丹参素钠对2期压力性损伤模型大鼠受压部位病理学的影响*

章琼芝 沈翠珍

浙江中医药大学护理学院 浙江 杭州 310053

压力性损伤俗称压疮，是指皮肤和深部软组织由强烈和(或)长期的压力或压力联合剪切力所致的局部损伤。现代研究发现[1-3]，丹参提取物丹参素钠有潜在的抗氧化、抑制炎症反应、促进血管内皮生长及创面修复等作用。笔者通过建立2期压力性损伤模型，观察丹参素钠对2期压力性损伤模型大鼠受压部位病理学的影响。

1 材料与方法

1.1 实验动物:SPF级健康雄性大鼠25只，月龄20～22周，平均体质量470±30g，由浙江中医药大学动物实验中心提供。大鼠单笼饲养，自由进食、饮水。在室内温度

22～30℃、相对湿度50%～70%、明暗周期12h的环境中适应性喂养1周后选取20只给予造模处理，另5只作为空白组，对实验动物的处置符合动物实验伦理标准。

1.2 造模材料:圆片形铁片（直径12mm、厚1mm、重1g），圆片形磁铁（直径12mm、厚1mm、重1g），均购自东莞市合冶金属材料有限公司。

1.3 药物及试剂:丹参素钠，上海源叶生物科技有限公司生产，每支20mg，批号B20255-20MG；10%水合氯醛，福州飞净生物科技有限公司生产。

1.4 实验仪器:Nikon（TE2000-U）显微镜（Olympus，日本），组织石蜡包埋机（YB-6D，湖北亚光医用电子技术有限公司），组织切片机（Leitz，德国），超声清洗机（常州佑达），手术器械均由浙江中医药大学动物实验中心病理实验室提供。

1.5 实验方法:分述如下。

1.5.1 动物模型的复制及评价:动物模型的制作参考磁片循环压迫的造模方法[4-5]。在清洁级动物手术室内用10%水合氯醛（3ml/kg）腹腔注射麻醉大鼠后，将大鼠的四肢固定在解剖板上，对大鼠一侧后肢、腹部皮肤进行剃毛，备皮区域为4cm×5cm。再用5%聚维酮碘对备皮区域进行消毒，在大鼠后肢做一切口，长约2cm，钝性分离组织。将无菌圆形铁片植入大鼠后肢股薄肌处，用4-0 Dexon聚轻基乙酸线连续缝合切口，再用5%聚维酮碘消毒缝合处以防止感染。待切口愈合后，放置圆片形磁铁，从而对皮肤产生压力，造成局部皮肤缺血。每次缺血2h后再将外源磁铁取下，让局部血流恢复10min，如此循环压迫。每日每只大鼠进行5个连续的循环，连续2天。以受压部位皮肤颜色变黯红色、周围红肿、无流血流脓作为2期压力性损伤形成的标准。

1.5.2 动物分组及干预治疗:将20只大鼠进行2期压力性损伤模型制备，5只空白组大鼠给予剃毛处理。造模过程中共4只大鼠造模失败，1只空白组大鼠死亡。因此将造模成功的16只大鼠采用随机数字表法随机分为模型组，丹参素钠低、中、高剂量组，每组4只，各组体质量比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。空白组和模型组大鼠腹腔注射生理盐水2ml/（kg·d），丹参素钠低、中、高剂量组大鼠分别给予15、30和60ml/（kg·d）丹参素钠注射液腹腔注射。连续给药4天，给药期间大鼠正常进食、活动。

1.5.3 标本采集及指标观察:实验结束前，肉眼观察各组大鼠受压部位皮肤的形态、颜色变化以及皮肤的完整性。切取各组大鼠受压中心部位皮肤，予10%中性多聚甲醛固定、乙醇脱水、二甲苯透明、石蜡包埋等处理，蜡块持续切片，厚4μm，进行HE染色。采用Nikon（TE2000-U）显微镜观察，NikonNIS-Elements图像分析软件采集图像，观察各组大鼠受压部位皮肤病理学变化，包括组织结构、炎性细胞浸润情况等。

2 结果

2.1 肉眼观察结果:空白组大鼠为正常皮肤组织，皮肤完整，外观呈肉粉色，未见水肿及渗出等损伤，如图1。造模成功的大鼠创面皮肤颜色为黯红色，周围红肿，无流血流脓，如图2。实验终点，模型组大鼠创面呈结痂状态，质硬，创面颜色变黑，周围明显红肿，按压周围红肿处流出少量淡黄色组织液，如图3。丹参素钠低、中、高剂量组创面出现肉芽组织，有不同程度的结痂，质地较软，位于创面周围或偏中央，创面颜色呈粉红色或略白色，创面面积显著变小，如图4～6。

图1 空白组

图2 给药前大鼠创面

图4 低剂量组

图5 中剂量组

图6 高剂量组

2.2 病理切片观察结果:空白组:皮肤上皮组织为复层鳞状上皮，上皮结构完整，层次清晰，真皮层内附件（如毛囊）较多且清晰可见，炎性细胞浸润不明显，如图7。模型组:创面皮肤坏死伴钙化，未见明显的肉芽组织，真皮层出现大量炎性细胞浸润，真皮胶原纤维出现变性、脂肪细胞溶解的现象，如图8。丹参素钠不同剂量组:丹参素钠低、中、高剂量组镜下显示炎细胞浸润逐渐减轻，新生肉芽组织依次增多，表皮恢复程度逐渐变高。丹参素钠低剂量组创面皮肤部分坏死伴钙化，上皮结构不清，真皮胶原纤维溶解，毛细血管淤血，如图9。丹参素钠中剂量组上皮结构较清晰，表皮层恢复程度尚好，表皮与真皮部分分离，脂肪细胞游离，毛细血管扩张充血，如图10。丹参素钠高剂量组表皮层恢复程度较好，表皮与真皮连接疏松，真皮层可见成纤维细胞、毛囊细胞的增生，如图11。

图7 空白组

图8 模型组

图9 低剂量组

图10 中剂量组

图11 高剂量组

3 讨论

压力性损伤一直以来都是护理领域重点关注的问题。压力性损伤一旦发生，便会延长治疗时间，增加患者痛苦，加重家庭的经济和精神负担，导致医疗资源的浪费。其中2期压力性损伤是关键时期，若不及时进行有效的处理则会进一步发展到3、4期，程度加重，创面难以愈合。因此，探索积极有效的治疗2期压力性损伤的方法显得尤为重要。

压力性损伤属于慢性、难愈性创面，修复过程相对复杂，其中肉芽组织的形成处于核心地位。肉眼观察发现，在给药期间，丹参素钠不同剂量组大鼠创面出现肉芽组织，但模型组尚未出现。而且丹参素钠不同剂量组创面面积变小较模型组显著。由此说明，丹参素钠能够促进创面肉芽组织的生长，促进2期压力性损伤创面的修复及愈合。

HE染色结果发现，模型组出现大量的炎性细胞浸润。由此可知，组织在反复经历缺血再灌注损伤的过程中出现炎症反应。采用丹参素钠干预后，丹参素钠低、中、高剂量组大鼠炎症反应逐渐减轻，新生肉芽组织依次增多，表皮恢复程度逐渐变高。这说明丹参素钠具有较强的抗炎、促进损伤创面的愈合及修复作用，这与相关的研究[6-7]结论一致，并且丹参素钠剂量越高，对创面的修复作用越明显。