HIF-1α和SIRT6在甲状腺癌组织中的表达及其与肿瘤血管生成的关系

曾 勇，郑克思，陈 聪，吴元肇，陈 碧

(温州市人民医院，浙江 温州 325000)

甲状腺癌是内分泌系统常见肿瘤之一，该病起病较为隐匿，生物学特征多变，就现有影像学和病理诊断对良恶性肿瘤鉴别诊断均存在一定误差，故研究甲状腺癌组织形成和表达的分子机制，从微观角度寻找辅助鉴别甲状腺癌的分子诊断标志物，用以指导临床选择更为合理的治疗方案具有重要意义[1]。HIF-1α在多种实体肿瘤中均检测到高表达状态，是一种重要转录调节因子，可能参与了肿瘤浸润和转移过程，对患者预后有重要影响。SIRT6与多种肿瘤的进展有关，包括结直肠癌，小细胞肺癌，乳腺癌等，SIRT6可以通过调节多种通路来调节肿瘤的发生发展[2]。本研究探讨HIF-1α和SIRT6在甲状腺癌组织中的表达及其与肿瘤血管生成的关系，现报道如下。

一、对象与方法

1.研究对象。选取2017年9月-2019年3月我院收治的甲状腺癌患者89例，其中男51例，女48例，年龄22-73岁，平均(39.67±4.82)岁。其中乳头状癌60例，滤泡状癌16例，髓样癌11例，未分化癌2例。所有患者术前均未行新辅助放疗、化疗、内分泌治疗及靶向治疗，术前病理诊断明确，所有癌组织和癌旁组织均按常规标准制作石蜡对切片进行包埋。

2.研究方法。应用免疫组织化学Envision法检测患者甲状腺癌组织和癌旁组织中HIF-1α和SIRT6的表达，研究使用的是Envision染色超敏试剂盒和DAB显色试剂盒，兔抗人SIRT6多克隆抗体和鼠抗人HIF-1α单克隆抗体。操作程序严格按照说明书进行。检测结束后对甲状腺癌组织和癌旁组织HIF-1α、SIRT6表达阳性率进行比较，并分析甲状腺癌组织和癌旁组织HIF-1α、SIRT6表达相关性。

3.评价标准。在高倍镜下对癌细胞数量进行观察，高倍显微镜为某公司提供的SZ61型光学显微镜。HIF-1α和SIRT6均以细胞膜和细胞质染色。评价标准如下：-：几乎不染色；+：浅黄，弱阳性；++：棕黄色，阳性；+++：深棕色，强阳性。

4.统计学方法。使用SPSS 21.0进行统计分析。本研究HIF-1α、SIRT6表达阳性率为计数资料，采用χ2检验，以率/百分比表示。HIF-1α、SIRT6表达相关性采用Pearson相关性分析，以r表示，以P<0.05表示两组之间差异有统计学意义。

二、结 果

1.甲状腺癌组织和癌旁组织HIF-1α、SIRT6表达阳性率比较。89例甲状腺癌患者中，HIF-1α、SIRT6在癌组织和癌旁组织均有表达，HIF-1α在癌组织中表达阳性率明显高于癌旁组织(P<0.05)；SIRT6在癌组织中表达阳性率明显高于癌旁组织(P<0.05)(见附表)。

附表 甲状腺癌组织和癌旁组织HIF-1α、SIRT6 表达阳性率比较(n)

2.甲状腺癌组织和癌旁组织HIF-1α、SIRT6表达相关性分析。两者均在癌组织中呈现高表达，且在癌旁组织中呈现低表达，HIF-1α、SIRT6表达呈显著正相关(r=0.867)，差异有统计学意义(P<0.05)。

三、讨 论

甲状腺肿瘤病灶发展较为缓慢，但癌瘤细胞早期容易发生颈部淋巴结远处转移，患者预后不理想且病死率高，但目前其对早期诊断准确率偏低，在甲状腺癌中缺氧发挥着重要作用[3]。

HIF-1α基因定位于人的14号染色体，是HIF-1的活性亚基，也是调控细胞代谢途径转换过程的重要因子。HIF-1α可诱导血管内皮生长因子表达，促进血管生成，在肿瘤细胞产生、浸润和转移过程中起到重要作用。

SIRT6是Sirtuin蛋白重要成员，是酵母细胞中沉默信息调节因子2同源物，主要定位于细胞核，具有ADP-核糖基转移酶催化活性作用，与癌症反映和多种代谢相关疾病存在相关，可与抑癌因子泛素特异性蛋白酶10发挥协同作用。SIRT6在癌症发生中的作用最为复杂，可通过调节癌细胞中有氧糖酵解发挥肿瘤促进和肿瘤抑制因子的双重作用，且转化的SIRT6缺陷细胞显示出糖酵解增加和肿瘤生长促进，甲状腺癌细胞组织SIRT6蛋白表达水平明显低于癌旁正常组织，说明SIRT6在基因转录阶段就已经出现表达缺失的情况。

本次研究结果显示，HIF-1α和SIRT6在癌组织中表达阳性率均明显高于癌旁组织，表明HIF-1α和SIRT6可能与甲状腺癌侵袭转移有相关性，过表达的HIF-1α和SIRT6可能对甲状腺癌的进展过程起到一定作用，可能是甲状腺癌患者预后不良的标志。HIF-1α、SIRT6在癌组织和癌旁组织中表达呈显著正相关，提示两者在甲状腺癌发生发展过程中可能起到协同作用。