蛹虫草液体发酵培养基的研究

李志涛　彭蕊　朱冰清　王晖

摘要：以蛹虫草的菌丝体为目的产物，采用L18（37）正交试验研究蛹虫草最佳液体菌种培养基配方。试验结果表明，葡萄糖、蛋白胨、磷酸二氢钾、硫酸镁对蛹虫草菌丝体含量有显著影响；最佳配方为：葡萄糖2.5%、玉米粉1.0%、蛋白胨0.5%、磷酸二氢钾0.15%、碳酸钙0.05%、硫酸镁0.10%、维生素B1 0.003%，在此条件下的菌丝体含量达24.17 mg/mL。

关键词：液体发酵；培养基配方；蛹虫草；正交试验；菌丝体

中图分类号：TS201.3 文献标识码：A 文章编号：1674-1161（2019）02-0003-03

蛹虫草又称北冬虫夏草，是一种食药两用的大型真菌，其药用成分与冬虫夏草相近，具有降压、抗衰老、镇静、保肺、益肾、止血、抗疲劳、提高人体免疫力、抗癌等功能，医药价值和经济价值均较高。目前，我国一般采用固体菌种方式培养蛹虫草，但这种培养方式具有菌龄长而不一，出菇不整齐的缺点。与固体菌种培养相比，液体菌种制种具有菌龄一致、周期短、出菇整齐等优点，因此，以蛹虫草的菌丝体为目的产物，研究蛹虫草的最佳液体菌种培养基配方，为进一步开发蛹虫草提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 材料與试剂

蛹虫草：衡水学院食品学实验室提供。

PDA斜面培养基：马铃薯200 g，葡萄糖20 g，琼脂20 g，水1 000 mL，pH值自然。

葡萄糖、玉米粉、蛋白胨、磷酸二氢钾、碳酸钙、硫酸镁、维生素B1。

1.2 仪器与设备

Alpha1506型分光光度计：上海谱元仪器有限公司；AE523型电子天平：上海恒平有限公司；SPX-100B-Z型生化培养箱：苏州江东精密仪器有限公司；HH-6型恒温水浴锅：上海析达公司。

1.3 试验方法

1.3.1 蛹虫草菌丝生长量测定 蛹虫草菌丝提取流程为：蛹虫草斜面菌种（PDA斜面培养基进行培养）→摇瓶液体发酵→蛹虫草发酵液→收获蛹虫草菌丝体→60 ℃条件下干燥→称量。

摇瓶液体发酵的培养基成分为葡萄糖、玉米粉、蛋白胨、磷酸二氢钾、碳酸钙、硫酸镁、维生素B1。将不同发酵培养基分别装入三角瓶（装量为100 mL/250 mL，接种量为10%），在转速150 r/min、24 ℃条件下振荡培养6 d。

菌丝生长量测定公式为：

蛹虫草菌丝体含量=菌丝体的干重（mg）/

发酵液体积（mL） （1）

1.3.2 正交试验 选用葡萄糖、玉米粉、蛋白胨、磷酸二氢钾、碳酸钙、硫酸镁、维生素B1为试验因素，进行L18（37）正交试验，因素水平见表1。

2 结果与分析

2.1 正交试验

L18（37）正交试验结果及分析见表2。

由表2得知，按培养基成分对蛹虫草菌丝体含量影响顺序为：C>F>D>A>G>B>E，即蛋白胨>硫酸镁>磷酸二氢钾>葡萄糖>维生素B1>玉米粉>碳酸钙。说明蛋白胨对蛹虫草菌丝体含量的影响最大，葡萄糖、蛋白胨、磷酸二氢钾、硫酸镁对菌丝生长有显著影响（p<0.05）。

由表2中的数据还可知：最佳试验组合为A2B2C2D2E2F2G1，即葡萄糖2.5%、玉米粉1.0%、蛋白胨0.5%、磷酸二氢钾0.15%、碳酸钙0.05%、硫酸镁0.10%、维生素B1 0.003%。。

2.2 验证试验

采用最佳组合进行验证试验，结果取3次平行试验的平均值，确定菌丝体含量为24.17 mg/mL，明显高于正交试验（表1）中的最高值。

3 结论

采用正交试验确定的蛹虫草的最佳培养基配方为：葡萄糖2.5%、玉米粉1.0%、蛋白胨0.5%、磷酸二氢钾0.15%、碳酸钙0.05%、硫酸镁0.10%、维生素B1 0.003%。在此最佳条件下进行验证试验，菌丝体含量达24.17 mg/mL。

参考文献

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