一种外用中药制剂对乳腺增生的临床前研究

王晓培，刘 韬*

（成都中医药大学附属医院，四川 成都 610000）

在本科室长期临床实践结合现代药理药剂知识，基于局部消炎止痛，活血散结的理论，对川乌、白芷、赤芍、远志、蒲公英、三棱、莪术、延胡索甘草等进行了研究，筛选出川乌、白芷、赤芍、远志、甘草为乳腺增生症外用制剂作进一步研究。本研究通过前期动物实验证实此外用制剂对治疗乳腺增生有一定的治疗作用。

1 材料与方法

1.1 实验动物

选取健康SD雌性大鼠 30 只，随机分为3 组: 实验组,对照组，空白组各10只。

1.2 实验方法

大鼠后腿内侧肌肉注射苯甲酸雌二醇0.5 mg/kg/d，连续25天，然后肌注黄体酮4 mg/kg/d，连续5天，制造乳腺增生病动物模型。各组大鼠在造模的基础上同时于造模大鼠乳腺部位分别外用赋形剂（空白组）、外用中药制剂0.4 g（实验组）及三苯氧胺样品0.1 g（对照组），每天1次，并按摩每只乳房1 min，共30天。每天1次，连续30 d。

1.3 用法

各组大鼠在造模的基础上同时于乳腺部位分别外用赋形剂（空白组）、外用中药制剂0.4 g（实验组）及三苯氧胺样品0.1 g（对照组），每天1次，并按摩每只乳房1 min，30天。

1.4 标本采取及观察指标

末次给药后第二天，称量大鼠体重，脱毛后测量大鼠右下腹部乳晕直径和乳头直径。试验末将大鼠以1%戊巴比妥钠按40 mg/kg经腹腔注射麻醉。将大鼠固定，从大鼠腹主动脉抽取4 ml动脉血，注入5 ml离心管中，在4℃下3000 r/min离心15 min,分离血清检测E2、P。取3个试验组大鼠2、3对部分乳房，10%的福尔马林固定，梯度酒精脱水，石蜡包埋切片切片厚4 um。HE染色后在光镜下观察增生程度。

1.5 统计学方法

采用SPSS 18.0统计分析数据，P＜0.05为有统计学差异。

2 结 果

2.1 对体重的影响

大鼠肌注苯甲酸雌二醇30 d后体重明显增加，实验组与对照组分别与空白组比较有统计学差异(P＜0.05)，空白组大鼠体内雌激素水平增高，使大鼠体内代谢水平紊乱，引起体重变化，而实验组及对照组抑制体内雌激素水平，使其与空白组产生明显差异。结果如表1。

表1 造模后对乳腺增生大鼠体重的影响(x±s)

2.2 对乳晕直径及乳头直径的影响

空白组注射苯甲酸雌二醇后，乳晕、乳头直径明显增大，实验组及对照组在分别使用外用中药制剂及三苯氧胺30 d后，大鼠乳晕与乳头直径较空白组明显减小(P＜0.05)。结果见表2。

表2 外用中药制剂对乳头及乳晕的影响(x±s)

2.3 病理形态观察

病理性造模后大鼠乳腺小叶数量明显增多，腺泡数增多，腺泡腔和腺导管腔扩张，间质水肿，纤维组织增生，与实验组及对照组相比均有统计学差异；实验组较空白组乳腺小叶及腺泡数较少，腺泡腔和腺导管扩张不明显，未见管腔明显扩大。空白组分别与实验组、对照组比较存在统计学显著性差异(P＜0.05)。乳腺增生病变判断标准采用方敏等报道标准[1]，具体内容见表3。

表3 中药外用制剂对大鼠乳腺增生模型的影响

2.4 对雌二醇、孕酮水平的影响

实验研究最后测定大鼠血清中雌二醇及孕酮含量，发现空白组大鼠E2含量增加，P含量降低，与实验组及对照组比较有统计学差异(P＜0.05)；而实验组与对照组比较无差异(P＞0.05)，具体见表4。

表4 中药外用制剂对乳腺增生小鼠血清E2、P水平的影响

3 讨 论

本研究使用的外用中药制剂是我科多年临床经验总结而成，组方为川乌、白芷、赤芍、远志、甘草。川乌温经止痛，祛风除湿，具有很强的麻醉止痛作用；其主要成分乌头碱对神经肌接头活动和神经干复合电位在末梢传导有阻遏作用，高浓度可使神经干完全丧失兴奋和传导功能+。白芷消肿止痛，散结排脓。赤芍清热凉血，活血化瘀，止痛；含有芍药甙、树脂等，具有较好的解痉作用。远志宁心安神，祛痰开窍，消散痈肿；含有远志皂甙元A和B、细叶远志素等。甘草益气补中，清热解毒，缓急止痛，调和诸药；含有甘草甜素、甘草黄酮类化合物、甘草甙等。本研究造模成功后发现大鼠的雌激素明显升高，孕激素降低，乳腺组织明显增生，作为空白对照组。外用中药制剂及三苯氧胺的大鼠，乳头及乳晕直径较空白组明显缩小(P＜0.05);病理组织观察中发现实验组及对照组的乳腺小叶数目明显较少，小叶腺泡较少，腔内分泌物少，说明本制剂及三苯氧胺对大鼠的乳腺增生组织有一定的缓解作用，并可在一定程度上恢复其组织形态。三苯氧胺对血清雌二醇及孕酮的作用是已经明确的，实验中发现空白组大鼠血清雌二醇(E2)含量明显增加，孕酮(P)含量显著降低，与实验组及对照组相比有统计学差异(P＜0.05);而实验组与对照组比较无差异(P＞0.05)，说明本外用中药制剂在治疗乳腺增生方面具有与三苯氧胺类似的作用，可以一定程度上降低雌二醇含量，同时升高孕酮，从而达到治疗乳腺增生的作用。