鸭霍乱的诊断和防治

胡泽兵

摘   要：对某鸭场采样进行细菌分离鉴定、荧光PCR检测、药敏试验。发现鸭群感染多杀性巴氏杆菌，该分离菌对恩诺沙星、新霉素高度敏感，而对庆大霉素、氟苯尼考不敏感。

关键词：鸭;巴氏杆菌;细菌分离鉴定;荧光PCR

中图分类号：S858.32     文献标识码：C     文章编号：1673-1085（2019）04-0038-03

河南信阳地区气候湿润、河网密布，适合鸭鹅等水禽的养殖，鸭养殖量位居全省第一，是当地农民致富增收的重要途径。

2018年11月，辖区内某鸭场鸭群突然发病， 2d内死亡300多只，养殖户使用氟苯尼考、庆大霉素等药物治疗，效果不佳，病情有继续扩散的迹象。

接到报告后，本人迅速赶到现场，观察症状并剖检，采集样品并检测，现将情况报告如下：

1  发病情况

该养殖户饲养麻鸭3000只，45日龄，在7日龄、21日龄已经免疫2次高致病性禽流感疫苗;现场除死亡300多只外，眼观还有500多只发病。 症状表现为：张口呼吸、瘫痪、跛行、不愿下水，个别鸭只关节肿胀，排铜绿色腥臭粪便。

剖检后发现：病死鸭腹膜、皮下组织有小出血点，心包增厚、心包内有不透明液体、心冠脂肪出血，肺脏充血、有出血点，肝肿大、质脆、呈棕黄色、肝表面有针尖状坏死点，见图1、图2、图3。

2  样品采集及检测

2.1  材料

2.1.1  病料收集  无菌取病死鸭的肺脏、脾脏、肝脏及分泌物、双拭子（棉签采集口腔及泄殖腔后，存放在含有PBS的离心管中）等样品送达本实验室，低温保存备检。

2.1.2  主要检测试剂  禽流感病毒通用型（H5+H7）实时荧光RT-PCR检测试剂盒（北京世纪元亨动物防疫技术有限公司）、血琼脂平板、麦康凯平板、胎牛血清、LB培养基、细菌生化鉴定管、药敏片（以自制为主）等购自郑州博赛生物工程有限责任公司;革兰氏染色试剂实验室自行配置。

2.1.3  主要检测仪器  生物显微镜（日本Olympus公司）;核酸提取仪、实时荧光PCR仪（西安天隆）;SPX-150B智能型生化培养箱（上海琅轩实验设备有限公司）;HH数显恒温水浴锅（江苏金坛晶玻实验仪器厂）。

2.2  方法

2.2.1  细菌的分离  无菌采集病变明显部位，划线接种于麦康凯平板、鲜血琼脂平板上，37℃温箱中培养24h以上，仔细观察培养菌落的形态，选择生长较好菌落继续培养;取病料和病死鸭分泌物、挑取培养基菌落直接涂片进行革兰氏染色镜检。

2.2.2  生化鉴定  向LB液体培养基中添加5%胎牛血清，随后接种纯培养物，取少量培养物加入生化鉴定管中，37℃温箱中培养24h后，观察、记录结果。

2.2.3  荧光PCR检测  取双拭子样品，采用禽流感病毒通用型实时荧光RT-PCR检测试剂盒检测样品中是否含有禽流感病毒，参照试剂盒说明书进行操作。

2.2.4  药敏试验  参考文献[1-3]，利用纸片法测定分离的细菌对庆大霉素、硫酸新霉素、诺氟沙星、恩诺沙星、泰乐菌素、头孢曲松、硫酸粘桿菌素、氟苯尼考等8种药物的敏感性，通过测定抑菌圈的直径（Φ）判定药物对波氏杆菌的敏感性：Φ≥20 mm为高度敏感，15mm≤Φ<20mm为中度敏感，Φ<15mm为耐药。

3  检测结果与分析

3.1  细菌分离  组织分离物在麦康凯平板上无菌落生长，在血液琼脂平板培养24h后，形成中等大小菌落，菌落呈光滑、圆整、半透明状，未出现溶血现象;将分离物和培养菌落直接涂片，革兰氏染色后在显微镜下观察，可见两端钝圆的短杆状的球杆菌，革兰氏阴性（见图4）。

3.2  生化鉴定结果  本试验分离的细菌可以发酵葡萄糖、不发酵乳糖，氧化酶和触酶阳性，产生硫化氢，VP试验阴性，吲哚试验阳性。

3.3  荧光PCR检测结果  采集样品经荧光PCR检测，H5亚型和H7亚型禽流感病毒均为阴性。

3.4  药敏试验结果  分离菌株药敏试验结果，见表1，分离菌株对硫酸新霉素、恩诺沙星2种药物高敏，对泰乐菌素、硫酸粘杆菌素、头孢曲松、诺氟沙星4种药物中敏，对氟苯尼考、庆大霉素不敏感。

4  防治

巴氏杆菌病是由多杀性巴氏杆菌（Pasteurella multocida）引起的以畜禽败血症和炎性出血为特征的疾病，多种动物均可患病，急性可造成畜禽死亡，给养殖场户带来较大损失。鸭群感染本菌后，不同阶段发生不同疾病，幼龄鸭为浆膜炎，中青年鸭为鸭霍乱，可以造成鸭只大量死亡。该病菌通常存在于患病动物的全身各组织、分泌物和排泄物中，不良因素刺激、抵抗力下降、病菌侵入机体均可引起发病，气候突变极易暴发，给鸭饲养场带来很大的经济损失[4-6]。本研究采用细菌培养、镜检、生化及荧光PCR鉴定等手段在本地发生疾病的鸭群中分离到多杀性巴氏杆菌;鸭霍乱是本地区鸭群常见多发病，养殖户用药较多，引发耐药，为防治该病，笔者又采用药敏试验筛选出恩诺沙星、硫酸新霉素等2种高敏药物，为该疫病防治提供重要参考。全场鸭群采用恩诺沙星和荆防败毒散拌料，连续用药7d后，很快控制住病情，未再发现死亡病例。

鸭霍乱是常见、多发的传染病，病原菌可经患病动物的排泄物、分泌物等污染的饲料、饮水、用具和内外环境传播，也可经消化道传给健康动物，飞沫、咳嗽排出的带病菌也可传播本病。为防控该病，建议鸭场采取综合性防控措施来防治该病：一是鸭群尽量做到全进全出，防止外来病菌进入本场;二是加强饲养管理，改善鸭群生长环境，给予鸭群营养合理的饲料，定期在饲料中添加保健性药物和抗应激药物，提高抵抗力;三是要做好鸭舍的清洁卫生，定期灭鼠、驱虫、驱鸟，保持鸭舍的清洁卫生，减少各种传播因素;四是为减少抗生素的使用，定期可以选择针对本场流行菌株的疫苗对鸭群进行预防接种，提高特异性免疫力。

参考文献：

[1]  李琦，祁从春.高邮鸭巴氏杆菌病的诊断与防治[J].中国家禽，2011，33（05）：60.

[2]  许英民.雉鸡多杀性巴氏杆菌的分离及其药敏试验[J].家禽科学，2017（02）：47-49.

[3]  李崇斌，覃珍姣，严斯刚.樱桃谷肉鸭巴氏杆菌病的诊治[J].中国家禽，2003（07）：19.

[4]  Annika S，Sokhoun Y，Phalla Y，et al.Detection of Low Pathogenicity Influenza A（H7N3） Virus during Duck Mortality Event， Cambodia， 2017[J].Emerging Infectious Diseases，2018，24（6）：1103-1107.

[5]  惠庆亮，杜成波，牛书玉.一例鸭巴氏杆菌病的防治[J].水禽世界，2014（05）：30.

[6]  张新丹，葛锋锐，张天聪.鸭巴氏杆菌和大肠杆菌混合感染的诊治[J].黑龙江畜牧兽医，2004（04）：38.

收稿日期：2019-03-20