血清肿瘤标记物联合动态检测在乳腺癌诊疗中的应用

颜廷俊

(山东省济南市第三人民医院 输血科, 山东 济南, 250132)

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，近年来其发病率逐年上升，严重危害女性健康[1]。乳腺癌由于早期症状隐匿，就诊时多处于中晚期，丧失了最佳治疗机会。早期诊断、早期治疗可使患者获得较好的疗效[2]。因此，加强早期诊断对其预后和降低病死率具有重要意义[3]。传统的乳腺癌诊断主要依赖影像学和细针穿刺细胞学，但影像学对于一些乳腺良恶性肿块鉴别较为困难，细针穿刺细胞学作为有创检查不适合筛查及预后随访。近年来，随着肿瘤免疫分子生物学的深入研究，实验室检测技术的不断进步，越来越多的乳腺癌相关标记物被人们所认知，它们在血清中的存在或量的变化与乳腺癌发生发展密切相关。本研究选择肿瘤相关标记物血清糖类抗原153(CA153)、血清糖类抗原125(CA125)、骨桥蛋白(OPN)、骨桥蛋白(OPN)联合动态检测，评估其在乳腺癌早期诊断和监控转移、复发及判断预后的临床应用价值，以期为乳腺癌的诊断治疗提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2016年1月—2018年12月来医院就诊的98例女性乳腺癌初治患者为研究对象，全部经病理组织学确诊，治疗前后均有血清CA153、CA125、OPN检查资料。患者年龄25～80岁，平均(55.23±10.41)岁; 肿瘤发生部位: 左侧57例、右侧41例; 肿瘤分期根据美国癌症研究委员会与国际抗癌联盟联合制定的病理学分期标准: I期15例、Ⅱ期34例、Ⅲ期32例、Ⅳ期17例。另选取同期来医院就诊的50例女性乳腺良性病变患者为良性对照组，病理组织学排除癌变，包括乳腺纤维腺瘤、乳腺增生、导管内乳头状瘤等患者。患者年龄24～80岁，平均(54.12±11.84)岁。选取同期50例女性健康体检者为健康对照组，年龄25～82岁，平均(54.78±11.27)岁; 无肝、心、肾等重要器官疾病。3组人群年龄、性别等比较差异无统计学意义(P>0.05), 具有可比性。本研究经过医院伦理委员会同意，与研究者签署知情同意书，自愿参加该研究。

1.2 方法

空腹抽取乳腺癌患者治疗前、治疗3个月后及良性对照组和健康对照组静脉血各4 mL, 静置自凝后相对离心力2264G离心15 min分离血清, -20 ℃冰箱保存待检。CA153、CA125采用电化学发光法检测，仪器为罗氏公司ELecsys-2010, 试剂为罗氏原装试剂; OPN采用酶联免疫法(ELISA)检测，试剂由德国Wak-chemie公司提供，仪器为FL-312e全自动酶标仪(美国Bio-Kinetics仪器公司)。严格按操作说明进行，质控符合要求。

1.3 肿瘤标志物检测标准

① 正常参考值参照试剂说明书结合本实验室标准，肿瘤标志物正常参考值: CA153≤25.00 U/mL, CA125≤35.00 U/mL, OPN≤49.90 ng/mL, 凡超过临界参考值为阳性。② 联合检测阳性判定方法: 联合检测组合中任一指标超过临界值即为阳性; 均为阴性定为阴性。

1.4 统计学方法

2 结 果

2.1 3组血清肿瘤标记物CA153、CA125、OPN水平比较

乳腺癌患者血清肿瘤标记物CA153、CA125、OPN水平与良性对照组及健康对照组比较显著增高，差异有统计学意义(P<0.01); 良性对照组及健康对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 3组血清肿瘤标记物水平比较

CA153: 血清糖类抗原153; CA125: 血清糖类抗原125;

OPN: 骨桥蛋白。与良性对照组和健康对照组比较, *P<0.01。

2.2 乳腺癌不同临床特征患者血清肿瘤标记物水平比较

乳腺癌患者血清肿瘤标记物水平与患者年龄、肿瘤发生部位无显著相关性(P>0.05), 与肿瘤大小、临床分期、转移、复发及治疗后显著相关，乳腺癌高分期(Ⅲ、Ⅳ期)患者血清CA153、CA125、OPN水平显著高于低分期(Ⅰ、Ⅱ期)患者(P<0.01); 转移与无转移患者，复发与无复发患者比较差异均有统计学意义(P<0.01); 治疗后血清CA153、CA125、OPN水平与治疗前比较显著降低(P<0.01)。见表2。

2.3 血清肿瘤标记物单项及联合检测诊断乳腺癌的价值比较

血清肿瘤标记物CA153、CA125、OPN三项联合检测诊断乳腺癌的敏感性、准确性、阴性预测值与各单项及两两组合(CA153+CA125、CA153+OPN、CA125+OPN)比较显著提高，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表2 乳腺癌不同临床特征患者血清CA153、CA125、OPN水平比较

CA153: 血清糖类抗原153; CA125: 血清糖类抗原125; OPN: 骨桥蛋白。与组内另一项比较, *P<0.01。

表3 血清肿瘤标记物单项及联合检测诊断乳腺癌的价值比较[n(%)]

CA153: 血清糖类抗原153; CA125: 血清糖类抗原125; OPN: 骨桥蛋白。与其他检测方法比较, *P<0.05。

3 讨 论

乳腺癌早期诊断、临床干预是提高预后效果的关键，术后复发和转移是其死亡的主要原因。为更准确早期诊断、更全面地了解其术后复发转移的可能性，医学界一直努力寻找简便易行的预测指标。近年来，肿瘤相关标记物被发现并应用于临床，对肿瘤的诊断和治疗是一个巨大地推动[4]。肿瘤标志物是肿瘤细胞在癌变过程中癌基因表达而生成的抗原和其它生物活性物质，这些标记物主要有结构蛋白、酶、细胞表面的糖类抗原、基因和受体等[5], 这些物质可在肿瘤患者的体液中检出，正常人群或良性疾病患者中不产生或产生甚微，它们的出现或量的变化预示肿瘤的存在。理想的肿瘤标记物的敏感性、特异性100%, 能够早期诊断，并对肿瘤的组织发生做出准确定位，但由于癌基因的复杂性，没有一种标记物是单一类型的，一种肿瘤可以表达多种标记物，一种标记物可以见于多种肿瘤。研究发现, CA153、CA125、OPN是与乳腺癌发生、发展密切相关的肿瘤标记物，但这些血清标记物单项检测时在敏感性和准确性方面都存在一定缺陷，有选择的多项肿瘤标记物联合检测不失为一种诊断乳腺癌的有效方法。

CA153 是一种变异的乳腺细胞表面糖蛋白，当细胞发生癌变时，细胞膜上唾液酶和蛋白酶活性增强，细胞骨架被破坏，导致细胞表面抗原凋落释放入血，致使外周血液中CA153含量升高[6], 因此, CA153是目前临床普遍使用的乳腺癌诊断首选肿瘤标记物[7]。另据报道[8], 80%乳腺癌转移患者血清CA153水平呈高表达，并且其浓度与乳腺癌的病情变化密切相关，目前临床上把CA153作为监控病情与预后随访的首选指标。本研究结果显示，乳腺癌患者血清CA153水平显著高于良性对照组和正常对照组，且随着复发转移CA153水平呈高表达，与上述报道一致。虽然CA153是诊断乳腺癌的经典标记物，但敏感性不尽人意，本研究显示诊断乳腺癌敏感性为53.06%, 需与其它标记物联合检测提高自身价值。

CA125最早由卵巢癌细胞免疫小鼠获得，是一种单克隆抗体CA125所识别的糖蛋白，以往CA125常作为卵巢癌的标记物而广泛使用[9], 目前发现它是一种广谱肿瘤标记物，在乳腺癌患者血清中也有高表达。研究[10]还发现, CA125在对无症状绝经后女性的乳腺癌筛查有一定的预测价值。本研究结果显示，乳腺癌患者CA125水平与患者年龄、肿瘤发生部位无显著相关性，其血清表达水平与肿瘤临床分期、复发转移密切相关，高分期组、复发转移组显著高于低分期组、无复发转移组，动态检测水平变化能监控病情变化及复发转移。CA125诊断乳腺癌的特异性为92.00%, 一些良性疾病如子宫内膜异位症、腺肌病、附件炎、胸膜炎等存在一过性增高现象，说明与良性疾病存在一定交叉，因此对CA125增高患者需要动态复查，乳腺癌患者血清水平持续增高，而良性病变仅一过性增高或仅维持在低水平。CA125诊断乳腺癌的敏感性为51.02%, 因此需与其它肿瘤标记物联合检测才能提高乳腺癌的诊断能力[11]。

OPN是一种磷酸化糖蛋白，也称转化相关性磷酸蛋白，它是以游离状态和结合状态存在于机体的组织和体液中，能与CD44及多种整合素受体结合而促进肿瘤细胞的趋化、黏附和转移[12]。近年来, OPN在早期细胞免疫应答、肿瘤发生及转移的作用中备受关注，在肿瘤的复发、转移中起重要的作用，因为它有显著促进肿瘤恶化的倾向，在肿瘤转移患者血清中水平显著升高[13]。Fedark等[14]检测了结肠癌、乳腺癌、前列腺癌及肺癌患者外周血OPN的浓度，认为OPN可用于肿瘤的诊断和筛选，因此它是广谱肿瘤标记物，在乳腺癌患者血清中也有高表达。本研究结果显示，血液中OPN浓度与乳腺癌的发生、发展关系密切，乳腺癌组血液OPN浓度显著高于良性对照组和健康对照组，并随着肿瘤的复发转移不断增高，治疗后随着瘤体消失或肿瘤负荷降低，血清OPN表达水平显著下降，因此可以作为乳腺癌诊断和监控疗效的指标，但敏感性较低。

综上所述，血清肿瘤标记物检测作为体外诊断实验，具有无创、操作简便、易行、可定量动态检测等优点，已是恶性肿瘤诊断和监控治疗的常用方法。但单一肿瘤标记物检测存在敏感性不高，准确性不强，且做为体外诊断实验易受到一些体内外因素影响，难免发生假阳性、假阴性[15]。本研究结果显示, CA153、CA125、OPN是与乳腺癌发生发展密切相关的标记物，三项联合检测诊断乳腺癌可以做到相互补充，相互印证，减少误漏诊，敏感性、准确性与各单项及两两组合检测比较显著提高，有利于临床早期诊断、早期干预，同时动态检测血清水平变化有利于监控病情进展、肿瘤复发转移，从而指导治疗、判断预后。因此，血清肿瘤标记物联合动态检测对于乳腺癌诊断及预后预测具有重要意义，对乳腺癌术后随访亦有一定临床意义。