血清标志物半乳糖凝集素-3与心房颤动射频消融术后复发的相关性分析

隗 祎 丁金花 郭馨竹 李霞玲 梁卓 张 涛 赵华 王云龙 韩智红 王楠 任学军

心房颤动是最常见的心律失常，其发病率及死亡率逐年增加［1］。目前，导管射频消融手术（射频消融）作为心房颤动恢复窦律的一种有效治疗手段，已在全国范围内普遍开展，但仍有约30%的患者在射频消融术后出现心房颤动复发［2］；而对于持续性心房颤动，保守估计射频消融成功率仅达50%［3］。

左心房纤维化参与心房电重构及结构重构，与心房颤动的发生、发展及临床预后密切相关［4］。心房纤维化的严重程度与心房颤动射频消融术后预后密切相关［5］。因此，术前有效评估心房颤动患者心房纤维化程度，筛选更适合接受手术的患者成为亟待解决的临床问题。

心房纤维化进程生化通路中上下游介质、产物及调节因子等释放入血，形成可检测到的血清生物标志物，其表达情况一定程度代表心房纤维化的程度。心房纤维化相关血清标志物预测心房颤动射频消融术后成功率方面的价值尚无一致结论，若其预测价值肯定，血清标志物将成为经济、快速、便捷的预测方法被临床广泛使用［6］。

在回顾相关研究后，本研究筛选半乳糖凝集素-3（Galectin-3，Gal-3）血清标志物加以分析，拟评估Gal-3在心房颤动患者中的表达情况，并探索其在心房颤动射频消融术后成功率方面的预测价值。

资料与方法

1.研究对象 采用前瞻性随访研究的方法，连续入选2017年1月至2018年12月，在首都医科大学附属北京安贞医院心内科3病房，住院并接受心房颤动导管射频消融手术、符合纳排标准的心房颤动患者共152例。心房颤动定义为基线、既往心电图或动态心电图证实为心房颤动心律［7］。入选标准:①确诊为非瓣膜性心房颤动；②年龄介于18～80岁之间；③术前评估心功能分级（NYHA分级）为Ⅰ-Ⅱ级；④同意接受心房颤动射频消融手术并签署手术知情同意书、剩余血液标本使用知情同意书者。排除标准:①瓣膜性心房颤动患者；②风湿性心脏病、心肌病、先天性心脏病、离子通道病患者；③心功能分级（NYHA分级）为Ⅲ-Ⅳ级；④合并严重全身性疾病（包括肺部疾病、肝肾功能不全、恶性肿瘤、严重感染）的患者；⑤不签署手术知情同意书及剩余血液标本使用知情同意书的患者。

2.血液样本采集及处理方法 所有入组者于射频消融手术开始前完成股静脉置管术，在肝素化前由深静脉鞘管采集外周血10 mL并置入无添加真空采血管（红帽）常温静置1 h，离心分离血清，置于-80℃冰箱冻存备用。

3.血清Gal-3检测 采用酶联免疫吸附试验法（ELISA），应用市售试Gal-3试剂盒（Elab科技公司，中国北京），根据制造商的说明对试剂盒进行处理，并对血清进行连续稀释用于确定适当的稀释浓度。应用酶标仪的吸光值读数（OD值）确定各孔板的血清浓度并使用软件作图，画出标准曲线，计算Gal-3的血清含量并记录。检测低限为1.5μg/L。

4.超声心动图 所有患者入院后均于北京安贞医院超声科完善标准经胸超声心动图，本研究采集左心房前后径（LAD）、LVEDd、LVEF用于后续分析。

5.心房颤动导管射频消融方法 所有患者均接受环肺静脉隔离（circumferential pulmonary veinlsolation，CPVI）消融。根据患者情况，阵发性心房颤动仅行CPVI术；持续性心房颤动再行顶部线消融；合并心房扑动则行心房扑动关键性峡部线消融；持续性心房颤动者根据消融后情况采用电复律转复窦性心律。消融终点为CPVI或消融线呈双向阻滞。

6.随访方法 常规所有入组患者术后均给予抗心律失常药物（首选胺碘酮）及抗凝药物（首选新型口服抗凝药），术后3个月复查，心房颤动无复发则停用抗心律失常药物及抗凝药。随后，建议入组患者术后6、12、18、24个月，心内科门诊复查12导联心电图及24 h动态心电图，出现心悸、胸闷等症状及时就诊，并定期接受电话或门诊随访。

心房颤动复发定义为3个月空窗期结束后，心电图记录到心房颤动、心房扑动、房性心动过速等的发生，或Holter记录到心房颤动、心房扑动、房性心动过速等持续时间＞30 s。

7.数据分析方法 数据分析采用SPSS 22.0统计软件实现。正态分布资料用均数±标准差表示，采用两独立样本t检验比较，非正态分布资料采用中位数（M）及四分位数间距（P25，P75）表示，采用非参数检验（U检验）比较。分类型变量用频数及百分比表示，采用卡方检验或Fisher's精确检验比较。单因素线性回归分析用于评估Gal-3浓度与基线指标的线性关系。采用多因素Logistic回归分析为探究心房颤动复发的预测因素，将单因素分析中P＜0.10的临床指标代入运算。以P＜0.05为差异有统计学意义。

结 果

1.患者特征 本研究共入组符合标准的心房颤动患者152例，其中阵发性心房颤动110例（72.4%），持续性心房颤动42例（27.6%），研究者的基线资料见表1。

2.心房颤动复发情况 本研究对患者进行了射频消融术后临床随访，平均随访时间为（340.9±145.8）d，随访151例，失访1例（失访率0.7%）。其中，阵发性心房颤动组随访109例，失访1例；持续性心房颤动组随访42例，失访0例。随访结果显示:维持窦性心律的心房颤动患者共109例（72.2%），心房颤动复发患者共42例（27.8%）。其中，维持窦律的患者中，阵发性心房颤动组共80例（73.4%），持续性心房颤动组共29例（69.0%）；心房颤动复发的患者中，阵发性心房颤动组共29例（26.6%），持续性心房颤动组共13例（31.0%），差异无统计学意义（P=0.593）。

根据消融术后复发情况分组，研究者的基线资料见表2。

3.血清标志物表达水平 在阵发/持续性心房颤动患者中，血清Gal-3水平未见明显差异（表1）。单因素线性回归分析显示血清Gal-3水平与年龄呈负相关（r=-0.258，P=0.001），而与其余基线临床数据及生化指标无相关。多因素Logistic回归显示血清Gal-3水平和血小板平均分布宽度PDW是射频消融术后心房颤动复发的危险因素（表3）。

表1 阵发/持续性心房颤动患者的基线资料［，n（%），M（QR）］

表1 阵发/持续性心房颤动患者的基线资料［，n（%），M（QR）］

注:1 mmHg=0.133 kPa，ACEI/ARB:血管紧张素转化酶抑制剂/血管紧张素受体阻滞剂

项目 阵发性心房颤动（n=110）持续性心房颤动（n=42）P值年龄/岁 58.4±11.2 57.4±10.4 0.639男性 65（59.1） 27（64.3） 0.558 BMI/（kg/m2） 25.7±3.3 26.9±2.8 0.037收缩压/mmHg 130.0±16 125.0±17.3 0.124舒张压/mmHg 75.0±13.3 80.0±19.3 0.011既往史高血压 54（49.1） 15（35.7） 0.139糖尿病 25（22.7） 4（9.5） 0.064冠心病 14（12.7） 4（9.5） 0.585高脂血症 29（26.4） 11（26.2） 0.983脑卒中 17（15.5） 3（7.1） 0.978吸烟史 17（15.5） 8（19.0） 0.593饮酒史 10（9.1） 7（16.7） 0.185入院时用药他汀类 33（30.0） 13（31.0） 0.909 β受体阻滞剂 28（25.5） 12（28.6） 0.696 ACEI/ARB 29（26.4） 12（28.6） 0.784超声心动图LAD/mm 37.0±6.0 42.0±5.0 ＜0.001 LVEDD/mm 47.0±6.0 48.0±7.0 0.418 LVEF/% 64.0±7.0 60.0±7.0 0.002实验室检查Gal-3/（μg/L） 7.11（9.06，41.60） 8.88（3.14，53.12） 0.582中性粒细胞/淋巴细胞 1.87（1.51，2.64） 1.93（1.51，2.26） 0.724淋巴细胞/单核细胞 5.71（4.49，7.53） 5.96（4.41，6.96） 0.770血小板/淋巴细胞 117.21（91.28，157.58）114.94（90.78，145.51）0.716红细胞平均分布宽度/% 42.64±2.78 42.56±2.41 0.870血小板平均分布宽度/% 12.90（11.53，14.60） 12.30（11.48，14.28）0.651血白蛋白/（g/L） 44.60（41.55，46.35） 43.55（41.60，46.03）0.478 Hs-CRP/（mg/L） 0.83（0.42，1.54） 1.01（0.50，3.29） 0.208 HCY/（μmol/L） 10.80（9.10，15.40） 12.00（9.60，15.35） 0.299术后复发情况复发 29（26.4） 13（31.0） 0.593

讨 论

目前，血清标志物预测心房颤动射频消融术后成功率的价值逐渐成为研究热点，由于缺乏系统、有效的大样本量临床评估，各类心房纤维化相关血清标志物的预测价值尚无一致结论。本研究在回顾相关领域研究后，筛选了当前研究热点的血清Gal-3水平加以评价。

Gal-3是一种炎性因子，是β半乳糖苷凝集素家族成员，参与心肌纤维化进程。广泛研究［8-9］证实血清Gal-3水平是心房颤动发生发展的独立危险因素；Gal-3在持续性心房颤动患者中的表达水平高于阵发性心房颤动［8］。

表2 心房颤动射频消融术后复发/未复发患者的基线资料［，n（%），M（QR）］

表2 心房颤动射频消融术后复发/未复发患者的基线资料［，n（%），M（QR）］

项目阵发性心房颤动（n=110）持续性心房颤动（n=42）P值年龄/岁 58.1±11.25 57.91±10.56 0.915男性 69（63.3） 23（54.8） 0.335 BMI/（kg/m2） 25.98±3.39 26.00±2.69 0.973收缩压/mmHg 129.0±16.0 126.58±15.10 0.250舒张压/mmHg 76.0±16.8 78.62±7.80 0.948心房颤动的类型阵发性 80（73.4） 29（69.0） 0.593持续性 29（26.6） 13（31.0） 0.593既往史高血压 55（50.5） 14（33.3） 0.058糖尿病 22（20.2） 7（16.7） 0.623冠心病 13（11.9） 5（11.9） 1.000高脂血症 30（27.5） 10（23.8） 0.643卒中 8（7.3） 3（7.1） 1.000吸烟史 22（20.2） 3（7.1） 0.085饮酒史 16（14.7） 1（2.4） 0.042入院时用药他汀类 36（33.0） 10（23.8） 0.270 β受体阻滞剂 25（22.9） 15（35.7） 0.111 ACEI/ARB 29（26.6） 12（28.6） 0.808超声心动图LAD/mm 38.2±4.8 39.1±6.2 0.724 LVEDD/mm 47.6±4.1 48.0±4.3 0.738 LVEF/% 63.0±7.0 61.6±6.6 0.617实验室检查Gal-3/（μg/L） 4.00（0.22，13.69） 38.52（3.65，220.73）0.001中性粒细胞/淋巴细胞 1.87（1.50，2.54） 1.87（1.55，2.62） 0.813淋巴细胞/单核细胞 5.64（4.49，7.41） 6.12（4.66，7.49） 0.579血小板/淋巴细胞 115.12（90.04，152.68）117.20（92.84，143.34）0.770红细胞平均分布宽度/% 42.59±2.66 42.94±2.77 0.489血小板平均分布宽度/% 12.90（11.75，14.90） 12.30（11.00，13.85） 0.058血白蛋白/（g/L） 44.40（41.65，46.45） 44.05（41.35，46.06） 0.565 Hs-CRP/（mg/L） 0.89（0.50，1.68） 0.83（0.34，2.06） 0.386 HCY/（μmol/L） 11.15（11.15，15.48） 10.20（9.05，15.25） 0.383

表3 射频消融术后复发的多因素Logistic回归分析

本研究结果显示血清Gal-3水平在阵发性/持续性心房颤动患者中的表达差异无统计学意义，且血清Gal-3水平与性别、LVEF、左心房内径等均不相关，上述结论与相关研究结论不一致。本中心根据既往经验，筛选持续性心房颤动患者时更倾向于心房颤动持续时间短于1年、左心房前后径＜50 mm者（该人群术后获益更高），而过滤掉持续时间长、左心房内径明显扩大的患者，因此产生一定的选择偏倚；另外，本研究在分组时将持续性心房颤动及长程持续性心房颤动均归为持续性心房颤动组，未在心房颤动持续时间方面进行更细的化分。上述情况均可对血清Gal-3水平在各组间的表达产生影响。

在预测射频消融术后成功率方面，Wu等［5］在小样本量研究中证实血清Gal-3水平可作为独立危险因素预测非结构性心脏病持续性心房颤动术后复发，Takemoto等［10］及Nicolas等［11］证实类似观点；但Gordon等［12］认为血清Gal-3水平不能有效预测射频消融术后1年的心房颤动复发情况。本研究结果显示平均随访（340.9±145.8）d，血清Gal-3水平是心房颤动射频消融术后复发的独立危险因素（OR=1.009，95%CI:1.005～1.014，P＜0.001），但其OR值接近1，预测价值有限。

本研究的局限性考虑如下:①未设置正常人群作为对照组；②Gal-3非特异性代表心房组织，全身其他脏器的纤维化或炎症程度可能影响血清表达，而本研究入组对象来源于真实世界，未排除合并高血压、糖尿病、冠心病及其他潜在基础疾病的心房颤动人群，这可能会对研究结果产生影响；③因部分人群表现为无症状性心房颤动发作而未能有效记录，不可避免的造成心房颤动复发人群低估；④临床数据显示阵发性心房颤动射频消融手术成功率优于持续性心房颤动［4］。为保证心房颤动患者术后获益，本中心倾向于选择阵发性心房颤动、持续性心房颤动病程＜1年、左心房前后径＜50 mm以及合并基础疾病较少者接受射频消融手术，从而产生一定的选择偏倚。以上为研究局限性，尚需更多研究进一步验证。

综上所述，心房颤动复发组血清Gal-3水平高于维持窦律者，可作为预测心房颤动射频消融术后复发的危险因素，帮助临床医生筛选更适合接受心房颤动射频消融手术的患者并使其从手术中获益。