肝素结合蛋白浓度检测在脓毒症诊断中的应用价值

张艳 黄深华 何大海 王华丽 陈洁 余华 孔丽蕊

脓毒症指宿主对感染反应失调引起的致命性器官功能障碍［1］，是炎症及抗炎症反应平衡失调所导致的全身炎症反应综合征（systemic inflammatory response sydrome，SIRS）［2］。脓毒症按严重程度分为脓毒症和脓毒性休克。机体发生感染时，多形核白细胞游走伴随血浆外渗，感染加重发生SIRS，后发展为脓毒症；脓毒症进一步发展，合并出现严重的循环、细胞/代谢紊乱失调，导致脓毒性休克，死亡风险增加［3］。相关研究显示，对于感染患者延迟给药治疗，其病死率明显升高［4］。目前，临床常采用病原学检查和实验室检测对感染进行诊断，虽然病原学检测是感染诊断的金标准，但是其检测时间较长、标本易污染、培养条件高，且检出阳性率较低，常会延误疾病的治疗。本研究对肝素结合蛋白（heparin binding protein，HBP）浓度进行检测，并与其他检测指标进行比较，探讨HBP 对脓毒症诊断的应用价值，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 研究对象及分组 选取2018 年1 月—12 月本院收治的52 例脓毒症患者为研究对象，根据疾病严重程度不同分为脓毒症组（26 例）和脓毒性休克组（26 例），另选35 例健康体检人群为健康对照组。

1.2 方法

1.2.1 血液标本采集 抽取所有脓毒症患者入组时外周空腹静脉血3 管，每管各2.5 mL。一管为无抗凝剂血液，静置30 min 后分离血清用于降钙素原（procalcitonin，PCT）检测；一管EDTA 抗凝全血用于超敏C-反应蛋白（hypersensitive C-reactive protein，hs-CRP）和白细胞计数（white blood cell count，WBC）检测；一管为枸橼酸钠抗凝血，离心分离血浆用于HBP 检测。

1.2.2 仪器与试剂 HBP 检测仪器为北京普朗新科技有限公司，试剂购自中国杭州中翰盛泰公司；PCT 检测使用mini VIDAS 梅里埃免疫荧光分析仪及其配套检测试剂；hs-CRP 检测使用RBD-1000艾瑞德快速免疫分析仪及配套试剂；WBC 检测使用XT-1800i 希森美康血球仪及其配套试剂。

1.2.3 检测方法 采用酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）检测HBP，采用酶联免疫荧光法检测PCT，采用免疫层析法检测hs-CRP，采用全自动血球分析仪检测WBC。

1.3 统计学方法 采用SPSS 20.0 统计学软件处理数据，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，组间比较采用t 检验；计数资料以例表示，采用χ2检验。以临床是否诊断为脓毒症作为状态变量，以脓毒症患者检测数据为检验变量，绘制受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic curve，ROC），评价各指标对脓毒症的诊断效能，确定最佳临界值。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 一般资料 共纳入87例受检者。所有受检者性别、年龄方面比较差异均无统计学意义（均P＞0.05），具有可比性。见表1。

表1 3 组受检者的一般资料比较（s）

表1 3 组受检者的一般资料比较（s）

组别 例数（例）性别（例） 年龄（岁）男性 女性 范围x±s健康对照组 35 17 18 6 ～74 55.27±2.68脓毒症组 26 12 14 3 ～72 54.25±3.25脓毒性休克组 26 11 15 5 ～69 54.68±3.14

2.2 各组间HBP、PCT、hs-CRP 和WBC 的比较健康对照组、脓毒症组、脓毒性休克组之间的HBP、PCT、hs-CRP、WBC 两两比较差异均有统计学意义，其中脓毒性休克组的HBP 升高最为明显（均P＜0.01）。见表2。

表2 3 组受检者HBP、PCT、hs-CRP 和WBC 比较（

表2 3 组受检者HBP、PCT、hs-CRP 和WBC 比较（

注：与健康对照组比较，aP＜0.01，bP＜0.05；与脓毒症组比较，cP＜0.01

WBC（×109/L）健康对照组 35 2.85± 0.76 0.25±0.09 2.63±1.33 7.29±0.80脓毒症组 26 8.55± 1.27 a 0.38±0.34 b 3.17±1.53 b 9.26±0.87 b脓毒性休克组26 96.72±21.35 ac1.86±0.67 ac10.91±6.21 ac12.49±1.56 b组别 例数（例）HBP（μg/L）PCT（μg/L）hs-CRP（g/L）

2.3 各检测指标对脓毒症和脓毒性休克的诊断价值 HBP 对脓毒症特别是脓毒性休克的诊断敏感度和特异度均明显高于PCT、hs-CRP 和WBC（均P＜0.05）。见表3。

表3 HBP、PCT、hs-CRP 和WBC 诊断脓毒症和脓毒性休克的敏感度、特异度

2.4 ROC 曲线分析 HBP、PCT、hs-CRP 对脓毒症均有预测价值（均P＜0.05），其中HBP 预测脓毒症的敏感度和特异度最佳。见图1，表4。

图1 HBP、PCT、hs-CRP 和WBC 预测脓毒症的ROC 曲线

表4 HBP、PCT、hs-CRP 和WBC 对脓毒症的预测价值

3 讨论

脓毒症是由于病原菌感染致毒素释放后形成炎症介质对机体组织造成损害，引起的全身炎症反应，多见于外科大手术、感染、严重创伤等，为严重的并发症，可能导致多器官功能衰竭（multiple organ failure，MOF）和休克。感染性疾病在临床的发病率较高，发病初期不易被发现，如果在疾病早期未给予患者有效的诊断和治疗，会严重影响其健康和生命安全，甚至可造成患者死亡。因此，在感染性疾病中，准确有效的诊断具有重要意义［5］。PCT、hs-CRP、WBC 等检测常用于感染性疾病诊断，但检测方法缺陷较多，且检测准确性较低，如WBC 对感染的诊断准确度和特异度均较低，不能较好地区分细菌和非细菌感染，也不能反映患者的预后情况［6］；hs-CRP是一种出现较早的急性时相反应蛋白，敏感度高但诊断特异度较低［7］；PCT 仅在感染出现机体全身反应时才会产生，局部感染或慢性感染时血清水平正常或轻微升高［8-9］，诊断敏感度和特异度也较低［10］。

HBP存在于中性粒细胞内的分泌颗粒和嗜天青颗粒中，当机体发生感染时，毒素刺激中性粒细胞释放HBP，造成HBP 升高；HBP 是中性粒细胞被激活后释放的一种多功能蛋白，同时也是一种促炎症反应介质，可使单核细胞和巨噬细胞被激活，导致血管出血，引起组织水肿。相关研究表明，HBP 与多种感染性疾病存在密切的关系，通过动态检测重症脓毒血症和脓毒性休克患者血液中的HBP 浓度，能有效预测患者可能出现的严重并发症，进而为患者提供有效的治疗［11-12］。多项研究表明，动态检测HBP 可作为感染的早期诊断指标，且结果准确有效［13-14］。

本研究显示，脓毒症组和脓毒性休克组的HBP均明显高于健康对照组，各组间HBP、PCT、hs-CRP和WBC 比较差异均有统计学意义，但HBP 差异更为明显，更有利于疾病诊断；死亡风险增加的脓毒性休克组的HBP 又明显高于脓毒症组，提示在严重程度评价中也有明显优势。由此可见，HBP 对脓毒症的预测效果优于PCT、hs-CRP 和WBC，特别是脓毒性休克组，敏感度和特异度可达100.0%。ROC曲线显示，HBP 对脓毒症有重要的预测价值，其最佳临界值为7.295 μg/L 时，敏感度和特异度分别为0.625、1.000。

综上所述，在感染性疾病诊断中应用HBP 检测具有较明显的诊断优势，有利于感染性疾病患者的早期鉴别诊断，可使脓毒症患者得到及时治疗，从而提高治疗效果。HBP 是一种颗粒释放蛋白，与细菌感染的关系密切，具有高特异度、高敏感度、高阳性和阴性检出率等优点，能更准确地反映患者是否感染脓毒症。HBP 作为临床新型炎症标志物，其优于传统炎症标志物［15-16］，且对脓毒症的早期预警、预测评估及疗效观察具有特异性的临床价值［9,17］。HBP 联合PCT、hs-CRP 检测对患者疾病严重程度进行评估在脓毒症诊断分级中有一定的应用价值［18］。