卵巢癌患者外周血CK7mRNA、CXCL12检测的临床意义

刘金威　阮友琴　祝英杰

【摘要】 目的：探讨外周血CK7mRNA、趋化因子CXCL12表达水平与卵巢癌的组织分级、病理分期及腹膜后淋巴结转移等的关系。方法：本次数据分析对象昆明医科大学第三附属医院妇瘤科从2014年7月-2016年5月纳入且收治的44例卵巢癌住院患者的外周血标本，将其作为试验组，良性组为15例上皮性卵巢良性肿瘤患者外周血标本，健康组为18例体检健康女性外周血标本。通过实时荧光定量PCR技术检测外周血中CK7mRNA的表达水平，采用酶联免疫吸附试验测定外周血中CXCL12的含量。结果：在试验组、健康组及良性组中外周血CK7mRNA的表达中，试验组最高，其次为良性组，健康组最低（P<0.05）;在试验组、健康组及良性组中外周血CXCL12检测中，试验组最高，其次为良性组，健康组最低（P<0.05）。试验组腹膜后淋巴结有转移的卵巢癌住院患者外周血CK7mRNA的表达高于无转移患者，差异有统计学意义（P<0.05），外周血CXCL12在病理分期Ⅲ+Ⅳ期、腹膜后淋巴结有转移患者中表达较高，差异有统计学意义（P<0.05）。CK7mRNA联合CXCL12检测在淋巴结转移中差异显著（P<0.05）。卵巢癌患者外周血中CXCL12和CK7mRNA表达之间不存在相关性（r=0.222，P=0.148）。结论：在卵巢癌患者外周血中CK7mRNA及CXCL12表达对比健康女性、卵巢良性上皮性肿瘤患者显著更高，且两者之间极有可能对卵巢癌的发展和发生过程进行参与。评估卵巢癌患者术前病情和腹膜后淋巴结转移预测中可以外周血检测CK7mRNA和CXCL12指标为参考依据。

【关键词】 卵巢癌; 外周血; CK7mRNA; CXCL12

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2019.04.038 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2019）04-00-03

在女性生殖系统恶性肿瘤中，卵巢恶性肿瘤是女性生殖系统恶性肿瘤中常见的一类恶性肿瘤，发病率较高，且恶性程度较大[1]。卵巢恶性肿瘤患者中大约有90%可能发生上皮性癌。上皮细胞中存在细胞角蛋白（CK）。健康人外周血不存在细胞角蛋白表达，如外周血存在阳性细胞角蛋白基因表达[2]，此时表示外周循环中已经进入恶性肿瘤细胞。基于此，本文就对卵巢癌患者外周血CK7mRNA、CXCL12检测的临床意义进行分析，具体报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

本次研究对象为昆明医科大学第三附属医院妇瘤科2014年7月-2016年5月收治且研究的住院卵巢腫瘤患者的外周血标本59例，最大年龄73岁，最小年龄14岁，平均（48.62±3.21）岁。卵巢肿瘤患者中良性患者15例，恶性患者44例;恶性患者临床分期：Ⅰ期患者8例，Ⅱ期患者8例，Ⅲ期患者19例，Ⅳ期患者9例;恶性患者病理分级：5例高分化，6例中分化，33例低分化。卵巢恶性肿瘤患者中有28例存在淋巴结转移，

16例无淋巴结转移。收集2014年7月-2016年5月18例体检健康女性志愿者外周血标本为对照组，最大年龄50岁，最小年龄18岁，平均（40.21±6.211）岁。

1.2 方法

1.2.1 试剂 选取北京天根生化科技有限公司研发且提供的新鲜血总RNA提取试剂盒，美国BIO-RAD公司研发且提供的q PCR试剂盒和c DNA合成试剂盒。光晟生物科技股份有限公司研发且提供的人SDF-1α ELISA试剂盒。

1.2.2 检测CK7mRNA及CXCL12 实施外周血总RNA的提取及逆转录;q PCR采用15 μl的反应体系进行q PCR检测，在美国ABI-7500实时荧光定量PCR仪上进行扩增及检测，其反应条件为：95 ℃预变性3 min，95 ℃变性15 s，60 ℃退火及延伸30 s，40个循环进行。实施CXCL12的检测：使用人SDF-1α ELISA试剂盒对血清进行酶联免疫吸附实验（ELISA）[3-4]，全部操作严格按照说明书要求进行，操作结束时观察颜色变化，试验完毕后采用全波长酶标仪进行测定。

1.3 统计学处理

使用SPSS 17.0软件处理59例住院卵巢肿瘤患者的外周血标本和18例体检健康女性志愿者外周血标本涉及的数据，计量资料以（x±s）表示，采用卡方t检验，多组比较采用方差分析，多组间两两比较采用LSD-t进行检验，计数资料以率（%）表示，采用字2检验，采用Spearman等级相关分析两变量间相关性，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组CK7mRNA、CXCL12指标在外周血中的表达情况对比

在试验组、健康组及良性组中外周血CK7mRNA的表达中，试验组最高，其次为良性组，健康组最低（P<0.05）;在试验组、健康组以及良性组中外周血CXCL12检测浓度中，试验组最高，其次为良性组，健康组最低（P<0.05），见表1。

2.2 卵巢癌临床病理特征和外周血CXCL12、CK7mRNA表达

试验组腹膜后淋巴结有转移的卵巢癌住院患者外周血CK7mRNA的表达高于无转移患者，差异有统计学意义（P<0.05），外周血CXCL12在病理分期Ⅲ+Ⅳ期、腹膜后淋巴结有转移患者中表达较高，差异有统计学意义（P<0.05），见表2。

2.3 CXCL12和CK7mRNA之间的相关性

卵巢癌患者外周血中CXCL12和CK7mRNA表达之间不存在相关性（r=0.222，P=0.148）。

2.4 CK7mRNA联合CXCL12检测结果与卵巢癌临床病理特征

试验组卵巢癌患者CXCL12检测结果中位数（3.25）和CK7mRNA表达水平中位数（8.85）设置为CUT OFF值，联合CK7mRNA与CXCL12检测结果对比CUT OFF值视更高显示为阳性，对比CUT OFF值更低显示为阴性。CK7mRNA联合CXCL12检测在淋巴结转移中差异显著（P<0.05），见表3。