不同碳氮源对紫丁香蘑菌丝生长的对比研究

崔婉茹，郭普宇，李冰，张洪雨，朱然，范雨婷，薛春梅,2*

(1. 佳木斯大学生命科学学院，黑龙江佳木斯154007；2. 佳木斯大学应用微生物研究所，黑龙江佳木斯154007)

紫丁香蘑[Lepistanuda(Bull.：Fr.)Cooke]，又称紫晶蘑、裸口蘑，属伞菌目口蘑科大型食用真菌[1-3]，有香气，含有丰富的营养价值，具有药用价值。紫丁香蘑对小鼠艾氏癌和肉瘤、阴性菌、革兰氏阳性菌具有抑制作用[4-6]。本试验从不同碳源、氮源培养基对紫丁香蘑母种进行试验，以得到适合紫丁香蘑菌丝生长的母种培养基，为制备紫丁香蘑原种提供参考同时也为节约资源奠定了基础。

1 材料与方法

1.1 材料

由佳木斯大学生命科学学院微生物实验室提供试验中所用的紫丁香蘑母种。

1.2 药品

白糖、可溶性淀粉、乳糖、麦芽糖、葡萄糖、蔗糖、蛋白胨、硫酸镁(MgSO4)、磷酸二氢钾(KH2PO4)、维生素B1、马铃薯。

1.3 方法

1.3.1 菌种活化。配制马铃薯葡萄糖琼脂PDA培养基，灭菌后，在母种培养基上接菌种，在恒温 25℃下暗培养，待紫丁香蘑菌丝长满后备用。

1.3.2 不同培养基的配制

基础培养基：维生素B110mg、蛋白胨3g、琼脂20g、硫酸镁(MgSO4)1.5g、磷酸二氢钾(KH2PO4)3g、定容至1000mL。

碳源母种培养基：取6个三角瓶，各装入100mL基础培养基，分别向三角瓶内加入麦芽糖、葡萄糖、可溶性淀粉、白糖、蔗糖、乳糖，可得到不同碳源的母种培养基，分别为麦芽糖母种、葡萄糖母种、可溶性淀粉母种、白糖母种、蔗糖母种、乳糖母种培养基。

氮源母种培养基：取6个三角瓶，各装入100mL基础培养基，并分别加入酵母膏、硝酸铵、蛋白胨、黄豆粉、硫酸铵、玉米粉，可得到不同氮源的母种培养基，分别为酵母膏母种、硝酸铵母种、蛋白胨母种、黄豆粉母种、硫酸铵母种、玉米粉母种培养基。

1.3.3 培养方法及指标观察。将已接种好的培养皿倒置放入培养箱中倒置培养，然后将培养箱的温度设定为适合紫丁香蘑生长的温度25℃。观察培养皿中紫丁香蘑菌丝的生长状况，至菌丝长满培养皿，定期测量不同培养皿中菌丝的长度以及各培养皿中的比较情况，记录。每天观察时要将不同培养基中紫丁香蘑的长势做比较，如果观察过程中发现污染，要及时拿出，以免污染其他培养皿。

2 结果与分析

2.1 不同碳源对紫丁香蘑菌丝体生长的相关性

2.1.1 不同碳源培养基中紫丁香蘑菌丝的生长状况。分别培养紫丁香蘑于不同的培养基中,观察不同碳源培养基中紫丁香蘑菌落边缘整齐度、菌丝的长势、密度及菌丝颜色等方面，比较其生长状况，记录数据如表1。在麦芽糖培养基中,紫丁香蘑菌落边缘整齐、粗壮、菌丝稠密、呈白色、生长状况较好，其次是在淀粉，葡萄糖培养基中。

表1 紫丁香蘑菌丝在不同的碳源的培养基中生长情况对比

2.1.2 不同碳源培养基中紫丁香蘑菌丝的生长速度。在不同的碳源培养基中紫丁香蘑菌丝的生长速度各不相同，生长快慢有差异，如表2。

表2 紫丁香蘑菌丝在不同的碳源的培养基中生长速度对比

2.1.3 不同碳源培养基中紫丁香蘑菌丝的萌发时间及满皿时间。在不同的碳源培养基中紫丁香蘑菌丝的萌发、满皿时间各具有较大差异，如表3。紫丁香蘑菌丝在乳糖、葡萄糖培养基上的萌发时间为1d，菌丝在其余4种培养基上的萌发时间为2d。紫丁香蘑菌丝在乳糖培养基中满皿时间最长，在蔗糖培养基中时间最短。

表3 紫丁香蘑菌丝在不同的碳源培养基中萌发时间和满皿时间

2.2 不同氮源对紫丁香蘑菌丝体生长的相关性

2.2.1 不同氮源培养基中紫丁香蘑菌丝的生长状况。在6种母种培养基中分别培养紫丁香蘑，观察紫丁香蘑菌落的疏密程度、菌丝的生长速度、菌丝的边缘整齐程度等方面，并记录数据，见表4。紫丁香蘑菌丝在黄豆粉培养基中生长较好，在玉米粉、酵母膏培养基中次之。

表4 紫丁香蘑菌丝在不同的氮源培养基中的生长情况对比

2.2.2 不同氮源培养基中紫丁香蘑菌丝的生长速度。紫丁香蘑菌丝在不同氮源培养基中菌丝的长速不相同，相差较多。菌丝在黄豆粉培养基中的生长速度最快为0.487cm/d，在硫酸铵培养基中菌丝的生长速度最慢为0.112 cm/d。如表5。

表5 紫丁香蘑菌丝在不同的氮源培养基中生长速度对比

2.2.3 不同氮源培养基中紫丁香蘑菌丝的萌发时间及满皿时间。紫丁香蘑菌丝在不同氮源培养基中的萌发时间及满皿时间均有显著差异，在黄豆粉培养基上菌丝的萌发时间为3 d，在其余5种母种培养基上的萌发时间均为2 d。紫丁香蘑菌丝在黄豆粉培养基中满皿时间最短，在硫酸铵培养基中满皿时间最长。如表6。

表6 紫丁香蘑菌丝在不同的氮源培养基中的萌发时间和满皿时间

3 讨论与结论

紫丁香蘑是一种稀少的、含有丰富的营养价值、重要的药用价值，用途广泛，可食用的大型真菌[7]。为了充分开发紫丁香蘑的应用价值，扩大产量，降低成本，选育出优良的菌种满足人们的生活需求。本试验从对母种培养基进行碳氮源的筛选，以找到最适紫丁香蘑的生长条件，从而使其优良性状得以表现。进行试验时，对于选择合适的氮源应考虑全面，从有机氮源和无机氮源方面下手，设置均衡，从而扩大氮源的选择范围，在具体操作时，应多设置几组重复实验，以免后期染菌重做。

从试验结果可知：在不同碳源培养基试验中，紫丁香蘑菌丝在淀粉、蔗糖、葡萄糖培养基中的生长状况较好。在氮源和碳源交叉试验中紫丁香蘑菌种在黄豆粉-蔗糖-琼脂培养基上长速最快。在酵母粉-蔗糖-琼脂、酵母粉-淀粉-琼脂、酵母粉-葡萄糖-琼脂培养基中紫丁香蘑菌丝的生长状况较好，菌丝呈现出浓密、粗壮、均一的特征，得出紫丁香蘑对酵母粉的利用相对较好。最后，从长势、生长速度及菌丝均一情况等方面的综合考虑，我们将适合紫丁香蘑生长的培养基选为黄豆粉-蔗糖-琼脂培养基。

在不同氮源培养基试验中，在玉米粉、黄豆粉、酵母膏培养基中紫丁香蘑菌丝长速较快。在氮源和碳源交叉试验中，紫丁香蘑菌种在黄豆粉-蔗糖-琼脂培养基上长速最快。在黄豆粉-蔗糖-琼脂、酵母粉-淀粉-琼脂培养基中紫丁香菌丝生长情况较好，菌丝呈现出浓密、粗壮、均一的特征，可得出紫丁香蘑对黄豆粉的利用相对较好。试验结果中，菌丝在酵母膏-葡萄糖-琼脂培养基上的长速最慢，但菌丝生长状况较好，其菌丝稠密、可作为菌种保藏的基质。在黄豆粉-蔗糖-琼脂培养基上紫丁香蘑菌丝长速最快，用于制备栽培种，但能否表现出良好的产量优势,还有待进一步研究。