全自动酶联免疫分析仪与手工酶联免疫法检测结果的一致性

孙立慧

天津市滨海新区大港医院检验科 (天津 300270)

医疗技术的不断发展使得临床检测的标本大量增加，为适应这一需求，临床标本的检测均采用自动化程序化检测仪器。全自动酶联免疫分析仪逐渐代替手工检测，越来越多的检验科免疫室将全自动酶联免疫分析仪作为手工酶联免疫检测的辅助仪器[1]。但全自动酶联免疫分析仪加样系统采用的是非一次性Tef-lon涂层钢针，易造成拖带污染，对检测结果的准确性造成一定影响。本研究采用全自动酶联免疫分析仪与手工酶联免疫法对血清标本进行检测，分析检测符合率，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2017年8月至2018年9月我院收治的患者80例，男49例，女31例；年龄25～75岁，平均(48.87±6.14)岁。本研究经医院医学伦理委员会批准，患者均知晓研究详情，并签署知情同意书，女性入选者未处于妊娠期或哺乳期，均未患有血液系统疾病。

1.2 仪器与试剂

仪器：全自动酶联免疫分析仪(瑞士TECAN公司生产，型号为Tecan Freedom Evolyzer-2200)；酶标仪RT2100c(郑州南北仪器设备有限公司生产)；W5000洗板机(天美科学仪器有限公司生产)。

试剂：甲型肝炎病毒抗体检测试剂盒，上海科华生物工程股份有限公司提供，生产批号201608142；乙型肝炎病毒5项诊断试剂盒，北京万泰药业有限公司生产，生产批号201709212；人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒，上海科华生物工程股份有限公司生产，生产批号201610161；丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒，英科新创科技公司，生产批号2016102617；戊型肝炎2项诊断试剂盒，北京万泰生物药业股份有限公司，生产批号EG20160101；梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒，北京万泰生物药业股份有限公司，生产批号N20161017。

1.3 方法

清晨空腹状态下抽取5 ml静脉血，3 500 r/min离心后取上层血清备测，分别采用手工酶联免疫法和全自动酶联免疫分析仪进行检测，自动酶联免疫分析仪操作程序严格按试剂说明书设置，设置检测参数。手工检测由操作熟练工作人员进行，并严格按照试剂说明书进行，确保检测质量。观察检测结果。

1.4 临床评价

观察80例患者标本经手工酶联免疫法与全自动酶联免疫分析仪检测的11项指标符合率。

2 结果

全自动酶联免疫分析仪检测的80例患者标本与手工酶联免疫法对照，11项检测结果符合率为96.59%。见表1。

3 讨论

手工酶联免疫法主要通过酶标记显色检测抗体或抗原是否存在的试验，特异度和灵敏度较高，且易于操作，成本低廉，是临床重要的检测方法之一，在医学检验领域应用广泛[2]。手工酶联免疫法检测时，若检测批次中不同反应孔试剂标本分配量、分配时间不一致，试剂反应温度、温育时间不同，可影响试剂盒检测水平，从而造成检测误差。手工酶联免疫法检测的相关操作由操作者遵循仪器和设备的说明完近年来，随着免疫检测仪器的不断更新，全自动酶联免疫分析仪通过自动化酶联免疫吸附试验，增强不同反应孔试验条件的一致性，在标本识别、加样全过程中采用全自动条码识别管理，温育、洗板、测定通过软件控制，可以避免人为误差，最大限度减少假阴性、假阳性的发生，从而提高检测水平。同时，自动化的操作也可减轻实验室人员工作压力。

表1 80例患者标本手工酶联免疫法与全自动酶联免疫分析仪的测定结果对照

注：HEV-IgG=戊型肝炎病毒IgG；HAV-IgM=甲型肝炎病毒IgM；HEV-IgM=戊型肝炎病毒IgM；HBeAb=乙型肝炎e抗体；HBcAg=乙型肝炎核心抗原；HIV=人类免疫缺陷病毒；TP=梅毒螺旋体；HCV=丙型肝炎病毒；HBsAg=乙型肝炎表面抗原；HBsAb=乙型肝炎表面抗体；HBcAb=乙型肝炎核心抗体成，但操作过程中若与阳性血清直接接触，可造成交叉感染，由此可见，手工操作误差较大，精密度不高，某一细节顾及不到易造成检测结果出现假阴性、假阳性[3]。

本研究采用全自动酶联免疫仪检测结果显示，全自动酶联免疫仪假阴性检出率较低，与临床研究相似[4]。原因可能在于相较于人工操作，温育温度较为恒定，时间较为固定，在封闭环境下完成，且标准性与规范性较高，可降低交叉感染的可能性。全自动酶联免疫仪试剂的洗板均一、加样量准确，可确保样本检测质量[5]。本研究结果显示，两种检测方法的检测结果符合率高，提示全自动酶联免疫分析仪精密度高，重复性好，可代替手工酶联免疫法。但全自动酶联免疫分析仪临床操作过程中对工作人员要求较高，检验人员应熟悉仪器原理及性能，掌握日常保养方法，并严格遵守试剂盒与仪器说明操作[6]。