不同血小板含量血液在不同静置时间对浓缩血小板第2次分离回收率影响分析

连晓征 陈玉燕 陈惠民

福建省泉州市中心血站 352000

依据原国家卫生计生委所发的“关于2017年全血液安全技术核查情况通报(国卫办医函[2018]346号)”中的提高手工分离血小板利用率的要求，我站从2019年7月1日起开展白膜法分离制备浓缩血小板。为探讨不同血小板含量献血者所献血液在不同静置时间该袋血液浓缩血小板第2次分离回收率是否差异有统计学意义，特别是静置多长时间其2次分离回收率达到高值，特对80袋不同血小板含量的300ml血液在不同静置时间第2次分离血小板回收情况进行比较，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择符合《献血者健康检查要求》[1]的献血者所献全血300ml，只有300ml血液采集流畅性及采集完成时间符合文献[2]要求才从该袋血液留样袋中留取血样2ml于EDTA-K2真空管内，用Sysmex1000i全自动血细胞计数仪进行血小板计数，且血小板计数≥150×109/L的血液才用于白膜法手工分离制备成浓缩血小板。其中血小板计数在(150～250)×109/L和(251～350)×109/L的300ml血液各40袋。

1.2 随机编号 对血小板计数在(150～250)×109/L这组40袋血液分别按顺序编1、2、3…号，在随机数字表中查得相应的数字(重复的弃去不计)赋到血袋顺序编号，将所得的随机数由小到大编秩排列，将编秩排列号在1～10、11～20、21～30、31～40归到A、B、C、D四个组，对血小板计数在(251～350)×109/L这组40袋血液也采取相同方法分成四组。

1.3 仪器与方法 300ml血液采集完成后立即放入电子生物冷链运输箱(上海向成生物科技有限公司XC-XXB35L)(22±2)℃保存不超过6h，将(22±2)℃保存血液用Heraeus6000i离心机离心15min[1 160g，(22±2)℃]，将离心好的血液安放于Sepamatic-SL(Ⅲ)全自动全血成分血分离机分离得到约80ml白膜层与血浆混合液，把该混合液轻轻混匀后于无菌接管机(902880/compodock)留取标本约2ml用Sysmex1000i全自动血细胞计数仪测量血小板含量。A、B、C、D四个组白膜层与血浆混合液每组10袋存放在离心杯内于Heraeus6000i离心机内(22±2)℃分别静置0、1、2、4h后再第2次离心10min[215g，(22±2)℃]，把离心后的白膜层与血浆混合液安放于Sepamatic-SL(Ⅲ)全自动全血成分血分离机制备成浓缩血小板约50ml，将浓缩血小板放置在美国Helmer血小板振荡保存仪内保存24h后从交叉血辫内留取样本约1ml进行血小板计数。

1.4 观察指标 浓缩血小板第2次分离回收率=(成品血小板计数×成品容量)/(白膜层与血浆混合液小板计数×白膜层与血浆混合液容量)。

1.5 统计学方法 采用SPSS13.0软件包处理数据，80袋不同血小板含量的300ml血液在不同静置时间的第2次分离血小板回收情况进行比较用I×J两因素资料方差分析求F值。

2 结果

不同血小板含量献血者所献血液在不同静置时间该袋血液血小板第2次分离回收率比较见表1。其I×J因素资料方差分析F值见表2。不同血小板含量献血者所献血液在不同静置时间该袋血液血小板第2次分离回收率升降趋势见图1。

表1不同血小板含量血液在不同静置时间血小板第2次分离回收率比较

表2不同血小板含量血液在不同静置时间血小板第2次分离回收率比较方差分析

图1回收率与静置时间关系趋势(h)

3 讨论

随着输血技术的发展，成分输血的优势越来越被认同，一袋血可以分离多种血液成分，既做到最大程度保留各个血液成分的有效性，满足不同疾病患者的需求，又节约了宝贵的血源[3]。美国2011年机采血小板用量比2008年增长了11.9%，但手工血小板的用量与2008年变化不大[4]。为提高手工制备浓缩血小板的血小板含量，有文献报道随白膜层储存时间的延长，血小板对外界刺激的敏感性降低，使本已经形成微聚体的血小板充分解聚[5]，因血小板解聚后，其在第2次轻离心时的回收率可能会提高。

通过对血小板计数为(150～250)×109/L和(251～350)×109/L的300ml血液各40袋，经第1次强离心所产生的白膜层与血浆混合液在(22±2)℃分别静置0、1、2、4h后再进行第2次轻离心，对所得到的浓缩血小板第2次分离回收率比较发现，在不考虑不同静置时间因素影响情况下，血小板计数(150～250)×109/L和(251～350)×109/L血液所得到的浓缩血小板第2次分离回收率均值分别为0.77和0.75，差异无统计学意义(F=0.59P>0.05)，说明不同血小板含量的献血者所献的血液制备浓缩血小板第2次分离回收率之间差异无统计学意义。在不考虑不同血小板含量因素的影响下，静置时间为0、1、2、4h后再进行第2次轻离心，所得到的浓缩血小板第2次分离回收率分别为0.67、0.77、0.80、0.78，差异有统计学意义(P<0.05)，说明静置时间对血小板的制备是有影响的。同时通过回收率与静置时间关系趋势图可以看出，静置到2h，其回收率值最高为0.80。考虑到血小板的要在(22±2)℃且要振荡保存，因此笔者认为白膜层与血浆混合液在(22±2)℃静置时间并不是越长越好，静置2h就能达到较高的回收率。献血者不同血小板含量与不同静置时间之间不存在交互作用，也就是不同血小板含量在不同静置时间回收率的变化值差异无统计学意义(P>0.05)。

综上所述，不同血小板含量献血者所献血液对制备浓缩血小板第2次分离回收率不产生影响，但不同静置时间对制备浓缩血小板第2次分离回收率会产生影响，静置2h即可使浓缩血小板第2次分离回收率达到高值，不必进一步延长静置时间，以免影响血小板的质量。