猪链球菌病的诊治

赵海忠 李良华 宋忠旭 孙 华 彭先文 梅书棋

湖北省农业科学院畜牧兽医研究所/ 动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室，武汉430064

猪链球菌病（swine streptococcosis）是由多种致病性猪链球菌（Streptococcus suis）引起的一种细菌类疾病，临床上可分为败血症型、脑膜炎型、关节炎型、淋巴结脓肿型等[1]。猪链球菌病一年四季均可发生，无明显的发病季节，但天气闷热的夏秋季节为高发期，3～12 周龄的仔猪最易感，多呈地方性流行，给养猪业造成较大的经济损失[2]。笔者接诊某规模化猪场保育猪疑似感染猪链球菌病临床病例，结合发病情况、临床剖检、细菌分离培养、PCR 检测，诊断主要病原为猪链球菌感染，并进行动物致病性试验、药敏试验，结合实践经验，采用针对性综合防控措施，疫情得到有效控制，现将诊治情况报道如下，供养殖实践参考。

1 发病情况

2018年7月下旬，武汉某规模化猪场5～6 周龄仔猪出现以关节肿胀（图1）、跛行、运动障碍为主要临床表现的临床病例，发病率20%左右，病死率10%左右。病猪主要表现食欲下降，精神萎靡，皮肤充血、潮红，共济失调，体温41.0～42.5 ℃，黏膜发绀，部分仔猪四肢内侧、腹下皮肤发紫，关节肿大，跛行，不能站立，触压有热痛，驱赶时尖叫，部分病猪出现角弓反张等神经症状，最后部分病猪衰竭死亡。

图1 关节肿胀

2 临床剖检

选取具有典型临床症状的病死猪3 头进行解剖，可见关节周围水肿、滑膜肿胀充血、关节液混浊，出现化脓性炎症。其中1 头病例可见心包积液增多、呈淡淡的青色，肺脏边缘有黄色纤维素性渗出物，肺间质增宽，肾脏肿大，肠道水肿。分别无菌采集关节液、淋巴结、心脏、肝脏、脾脏、肺脏等病料3 份冷藏保存后立即送实验室进行检测。

3 实验室诊断

3.1 细菌分离培养

取3 份样品，分别接种于鲜血琼脂平板（含5%兔脱脂血）上，37 ℃温箱培养24 h，培养结果见图2，观察菌落形态，菌落呈圆形、表面光滑、中央隆起、边缘整齐、透明、灰白色、针尖大的露珠状小菌落，并产生明显的β 型溶血。挑取典型菌落进行革兰氏染色、镜检，可见革兰氏阳性、短链状或单在的球菌。

图2 猪链球菌培养结果

3.2 PCR 检测

样品经过处理后通过常规PCR 扩增链球菌（SS）基因，当样品中含有链球菌时会扩增出294 bp的阳性片段，PCR 检测扩增产物电泳结果见图3。结果1#、2#样品中扩增出294 bp 的片段，检出SS 阳性比例为66.7%。

图3 电泳结果

3.3 动物致病性试验

挑取单个菌落接种于THB 培养基中做增菌培养，37 ℃温箱培养24 h，将1#、2#培养菌液混合后腹腔注射10 只SPF 级昆明小鼠，0.2 mL/只，另设10只小白鼠生理盐水对照，同等条件下饲养观察7 d，攻菌10 h 后试验组部分小鼠出现精神萎靡、行动迟缓、食欲下降等临床症状，试验结束共有6 只小鼠死亡，对照组10 只小鼠均健活。试验结果表明，该分离菌株具有较强的致病性。

3.4 药敏试验

采用纸片扩散法进行药敏试验，将1#、2#菌株增菌培养后菌液用生理盐水稀释为1×105/mL，取0.2 mL 稀释后菌液于血清琼脂平板上，用玻璃棒将其涂布均匀，然后用无菌镊子将药敏纸片贴在已接种被检菌株的平板上，2 片之间的距离1～2 cm 为宜，置于37 ℃温箱培养18 h，分别测定抑菌环的直径，分析菌株对各药物的敏感性，药敏性试验结果见表1。结果表明，分离的菌株对阿莫西林、氨苄西林、头孢曲松、头孢噻肟、头孢噻呋高度敏感；对庆大霉素、林可霉素、四环素、复方新诺明、大观霉素、链霉素、环丙沙星、恩诺沙星、多粘菌素B、磺胺嘧啶耐药。

4 诊断结果

根据发病猪的临床症状、病理剖检、细菌分离培养和PCR 检测结果，确诊该场患病仔猪为猪链球菌感染。

表1 链球菌药敏性试验结果

5 综合防控

5.1 对症治疗

治疗首选头孢类药物，头孢噻呋5 mg/kg+安乃近2 mL+地塞米松3 mL，肌注，1 次/d，连用3 d。严重病例及时进行补液（复合维生素B 1 mL+Vc 1 mL+地塞米松1 mL+5%葡萄糖氯化钠注射液40～60 mL），同时在饲料中添加药物，每吨分别添加30%阿莫西林180 g+50%复方黄芪多糖250 g+电解多维1 000 g；增强机体免疫力，提高猪群健康水平。

5.2 免疫接种

全群紧急普免猪链球菌三价灭活疫苗1 头份，猪链球菌常规免疫程序采取“普免”和“跟胎免疫”相结合，6月底全群季节性普免三价灭活疫苗1 头份；母猪产前5 周免疫三价灭活疫苗1 头份；仔猪28日龄免疫三价灭活疫苗1 头份。

5.3 生物安全防范

及时隔离发病猪舍，将病猪集中于隔离栏治疗，并每天带猪消毒，对无治疗价值仔猪尽早淘汰处理。病死猪及时进行无害化处理，消除传染源，加强消毒管理，对于发病期间猪所使用的食槽及饲养管理用具以及病猪和带菌猪的排泄物、分泌物进行严格的消毒，切断传播途径，防止进一步传染与扩散。发病单元清空后，及时清洗消毒，干燥后再用甲醛熏蒸，空栏7 d 以上。

5.4 精细化饲养管理

首先，改善饲养环境，加强猪舍内通风换气，保持舍内环境温湿度在猪只适宜范围内，营造舒适猪舍小环境；其次，提供优质全价饲料，确保仔猪营养均衡，以提高机体的免疫力与抗病力；最后，做好猪群管理，实行全进全出和批次化生产，降低饲养密度。

6 讨 论

1）病因初步分析。高温高湿、气温骤变、饲养密度过大等因素造成仔猪抵抗力降低，诱发猪链球菌病。营造舒适猪舍小环境，降低饲养密度，提供优质饲料，及时进行药物保健，提高猪群的免疫力，可有效降低猪链球菌病发病风险。

2）猪链球菌的耐药特性呈上升趋势。近年来，由于抗生素大量使用及滥用，产生了大量的耐药菌株，疾病临床控制难度越来越大。本研究发现，链球菌分离菌株对10 种临床常用药物全部耐药，其耐药程度相当严重，猪链球菌耐药已成为全球性问题[3]。李文娴等[4]报道2017年河南省8 株猪链球菌对环丙沙星、恩诺沙星高度敏感，但本次试验链球菌分离菌株对环丙沙星、恩诺沙星均产生了耐药，应引起养殖场的高度重视。在临床防治猪链球菌病时，应根据药敏试验结果筛选出高敏感药物，有针对性地合理、科学、规范用药。