结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测与痰培养及药敏试验结果比较分析

徐婧　孔维顺

doi：10.3969/j .issn.1007-614x.2019.01.092摘要 目的：探讨结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测（Xpert MTB/RIF）与痰培养及药敏试验结果的差异。方法：收治检测的可疑肺结核患者30例进行Xpert MTB/RIF和痰培养及药敏试验。结果：患者30例经过跟踪观察，确诊肺结核21例，排除肺结核9例。痰液涂片抗酸染色：30例患者找到抗酸杆菌10例，阳性检出率33.30A（10/30），正确诊断率47.6%（10/21）;痰培养及药敏试验结果：痰培养阳性15例，阳性检出率50.0%（15/30），正确诊断率71.4%（15/21），药敏试验利福平耐药4例，耐药率19.0% （4/21）。Xpert MTB/RIF：结核分支杆菌阳性21例，阳性检出率70.0%（21/30），正确诊断率100.0%（21/21）;利福平耐药3例，耐药率14.3% （4/21）。结论：结核分枝杆菌/利福平耐药Xpert MTB/RIF与痰培养及药敏试验均是诊断结核病的重要手段，Xpert MTB/RIF检查更快速，值得临床推广。

关键词 结核分枝杆菌;Xpert MTB/RIF：痰培养;抗酸染色;药敏试验

结核病是由结核杆菌感染引起的慢性传染病，痰液涂片抗酸染色是诊断结核病的重要依据，但是痰涂片阳性率低，结核分枝杆菌培养及药敏试验条件要求苛刻且耗时长，影响了诊断和治疗。结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测（Xpert MTB/RIF）是一項在全球获得广泛认可的结核快速诊断技术[1]，近年来在临床广泛应用，为探讨探讨结核分枝杆菌/利福平耐药XpertMTB/RIF与痰培养及药敏试验结果的差异，2017年1月-2018年1月收治可疑肺结核患者30例进行Xpert MTB/RIF和痰培养及药敏试验结果，现将结果汇报如下。

资料与方法

2017年1月-2018年1月收治可疑肺结核患者30例，对其进行Xpen MTB/RIF和痰培养及药敏试验，其中男17例，女13例，年龄15-75岁，平均（43.1±3.2）岁。所有患者均咳嗽1个月以上，咳痰，其中低热17例、胸闷16例、黄痰14例。

方法：（1）标本的采集：对30例临床可疑肺结核病患者收集夜间痰液、晨痰和即时痰3份，每份痰标本3 -5 mL。让患者先用清水嗽口，用力咳出气管深处的痰液，勿混入鼻咽分泌物。所有患者标本均进行抗酸杆菌涂片镜检、痰培养及药敏试验和Xpert MTB/RIF监测。（2）抗酸杆菌涂片镜检：按照2012年版《中国结核病防治规划实施工作指南》操作，即取样制作痰涂片，用萋一那氏染色法后直接镜检。（3）痰培养及药敏试验：将送检痰液用4%氢氧化钠处理后，接种于酸性罗氏（L-J）培养基，37℃培养，3-7d后观察，以后每周观察菌落生长情况，若有菌落生长，则进行抗酸染色检测并做药敏试验。（4）Xpen MTB/RIF：将送检痰液用4%氢氧化钠处理后，应用Xpert MTB/RIF检测试剂盒，利用Gene Xpert仪进行检测。

结果

检测结果：30例患者经过跟踪观察，确诊肺结核21例，排除肺结核9例。痰液涂片抗酸染色：30例患者找到抗酸杆菌10例，阳性检出率33.3% （10/30），正确诊断率47.6%（10/21）;痰培养及药敏试验结果：痰培养阳性15例.阳性检出率50.0%（15/30），正确诊断率71.4%（15/21），药敏试验利福平耐药4例，耐药率19.O%（4/21）。Xpert MTB/RIF：结核分支杆菌阳性21例，阳性检出率70.O% （21/30），正确诊断率100.00-10（21/21）;利福平耐药3例，耐药率14.3%（4/21）。

讨论

结核病是由结核分枝杆菌感染引起的危害人类健康的全球性公共卫生问题，1882年科霍发现了结核病的病原菌为结核杆菌，对结核病有了新的认识，也开创了治疗结核病的新篇章。目前，由于不正规治疗等因素，导致耐多药/广泛耐药结核病的出现和蔓延，已成为严重的公共卫生和社会问题，早期诊断及发现其中耐药病例是治疗成功的关键。

传统的抗酸杆菌检查和痰结核菌培养及药敏实验由于阳性检出率低和监测需时较长等因素，不能适应临床的需求。Xpen MTB/RIF检测试剂盒为美国Cepheid公司开发的，适用于Gene Xpert仪器，可以在2h内直接时间从患者新鲜痰液或冻存痰液中检测是否含有结核分枝杆菌及对利福平的耐药性，整个过程都在一密闭环境中进行，手动时间短，不超过5 min，对操作者和周围环境安全。这种检查方法既实现对结核病的确诊又能得出是否对利福平耐药，检测时间短，能快速报告[2]。

本组资料结果显示，Xpert MTB/RIF适应疑似结核分枝杆菌感染的患者，正确诊断率高，而且可以得知是否对利福平耐药，本组资料痰培养及药敏试验结果利福平耐药4例，而Xpert MTB/RIF则出现耐药基因而耐药3例，说明结核分支杆菌耐药基因的突变有个过程，虽然没有形成基因突变，但是临床上已经出现耐药，药敏试验就充分说明了这一点。另外，抗酸杆菌涂片镜检虽然阳性率低，但是比较经济，检查方便，适应于大量排菌患者的检查，可作为筛查的检查手段，对于临床疑似结核病患者，可选择Xpen MTB/RIF检查，快速，精准。

综上所述，结核分枝杆菌/利福平耐药Xpert MTB/RIF与痰培养及药敏试验均是诊断结核病的重要手段，Xpert MTB/RIF检查勇陕速，值得临床推广。

参考文献

[1] 李妍，张天华，鲜小萍，等.Xpen MTB/RIF技术在MTB检测中的应用价值[J].检验医学，2016，12（1）：52-55.

[2]李雪黎，温海平，桑俊，等.Xpert MTB/RIF在肺结核及耐药结核检测中的应用价值分析[J].国际检验医学杂志，2018，39（1）：100-102.