采用气相色谱柱快速分离脂肪酸甲酯

文/yunzuo

采用配备DB-FastFAME Intuvo 气相色谱柱的气相色谱系统快速分离脂肪酸甲酯 // 脂肪酸甲酯 (FAME) 的分析可用于鉴定食品中的脂类组分，是食品分析中最重要的应用之一。采用本方法实现快速、良好的分离效果。

对油类、脂肪和含脂食品的分析是政府实验室、质量控制 (QC) 实验室或合同研究组织 (CRO) 实验室的常见任务。测定食品中的总脂肪与反式脂肪含量时，对脂肪酸及其 FAME 衍生物的气相色谱分析是脂肪表征的重要工具。在许多用于食品（如食用油）检测的法规方法中，测定脂肪酸组成时都要求使用涂覆氰丙基固定相的毛细管柱对特定的顺反脂肪酸异构体进行分离。

此外，实现良好的 FAME 分离还需较长的气相色谱柱（100 米）和较长的分析时间（超过 70 分钟）。然而，这种方法分析效率较低且分析成本较高。而采用氰丙基固定相的 DB-FastFAME Intuvo 气相色谱柱，可实现 FAME 混合物的快速分离（包括分离一些关键顺反异构体），且能满足法规方法的要求。本文简述了采用 DB-FastFAME Intuvo 气相色谱柱和气相色谱系统快速分析FAME 混标。

表1 方法 1 的条件。

表2 方法 2 的条件。

表3 方法 3 的条件。

表4 方法 4 的条件。

表5 流路备件。

图1 采用方法 1得到的 FAME 36 组分混合物的 GC/FID 色谱图。

图 2采用方法 1得到的菜籽油 FAME 混合物的典型GC/FID 色谱图。

实验部分

试剂与标准品

FAME 36 组分混合物（部件号 5191-4276）、C4-C24 偶数碳饱和 FAME 混合物（部件号 5191-4278）和菜籽油 FAME混合物（部件号 5191-4277）均来自安捷伦科技公司。

37 组分 FAME 混标（部件号CDAA-252795-MIX-1 mL）购自上海安谱科学仪器有限公司。

将 C4-C24偶数碳饱和 FAME混合物用己烷稀释至 500 μg/mL。菜籽油 FAME混合物为 100 mg 净混合物，用二氯甲烷稀释 20 倍。

仪器

使用配备火焰离子化检测器(FID) 的Intuvo 9000 气相色谱仪进行分析。使用配备 5 µL 进样针（部件号 G4513-80213）和分流/不分流进样口的 Agilent 7693A 自动液体进样器进样。

实验步骤

将标准样品用与之相对应的方法进行进样分析，检测方法如表1-表5所示。

结果与讨论

FAME 36 组分混标专门为模拟多种食品样品的脂肪酸组成而设计，可用于鉴定多种食品中的关键FAME。该混标中包含 C4:0至 C24:1范围的 FAME，包括多数重要的饱和、单不饱和及多不饱和 FAME。该混标不包含以前用作内标的一种FAME，即二十三烷酸甲酯 (C23:0)，。图 1所示为 FAME 36 组分混合物在 20 m ×0.18 mm、0.20 µm DBFastFAME Intuvo气相色谱柱上的分离结果，图2所示为菜籽油按方法1进行分析的结果。该方法采用氦气作为载气，可在 5 分钟内实现所有化合物的分离，包括关键AOAC 对，R s ＞ 1.5。

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图 4采用方法 2得到的 FAME 36 组分混合物的 GC/FID 色谱图。

图 5采用方法 3得到的 37 组分 FAME 混标的 GC/FID 色谱图。

图 6采用方法 4得到的 37 组分 FAME 混标的 GC/FID 色谱图。

采用这种方法获得了良好的峰形和分离度，且分析时间为 5 分钟。采用氢气作为载气，可在 4 分钟内完全分离 C4-C24偶数碳饱和 FAME混合物和 FAME 36 组分混合物（图3 和图 4）。这表明使用该色谱柱可实现快速样品通量，且分离度不受影响。

对于使用传统 37 组分 FAME混标验证其FAME 方法的实验室，图 5 展示了在 Intuvo9000 气相色谱仪上使用 20 m × 0.18 mm、0.20µm DB-FastFAME 色谱柱得到的色谱图。该方法采用氦气作为载气，在 8 分钟内实现了所有化合物的完全分离。

与预期结果一样，采用氢气作为载气可加快分析速度，而分离度几乎相同。图 6所示的结果表明，采用氢气作为载气可在6.5分钟的分析时间内实现 37 组分FAME混标中所有化合物的完全分离。

结论

DB-FastFAME Intuvo 气相色谱柱可快速、出色地分离 FAME混合物。实验表明，采用氦气作为载气时，DB-FastFAME Intuvo气相色谱柱可在 5 分钟内完全分离 FAME 36 组分混合物中的所有组分，包括关键 AOAC 对和关键顺反脂肪酸异构体。本实验也表明，此方法还能实现菜籽油的快速分析。采用氢气作为载气时，这种高效的 DB-FastFAME Intuvo气相色谱柱将运行时间缩短至 4 分钟以内，同时实现了所有化合物的基线分离。 ■