白花蛇舌草不同提取部位抗肿瘤作用研究进展

车宏伟,杨海宁,2,谭晓川,张宇佳,郑稳生*

(1.中国医学科学院 药物研究所 药物传输技术及新型制剂北京市重点实验室,北京100050；2.安徽中医药大学,安徽 合肥230012)

中药白花蛇舌草(HDW)又叫鹤蛇草、羊须草、蛇总管、二叶律、竹叶菜等[1],始载于《广西植物志》,源于茜草科植物白花蛇舌草Hedyotis diffusa(willd).[Oldenlandiadiffusa (Willd.)Roxb]的干燥全草,其性甘寒、微苦,具有清热解毒、消痛散结、利尿除湿等作用,在中医临床常与其他药物配伍使用治疗各种癌症[2],通常与半枝莲、蒲公英成药对使用[3]。钟立敏等[4]研究表明,HDW能显著抑制四氯化碳引起的谷丙转氨酶升高,加速肝细胞损伤的恢复。

HDW含有蒽醌类、黄酮类、萜类、多糖等多种化学成分,现代药理学研究表明,其具有免疫调节、抗肿瘤、抗氧化、抗化学诱变、抗炎抗菌、保肝利胆、镇痛解毒等功效,尤其在抗肿瘤方面具有显著的效果[5],但因其具体的抗肿瘤成分不明确,多以该药的粗提部位,如水提部位、醇提部位、脂溶性提取部位等[6-7]进行活性研究。

中药抗癌在临床上历史悠久,中医认为：“难病多毒,怪病多痰。”从痰论治主要采用清热化痰,常用山慈菇、仙鹤草、白花蛇舌草,体虚而邪入即“邪不祛,正必伤”采用扶正补虚法等手段,多用麦冬、太子参、沙参等[8]。王珏等[9]研究表明中药猫眼草对人肝癌细胞HepG2有很强的抑制活性。熊燚等[10]对夏枯草提取物进行研究,其结果表明对不同病理类型的甲状腺癌细胞均有不同程度的抑制增殖作用。

近年来从中药中分离纯化得到的有效成分在生物活性方面具有明显优势,如紫杉醇、长春新碱等已成为临床常用的植物类化疗药。通过查阅参考文献了解到,HDW不同溶剂提取部位具有不同的药理活性,因此本文将HDW不同提取部位与抗肿瘤作用做一综述,为抗癌药活性成分的筛选提供目标参考。

1 脂溶性部位

脂溶性部位是通过极性较小的有机溶剂提取,挥干溶剂所得,大部分脂溶性的成分都具有很好的活性,如治疗白血病的靛玉红。

本文通过查阅文献得知,左琳[11]将HDW石油醚部位用于体外培养的人子宫内膜癌细胞,结果显示具有明显的细胞毒性,由此可以判断该药可用于子宫内膜癌的治疗。何小女等[12]建立CCl4小鼠急性肝损伤模型,通过灌胃给予HDW的乙酸乙酯部位、生理盐水做空白,检测血清中ALT和T-Bil的含量,结果表明乙酸乙脂萃取部位大剂量组效果最明显,提示HDW乙酸乙脂部位能有效地减轻肝细胞的损伤程度,维持肝细胞结构和功能的完整性,抑制肝脏受损。

许海顺等[13]研究表明HDW乙酸乙酯部位、正丁醇部位均具有抗氧化、DPPH自由基清除能力,其中正丁醇部位抗氧化能力最强,且呈现出浓度依赖关系。

2 水提部位

现代药理试验证实HDW水提取物有良好的抑制肿瘤作用[14],曾永长等[15]发现水提部位主要含有多糖、寡糖、寡肽、对香豆酸等成分,其作用机制可能是直接抑制肿瘤生长或调节机体免疫从而实现抗肿瘤作用。陈秀珍[16]通过考察HDW水提部位对CEM细胞生长的行为来推测其作用机制,结果显示HDW水提部位具有显著抑制作用。孟繁钦等[17]通过体外抗肿瘤实验研究,发现HDW粗多糖对人肝癌SMMC-7721细胞与胃癌SGC-7901细胞均具有良好的抑制增殖作用。杨培民等[18]研究表明,HDW水提多糖可抑制体外培养人宫颈癌Hela细胞和肝癌Bel-7402细胞的生长。

朱大诚等[19-20]通过MTT实验表明HDW水部位,对白血病多药耐药细胞株CEM/VCR有显著的生长抑制作用,且与用药剂量、用药时间具有依赖性,随药物作用时间延长或用药剂量的增长,其抑制率增大,表明HDW水提物能够抑制白血病CEM细胞生长,其作用机制可能与P53基因高表达呈正相关,从而促进白血病CEM细胞凋亡。孟庆宇等[21]研究发现,HDW多糖可明显抑癌基因mRNA表达,降低bcl-xl促凋亡基因m RNA表达,从而抑制人肝癌Bel7402细胞的生长。陈玉等[22]研究表明HDW总多糖对S180荷瘤小鼠具有较强的抗肿瘤作用。朱大诚等[23-24]研究表明HDW水提物药物浓度在0.005 μg/m L作用于48

h后能明显抑制K562细胞的生长,并且对多药耐药细胞HL-60/ADR的生长具有极强的抑制作用。付丹丹等[25]对HDW粉末进行水煎煮得到提取液,结果表明提取液能够抑制乳腺癌细胞MCF-7增殖,对正常的乳腺上皮细胞MCF-10A无影响,因此临床可以用于治疗乳腺癌。

3 醇提部位

林久茂等[26]采用85%乙醇对HDW进行提取,获得的提取部位能显著抑制大肠癌HCT-8/5-Fu细胞的活力及细胞迁移、黏附的作用,明显抑制ABCG2的mRNA表达。徐丹等[27]采用70%乙醇回流和石油醚脱色两种不同的提取方法,按照溶剂极性由低到高萃取得到石油醚、乙酸乙酯和正丁醇提取物,所得样品用比色法检测其抗5-LOX活性。最终发现脱色后的白花蛇舌草抗5-LOX活性较好,抗炎主要活性在乙酸乙酯部位,抑制率为66.98%,结果表明,HDW乙酸乙酯部位可作为抗炎药物筛选部位。

吕昕等[28]以95%乙醇制备的HDW提取物结果,表明其在体外具有较好的抑制人体肺腺肿瘤细胞增殖的作用。靳祎祎等[29]探讨HDW乙醇提取物对大肠癌耐药裸鼠移植瘤生长的影响及其分子机制,结果表明其醇提物可以抑制大肠癌耐药裸鼠抑制瘤的生长,在体内对大肠癌耐药移植瘤具有显著抑制作用,其机制可能与调控大肠癌耐药细胞的增殖相关基因表达有关。

叶榕等[30]研究表明HDW乙醇提取物能抑制人结肠癌HT-29细胞增殖及Hedgehog信号的传导。张林超等[31]考察了不同剂量组HDW 80%乙醇提取物,对人肾癌786-0细胞体外生长及体内成瘤的影响,结果表明各剂量组均对人肾癌786-0细胞起到明显的抑制作用。肖云等[32]研究表明小鼠口服给药HDW乙醇提取物,在一定剂量范围内,对小鼠CT26结直肠癌有明显地抑制作用,能减缓小鼠结直肠癌移植瘤的生长,推测其作用机制可能通过抑制肿瘤血管生成而发挥抗肿瘤作用。

李涛等[33]采用打孔法和滴注法考察了白花蛇舌草的95%乙醇提取物对革兰阳性菌和革兰阴性菌有一定的抑制效果,发现随着提取物浓度的增加,其抑菌效果显著增强,尤其对绿脓杆菌的抑菌效果最强,大肠杆菌次之,对镰刀菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果较差,表明HDW抗革兰阴性杆菌的医学应用前景良好。

王宇翎等[34]发现HDW总黄酮对球菌和杆菌均具有不同程度抑菌和杀菌作用,且对球菌的作用优于杆菌。李明[35]通过研究多糖类化合物对游泳小鼠的抗疲劳作用,证实了白花蛇舌草多糖能显著提高肌糖原和肝糖原的贮存,提高血清中SOD水平并降低MDA水平,显著延长了游泳小鼠的游泳时间。

邓凤芸等[36]采用85%乙醇提取了不同浓度的白花蛇舌草提取物,并用该提取物对体外结肠癌HT-29细胞株、结肠癌HCT116细胞株进行抑制实验,对比分析不同浓度的提取物对细胞株的影响,结果显示不同浓度的提取物均可抑制细胞株的增殖,起到了体外抗肿瘤作用。

4 讨论

通过分析文献可知,大部分从HDW的脂溶性部位、水提部位和醇提部位三方面进行研究,结果表明三者均具有不同的抗肿瘤活性及临床应用,其中乙醇提取物抗肿瘤效果远远好于水提取物[37]。刘汝青等[38]通过比较了不同的HDW提取物(水溶性提取物、脂溶性提取物和粗多糖)对鼻咽癌细胞株CNE1的细胞毒性,结果表明,HDW不同提取物均有较好的抗鼻咽癌细胞株CNE1的作用,其中脂溶性提取物抗鼻咽癌作用最强。

表1 不同提取部位及抗肿瘤情况

通过以上可知,HDW不同提取部位具有广谱抗癌性,不同溶剂提取部位有特定的抗癌类型(见表1),其中水提取抗癌类型较醇提部位和脂溶性多,并且水提多糖可用于宫颈癌、肝癌的治疗。白花蛇舌草作为常用抗癌药物不仅在临床应用历史悠久,而且较其他植物资源地理分布广泛充足。目前,HDW抗癌成分的分析研究还处于初级阶段,临床常用抗癌药大部分为合成化学药物,其副作用大,患者难以接受,因此,对纯天然植物提取、分离、制备开发副作用小、成本低廉的肿瘤抑制剂尤为重要。本文通过对白花蛇草不同部位的抗癌活性作用进行整理总结,为不同肿瘤抑制剂的活性成分筛选提供依据。