曲线下面积为0.614，低于0.7，表明PGII对诊断胃食管反流病准确性较低，PGR用于诊断胃食管反流病的曲线下面积为0.696，略低于0.7，表明PGI／PGII诊断价值不大，诊断价值依次为PGI＞PGI／PGII＞PGI。见图1、2、3。

图1 PGI的ROC曲线

图2 PGII的ROC曲线

图3 PGI／PGII的ROC曲线

3 三种检测系统的相关分析

结果表明，国产某A产品与雅培检测系统对PGI、PGII及PGI／PGII检测的相关性都较好，相关系数r分别为0.9947、0.9893、0.8063，见表2。国产某B产品与雅培检测系统对PGI检测的相关性较好，相关系数r为0.9427，PGII与PGI／PGII两者与雅培检测系统相关性稍差，分别为0.7957、0.7695，见表3。

表2 国产某A产品与雅培检测系统的相关系数和回归分析

表3 国产某B产品与雅培检测系统的相关系数和回归分析

讨 论

胃食管反流病已成为一种危害极大的慢性疾病，临床表现极具特异性和复杂性［6］。对其诊治难易程度不一，症状可为频发或偶发，需要多种诊断手段联合确诊或排除GERD。目前临床常用的检查为反流监测、PPI实验、胃镜、喉镜、高分辨率测压和造影，患者对这些有创检查往往难以接受，寻找一种简单易行体外检测方法是当务之急，新的诊断方法如血清胃蛋白酶原检测，简便无创，有很好的应用前景［7］。

胃蛋白酶原属于天冬氨酸蛋白酶家族，由375个氨基酸组成的蛋白多肽链，是胃蛋白酶（蛋白水解酶）的非活性前体［8］。免疫学上可分为2型：胃蛋白酶原I（PGI）和胃蛋白酶原II（PGII），PGI由胃底腺分泌，PGII由胃底腺、幽门腺和Brunner腺分泌。PG由高尔基体分泌入胃腔，然后少量PG通过毛细血管进入血液循环，血液浓度在通常情况下比较稳定［9-10］，波动较小。

有大量报道发现萎缩性胃炎和胃癌患者血清PG和PGR的变化显著，为诊断和评估病情提供重要价值［11］，然而对于PG和PGR在食管反流病中变化如何这方面研究甚少。本研究为了验证PGI及PGI／PGII血清学检测在GERD诊断中的应用价值，选取了40例GERD患者和40例健康体检者作为研究对象进行研究，结果显示，胃食管反流病患者血清中PGI及PGI／PGII水平明显高于正常组，差异有统计学意义（P＜0.05），且ROC曲线分析显示，PGI对胃食管反流病诊断的曲线下面积为0.739，具有一定的诊断价值，这与顾红［12］的研究结论相近，提示血清胃蛋白酶原的检测可作为胃食管反流病诊断的一项新型指标。尽管仍然需要更多大样本的研究来证明胃蛋白酶原在GERD诊断中的灵敏度及特异性，但将胃蛋白酶原测定作为GERD的辅助诊断试验还是比较可靠的，值得在GERD筛查中推广应用，为临床GERD的诊断提供一定的参考依据。目前实验室血清胃蛋白酶原的检测并未普及，主要检测方法有化学发光法、微粒子发光法和免疫比浊POCT法，本研究对三家产品进行相关性分析，结果发现国产化学发光法与进口微粒子化学发光法相关性不错，三项结果均符合，国产免疫比浊POCT法试剂盒与进口微粒子化学发光法试剂盒对于PGI的检测相关性较好，对于PGII及PGI／PGII检测，国产POCT法试剂盒较进口发光法相关性稍差。综上所述，目前实验室仪器具有良好的可比性，符合质量目标要求，具有高通量的大型仪器或检测快速、成本低廉、携带方便的小型床旁快速设备能够满足不同层次中小型实验室、专科实验室的需求。

胃蛋白酶原检测是近年来诊断反流的热点，具有方便、廉价的优点，有望成为筛查GERD的重要手段。下一步仍需要大量收集标本，进一步验证胃蛋白酶原对GERD诊断的临床应用价值，并且可进一步研究GERD的其他实验室诊断指标［13-15］，如胃泌素-17、白介素-6、胃蛋白酶、幽门螺杆菌（呼气试验和血清HP-IgG）、痰及肺泡灌洗液细胞学分析，旨在提高GERD的诊断率，避免漏诊甚至误诊，为GERD患者带来更多的福音。