脂多糖和维甲酸相关孤儿受体α在胸腔积液中的含量及临床意义

杨 帆 沈 甜 龚凌雁 邱 青 王 琳 施军卫

结核性胸腔积液是肺结核的常见症状之一[1]，往往由结核性胸膜炎引起，对结核病患者危害较大。恶性胸腔积液也是临床上恶性肿瘤常见的并发症状，往往是远处转移的征象之一，通常恶性胸腔积液患者的预期寿命为3个月～12个月[2-3]。因此，临床上两者的早期鉴别对于患者获得及时有效的治疗非常重要，我们对南通市第六人民医院54例患者体内胸腔积液中的脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)和维甲酸相关孤儿受体α(Retinoid-related orphan receptor-alpha, RORα)含量进行了测定，并进行了分析，现报道如下。

对象与方法

一、一般资料

资料选取2016年2月至2017年2月收治于南通市第六人民医院ICU胸腔积液患者共54例，分为结核性胸腔积液组和恶性胸腔积液组。其中结核性胸腔积液组患者30例，男性26例，女性4例，中位年龄55岁；恶性胸腔积液组患者24例，男性21例，女性3例，中位年龄57岁。结核病患者临床诊断根据肺结核诊断与治疗指南[4]，均为临床确诊病例，恶性胸腔积液组患者最终经病理诊断证实。

二、检验方法

入院后常规行胸腔穿刺术留取胸腔积液，进行常规、生化等检查，标本在-20 ℃冰箱中保存备测。应用ELISA双抗体夹心法测定胸腔积液中LPS及RORα的含量(LPS及RORα检测试剂盒购自南京森贝伽生物科技有限公司)。

三、统计学方法

结 果

一、两组胸腔积液中LPS及RORα含量比较

结核性胸腔积液组LPS含量明显高于恶性胸腔积液组(2 027.88±539.25vs. 1 018.45±395.33，P=0.000)，见图1；结核性胸腔积液组RORα含量明显高于恶性胸腔积液组(240.87±85.38vs. 171.86±46.32，P=0.000)，见图2。

图1 两组患者胸腔积液中LPS的含量比较

图2 两组患者胸腔积液中RORA的含量比较

二、 两组患者胸腔积液中LPS含量和RORα含量的相关性比较

结核性胸腔积液组和恶性胸腔积液组患者胸腔积液中LPS含量与RORα含量均呈正相关性(R=0.631，P=0.000)，见图3。

讨 论

胸腔积液由多种疾病引起，包括肺部感染、胸膜肿瘤转移和结核性胸膜炎等[5-6]，后两者目前在临床上鉴别仍有很大难度。目前十种标志物，包括癌胚抗原(carcinoembryonic antigen, CEA)、腺苷脱氨酶(adenosine deaminase)、C-反应性蛋白(C-reactive protein, CRP)及乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase)等已用于鉴别胸腔积液的性质[6-18]，但其敏感性和特异性均不理想。尽管有有大宗病例报道，腺苷脱氨酶水平>35 U/ml对结核性胸腔积液诊断的敏感性和特异性分别为93%和90%[19]，也有报道对于胸腔积液中腺苷脱氨酶水平> 40 U/ml，诊断结核性胸膜炎的敏感性和特异性分别为80.3%～100%和60%～100%[13]。此外，有研究显示在结核性胸腔积液中干扰素水平升高，通过荟萃分析显示，干扰素诊断结核性胸腔积液的平均敏感性和特异性分别为89.0%和97.0%[20]。在胸腔积液的鉴别诊断中，癌胚抗原对于恶性胸腔积液诊断的特异性为100.0%，但敏感性小于30.0%。由于上述标记物在诊断结核性胸腔积液中表现出来的低灵敏度和高变异性，因此，它们的临床应用相对有限，因而，寻找适用于胸腔积液鉴别诊断的有效生物标志物是非常重要的。

图3 两组患者胸腔积液中LPS和RORα的含量相关性比较

LPS是革兰氏阴性细菌的细胞壁组成成分，机体在受到革兰氏阴性细菌感染时，LPS是革兰氏阴性细菌主要的致病成分。胸腔积液中的LPS参与到肺结核局部免疫反应和炎症发生，本文发现，结核性胸腔积液中LPS含量明显高于恶性胸腔积液，证实了上述观点。有研究发现，RORα基因敲除的小鼠对卵白蛋白诱导的肺部炎症不易感，过敏反应受到明显抑制[21]。同时，有文献报道结核性胸腔积液中RORα mRNA水平明显高于非结核性胸腔积液[22]，本文结果文献报告相一致相符。因此，我们考虑LPS和RORα含量的差异可能是各种疾病不同的发病机制所造成的。

结核性胸腔积液主要的发病机制是迟发型超敏反应，炎症导致胸膜血管通透性增加，致使大量蛋白质和淋巴细胞进入胸腔积液[23]。在此过程中，多种T细胞亚群(T cell, TC)参与到免疫应答，包括辅助性TC-1，辅助性TC-2，辅助性TC-9，辅助性TC-17和辅助性TC-22，其分泌白介素-2(interleukin-2, IL-2)，IL-4，IL-6，IL-10，IL-17，IL-22，IL-27等多种细胞因子[24-27]。在此基础上，我们发现LPS和RORα存在一定的相关性，推测可能存在LPS诱导机体产生RORα的机制，这需要实验进一步证实。

在本研究中，结核性胸腔积液中的LPS、RORα含量明显高于恶性胸腔积液组，且两者存在一定的相关性，我们考虑LPS与RORα可能是鉴别结核性胸腔积液与恶性胸腔积液的潜在生物标志物。