益胆汤防治胆囊胆固醇结石作用机制及SCF/c-Kit信号通路分析

何守敏 王守铭 吴大庆 丁小凤 傅军 王梽 郑清盛

【摘要】 目的：探讨益胆汤防治胆囊胆固醇结石作用机制，分析SCF/c-Kit信号通路。方法：将60只豚鼠随机均等分为A、B、C三组。其中A组行常规饲料饲养，B组给予含高胆固醇的饲料进行饲养，C组行高胆固醇的饲料+益胆汤饲养。喂养6周后处死豚鼠以检测胆固醇结石生成情况。同时行Western blot法、RT-PCR法对小鼠胆组织中的c-Kit及SCF的含量进行检测。结果：A组成石率低于C组，且两组均低于B组（P<0.05）;B组胆固醇浓度及胆汁酸浓度高于C组，且两组均高于A组（P<0.05），A组致石指数与C组较为一致，均显著低于B组（P<0.05）;B组与A组豚鼠组织中，其c-Kit与SCF及GAPDH基因有效扩增，B组c-Kit与SCF的mRNA的表达明显低于A组（P<0.05）。而C组在c-Kit与SCF蛋白表达上明显高于B组，且均低于A组（P<0.05）。结论：益胆汤能够有效提高豚鼠体内SCF/c-Kit的表达，防治胆囊胆固醇结石效果较好。

【关键词】 益胆汤 胆囊胆固醇结石 SCF/c-Kit信号通路

[Abstract] Objective： To study the prevention and treatment of gallbladder cholesterol calculus mechanism beneficial gall soup， analysis of SCF/c-Kit signaling pathways. Method： The equality of 60 guinea pigs were randomly divided into A， B， C three groups. The number control line of conventional breeding， group B was given feed containing high levels of cholesterol in breeding， feed line high cholesterol group C + breeding benefit bile soup. Six weeks after feeding guinea pigs were executed to detect cholesterol calculus formation. Line and Western blot method， PT-PCR method for small dept c-Kit and SCF levels in the organization for testing. Result： The composition of A stone rate was lower than that of group C， and the two groups were lower than that of group B （P<0.05）. Cholesterol and bile acid concentrations higher than group B， group C and two groups were higher than group A （P<0.05）， group A and C of stone index were more consistent and significantly lower than that of group B （P<0.05）. Group B and group A guinea pig in the organization， its c-Kit and SCF and GAPDH gene amplification effectively， the result shows， group B c-Kit with SCF mRNA expression were significantly lower than the control group （P<0.05）. While C-Kit and SCF protein expression in group C were significantly higher in group B， and were lower than that of group A （P<0.05）. Conclusion： The beneficial gall soup can effectively improve the expression of SCF/c-Kit in guinea pigs， the effect of prevention and treatment of gallbladder cholesterol calculus.

[Key words] Yidan Decoction Gallbladder cholesterol stone SCF/c-Kit signaling pathway

First-authors address： Peoples Hospital Affiliated to Fujian University of Traditional Chinese Medicine， Fuzhou 350001， China

胫骨创伤后骨髓炎骨缺损是由于创伤所引发的骨组织感染，特别是在青壮年群体中的发生率较高，已成为一个严重影响患者健康和生活质量的公共卫生问题[1-2]。当前胫骨创伤后骨髓炎骨缺损治疗主要以手术为主，不同的手术治疗方案对患者的术后恢复及临床疗效均存在一定的差异性[3]。据相关资料显示，给予患者适宜的手术方案对其治疗具有积极影响，但目前临床上关于患者具体的手术方案仍待探讨[4-5]。因此，笔者特选取笔者所在医院就诊的100例胫骨创伤后骨髓炎骨缺损患者展开随机对照研究，对患者进行不同的手术治疗，主要探讨Ilizarov環形外固定与传统清创内固定治疗胫骨创伤后骨髓炎骨缺损的有效性及安全性，并为临床选择适当治疗方法提供依据，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

将2015年11月-2017年11月诊治的100例胫骨创伤后骨髓炎骨缺损患者作为研究对象。纳入标准：（1）患者经临床检查均符合胫骨创伤后骨髓炎骨缺损相关诊断标准[6];（2）结合病史、实验室检查和影像学表现等即可明确诊断;（3）年龄25～60岁，性别不限。退出标准：（1）存在严重内科疾病、恶性肿瘤以及慢性传染性疾病者;（2）伴有近关节的骨缺损者;（3）意识模糊者;（4）有糖尿病及手术禁忌证者。采用随机数字表法分为对照组50例和观察组50例。对照组：男31例，女19例;年龄27～60岁，平均（45.31±2.42）岁;致伤原因：交通事故伤20例，坠落伤16例，其他14例。观察组：男30例，女20例;年龄28～55岁，平均（45.97±2.65）岁;致伤原因：交通事故伤19例，坠落伤18例，其他13例。两组患者一般资料比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法

首先所有患者均采用硬膜外麻醉，仰卧位，规范消毒并铺巾。

对照组行传统清创内固定治疗。首先取出原内置物，清除坏死组织。以骨刀凿除骨面贴附的骨痂及炎性纤维，拆除内固定，彻底清创后，改为骨外固定架固定，骨髓腔置入冲洗引流管，缝合切口，处理创面，术毕。

观察组行Ilizarov环形外固定技术进行治疗。术前7 d内需进行细菌培养及抗生素的药敏试验，同时还需以抗生素药物进行预防性治疗。彻底冲洗病灶部位并对硬化骨质及断端疤痕组织等病变部位进行彻底清除，清创后，安装Ilizarov环形外固定器，固定时采用3～6枚直径2.5 mm的全针及1～3枚直径4.5 mm的半针，调整恢复患者的肢体长度。穿针时注意选用肌间隙，以避开血管神经。手术全程遵循Ilizarov技术原则，根据通道穿针、术中DR透视机确认穿针位置。根据病灶位置和骨缺损部位不同，截骨线与穿针部位应相距至少1 cm。单节段截骨时采用微创闭合钻孔截骨器，轻微扭转Ilizarov外固定器以确定骨质是否完全离断，完全离断后拉张钢针，处理创面，术毕。术后继续使用抗生素治疗10 d，患者切口预后可指导膝关节及踝关节进行系统的功能锻炼，并定期行X线检查。

1.3 观察指标及评价标准

（1）术后相关指标：骨延长区域矿化时间、骨延长长度、带架时间、愈合指数。其中骨延长区域矿化时间是指骨延长至预定长度后开始，每4周拍1次X线片，观察到延长段骨矿化与两端骨密度相似，且延长段出现连续骨皮质时间;骨延长长度采用X线片观察患肢与健肢长度差;愈合指数为获得1 cm骨延长所需要的治疗天数，即愈合指数=总治疗天数（d）/获得的骨延长长度（cm）。（2）观察两组治疗前后下肢功能：按照踝关节骨折复位放射学评价标准，对膝关节和踝关节可活动度进行评分，分值越高则恢复越好。（3）记录治疗期间有无再发骨折、外固定支架松动、术后下肢感觉及跟腱挛缩等并发症发生情况。

1.4 统计学处理

本研究数据采用SPSS 24.0统计学软件进行分析和处理，术后疗效指标等计量资料以（x±s）表示，采用t检验，安全性等计数资料以率（%）表示，采用字2检验，按α=0.05为检验水准，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 术后相关指标

观察组骨延长区域矿化时间、骨延长长度、带架时间、愈合指数均优于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05），见表1。

2.2 下肢功能评分

治疗前，两组下肢功能各指标比较，差异均无统计学意义（P>0.05）;治疗后，观察组的膝关节和踝关节功能评分均明显高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05），见表2。

2.3 安全性

观察组总并发症发生率明显低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05），见表3。

3 讨论

随着近年来交通、建筑事业的飞速发展，由直接暴力、间接暴力、高能量撞击等因素导致的创伤性胫腓骨骨折且合并严重软组织缺损的发生率逐年递增，且多为开放性骨折类型，应而患者的大段胫腓骨极易污染导致慢性骨髓炎伴皮肤软组织坏死，临床治疗难度较大，严重影响患者的生活质量及身心健康[7-8]。因此，对胫骨创伤后骨髓炎骨缺损治疗选择合适的手术方案颇为关键。

笔者采用Ilizarov环形外固定与传统清创内固定治疗胫骨创伤后骨髓炎骨缺损的疗效和安全性进行比较。现代医学治疗胫骨创伤后骨髓炎骨缺损清除坏死病灶是有效治疗此病的前提条件，传统清创内固定是经反复多次手术将创面内感染控制后再行植骨以促进骨端愈合，但临床治疗周期长、存在较高的感染复发率[9]。因此，胫骨创伤后骨髓炎骨缺损的治疗是临床医生面临的一项难题。除长期应用抗生素外，手术治疗是主要的措施[10]。Ilizarov环形外固定器为难治性骨髓炎骨缺损提供了一种全新的治疗方式，对于许多难治性小腿胫骨骨髓炎、骨缺损病例的治疗打开了一种全新的局面。自1951年苏联伊里扎洛夫首次介绍Ilizarov环形外固定器以来，Ilizarov环形外固定技术在骨科创伤、骨病、先天性畸形等疾病的治疗中广泛应用，是骨科领域里一个新的里程碑[11-12]。本文结果显示：观察组的骨延长区域矿化时间、骨延长长度、带架时间及愈合指数均优于对照组，说明通过Ilizarov环形外固定技术治疗效果良好，因其手术创伤小，对局部血运影响小，受局部皮肤及软组织的条件限制也较小，手术操作简单，肢体延长是牵拉性组织再生的过程，考虑到神经、血管、肌肉等软组织对牵拉速度的顺应性反应，以避免软组织张力增加引起的不良反应，过快的延长会导致神经、血管牵拉伤;而且一定程度的负重及关节功能锻炼能够促进骨的生长愈合。另外从下肢功能评分结果来看，经过治疗后患者的膝关节、踝关节功能评分均较治疗前显著增加，说明应用Ilizarov环形外固定器能帮助患者早期离床活动，减少痛苦，减轻关节的强直，以提高疗效;除此之外，从本文并发症结果看出，观察组的再发骨折、外固定支架松动、术后下肢感觉及跟腱挛缩总发生率均低于采用傳统清创固定方法的对照组，由此表明，对患者采取Ilizarov环形外固定器有助于减少并发症，提高安全性，更易被患者所接受。

综上所述，Ilizarov环形外固定与传统清创内固定治疗胫骨创伤后骨髓炎骨缺损患者中各有其优势，但后者临床疗效更显著，不仅有效缩短骨延长区域矿化时间和带架时间，术后并发症发生率低等优点，可作为胫骨创伤后骨髓炎骨缺损的理想方法。

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（收稿日期：2019-06-10） （本文编辑：郎序莹）