血清分泌型卷曲相关蛋白4与糖尿病肾病的关系分析

廖欢 罗敏虹 张伟勇 杨美兰 程佳

DN作为DM特异性微血管并发症之一， 现已成为终末期肾脏病第二位原因。DN病因尚不完全清楚， 且其发病机制复杂。相关研究表明［1］， 在慢性炎症及胰岛素抵抗(IR)共同作用下加速了DM患者微血管病变发展。胰岛β细胞功能紊乱在糖尿病早期形成过程中起到了重要作用， SFRP4作为Wnt信号通路调节因子， 在胰岛β细胞功能受损中起到了重要作用 ， 推测 SFRP4 同样参与了 DN 形成［2，3］。目前 ，临床鲜少有关于SFRP4与DN相关性研究， 为此， 本研究对本院104例DM患者进行观察分析， 报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择本院2016年6月～2018年4月收治的DM患者104例作为研究对象， 根据是否合并DN分为单纯DM组(63例)和DN组(41例)。单纯DM组中， 男37例，女26例；年龄42～73岁， 平均年龄(57.53±5.18)岁；DM病程2～8 年 ， 平均 DM 病程 (5.00±1.00)年。DN 组中 ， 男 26 例 ， 女15例；年龄41～75岁， 平均年龄 (58.14±5.72)岁 ；DN病程2～11年， 平均DM病程(6.17±1.61)年。单纯DM组和DN组患者一般资料对比差异无统计学意义(P＞0.05)， 具有可比性。根据DN患者血清GA水平分为正常白蛋白尿组(GA＜3 mg， 18例，GA1 组 )、微量白蛋白尿组 (GA：30～300 mg， 14 例 ， GA2 组 )、大量白蛋白尿组(GA≥300 mg， 9例， GA3组)。

1.2 纳入及排除标准 纳入标准：初次诊断为DM和DN患者；入组前未接受药物治疗及饮食、运动干预；入组前3个月内未服用过类固醇类药物；近2周未服用过血管紧张素转化酶抑制剂、胰岛素增敏剂；入组前1个月无急性、慢性感染疾病史；心、肝功能正常。排除标准：既往肿瘤病史；伴有心肺系统疾病或自身免疫性疾病；精神异常者。

1.3 方法 所有患者检测前戒烟、戒酒7 d， 禁体力劳动， 检测前3 d碳水化合物摄入量≥250 g/d， 保持饮食和体重相对稳定。所有患者隔夜禁食8 h， 次日清晨采集空腹肘静脉血5 ml，室温内静置2 h后， 按1000×g转速离心15 min， 分离血清储存在-80℃冰箱内待检。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定SFRP4水平， 试剂盒购自武汉中美科技有限公司， 批间差：CV＜12%；批内差：CV＜10%；严格按照试剂盒操作步骤执行。

1.4 观察指标 分别检测单纯DM组和DN组SFRP4水平，并作组间比较。不同GA水平患者的SFRP4水平对比， 经Pearson相关性分析分析SFRP4水平与DN的关系。

1.5 统计学方法 采用SPSS23.0统计学软件对数据进行处理。计量资料以均数±标准差(±s)表示， 采用t检验；计数资料以率(%)表示， 采用χ2检验；相关性分析采用Pearson分析。P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 单纯DM组和DN组患者的SFRP4水平对比 单纯DM 组 SFRP4水平为 (191.43±56.43)ng/ml， DN 组 SFRP4水平为(314.27±67.47)ng/ml；DN组SFRP4水平显著高于单纯DM组， 差异具有统计学意义 (P＜0.05)。

2.2 不同GA水平患者的SFRP4水平对比 随着GA水平升高， SFRP4水平也随之升高， GA1组、GA2组、GA3组SFRP4水平两两对比差异均具有统计学意义(P＜0.05)。见表1。

表1 不同GA水平患者的SFRP4水平对比( ±s)

表1 不同GA水平患者的SFRP4水平对比( ±s)

注：与GA1组对比, aP＜0.05, 与GA2组对比, bP＜0.05

组别 例数 SFRP4水平(ng/ml)GA1组 18 264.15±38.97 GA2组 14 301.46±30.07a GA3组 9 329.76±33.71ab

2.3 Pearson相关性分析 Pearson相关性分析结果显示，SFRP4水平与DN患者病情严重程度呈正相关(r=0.785，P＜0.05)。

3 讨论

DN是DM严重并发症， 该并发症可造成患者肾功能持续恶化， 尽早诊断， 判断其严重程度对于指导临床治疗方案及优化治疗结局具有重要意义。

SFRP4是分泌型卷曲相关蛋白家族(SFRPs)中成员，SFRPs由独立N端及C端组成， N端由富含半胱氨酸片段组成， 形成一个保守区域(CRD)， CRD在结构上与Wnt特异性Fz受体类似， 能够与Wnt配合或Frz受体竞争性结合， 同时提供轴突靶向信息 ， 最终阻断 Wnt信号通路［4，5］。C 端则是类神经生长因子区域， 其作用是诱发细胞凋亡。SFRP4为Wnt信号通路的抑制因子， 在细胞迁移、分化、增殖、血管形成、肿瘤发生、维持无机磷酸盐在体内平衡中具有重要作用。近年来， 相关文献提出［6］， SFRP4与糖尿病发生及胰岛素分泌有关。刘芳等［7］研究指出， SFRP4通过作用于Wnt通路抑制胰岛β细胞钙通道表达， 从而减少Ca2+内流， 并抑制胰岛素胞吐， 影响胰岛素分泌， 不仅如此， 该研究还表明，SFRP4水平与糖尿病患者空腹血糖及糖化血红蛋白水平呈正相关。但SFRP4水平是否与DN有关尚不明确。本研究结果提示， 单纯DM组患者SFRP4水平低于DN组(P＜0.05)， 提示SFRP4与DN同样存在关联。

GA是反应早期肾病及肾损伤情况的指标。吴冀川等［8］研究表明， GA在DN发病中起到了重要作用， 且GA水平与DN严重程度呈正相关。本研究中， 根据GA水平不同分为不同亚组， 结果提示， GA3组和GA2组SFRP4水平显著高于GA1组， GA3组SFRP4水平明显高于GA2组， 差异均有统计学意义(P＜0.05)， 提示随着GA水平升高， SFRP4水平亦随之上升。提示SFRP4水平与DN病情严重程度密切相关，Pearson相关性分析结果提示， SFRP4水平与DN病情严重程度呈正相关性。原因可能是SFRP4通过Wnt信号通路影响第一时相胰岛素分泌， 造成DM患者胰岛β细胞功能受损，加重DM病情， 参与DN发生和发展。

综上所述， SFRP4参与了DN发展， 同时其水平与DN病情严重程度呈正相关性。