46%硝磺·异甲·莠可分散油悬浮剂的高效液相色谱分析

郭菲菲

（天津绿源生物药业有限公司，天津300270）

硝磺草酮是一种能够抑制羟基苯基丙酮酸酯双氧化酶(HPPD)的芽前和苗后广谱选择性除草剂，可有效防治主要的阔叶草和一些禾本科杂草。其分析条件可以采用液相色谱分析[1]。异丙甲草胺是一种广谱性播后苗前除草剂。可有效的防除一年生禾本科杂草及部分双子叶杂草。其分析条件可以采用液相色谱分析。莠去津是玉米田中使用多年的三氯苯类除草剂，可防除多种一年生阔叶杂草[2]。其分析条件可以采用液相色谱分析。硝磺草酮、异丙甲草胺和莠去津复配制剂防效明显高于单剂，可有效防治玉米田中一年生阔叶杂草杂草和禾本科杂草，具有速度快、杀草谱广等特点[2]，目前关于46%硝磺·异甲·莠可分散油悬浮剂产品的高效液相色谱的分析方法还未见文献报道。本文采用高效液相色谱法对其进行分析，方法操作简便、分析速度快，精密度和准确度均符合分析要求，可以满足常规分析和生产中的质量控制。

1 试验部分

1.1 试剂和仪器

乙腈：色谱级；冰乙酸：分析纯；水：新蒸二次蒸馏水；硝磺草酮标准品：已知含量≥95.0%，沈阳化工研究院；异丙甲草胺标准品：已知含量≥96.0%，上海农药研究所；莠去津标准品：已知含量≥97.0%，北京勤诚亦信科技开发有限公司。

高效液相色谱仪（P-1010）：具有可变波长紫外检测器；色谱数据处理机；色谱柱：250 mm×4.6 mm（i.d.）不锈钢；内装C18、5μm填充物，超声波清洗器；分析天平（梅特勒ME204E）；过滤器：为0.45μm；微量注射器：50μL；定量进样器：20μL。

1.2 色谱操作条件

流动相为（乙腈）：（水）：（冰乙酸）=60：40：0.1经滤膜过滤，并进行脱气；流速：0.8 mL/min；柱温：室温；检测波长：208 nm；进样体积：20 μL；保留时间：硝磺草酮约为3.8 min，莠去津约为6.2 min，异丙甲草胺约为13.8 min。硝磺草酮、莠去津和异丙甲草胺的高效液相色谱图见图1、2。外标法计算。

1.3 测定步骤

1.3.1 标样溶液的配制

a）准确称取硝磺草酮标样0.06 g（精确至0.0002 g）置于100 mL容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀备用。

b）莠去津标样0.1 g（精确至0.0002 g），异丙甲草胺标样0.1 g（精确至0.0002 g），置于50 mL容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀。用移液管各移取上述两种溶液5mL置于另一个50mL容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀。进样前用0.45μm过滤器过滤。

图1 硝磺草酮、莠去津和异丙甲草胺标样高效液相色谱图

图2 46%硝磺·异甲·莠可分散油悬浮剂的典型高效液相色谱图

1.3.2 试样溶液的制备

准确称取试样约0.5 g（精确至0.0002 g），置于50mL容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀。用移液管移取此溶液5mL置于另一个50mL容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀。进样前用0.45μm过滤器过滤。

1.3.3 测定

在上述操作条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标样溶液，计算各针相对响应值的重复性，待相邻两针的相对响应值变化不大于1.5%时，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序测定。

1.3.4 计算

试样中莠去津或异丙甲草胺的质量分数w1（%）计算，硝磺草酮的质量分数w2（%）计算：

式中：

A1——标样溶液中异丙甲草胺（或莠去津）的峰面积的平均值；

A2——试样溶液中异丙甲草胺（或莠去津）的峰面积的平均值；

A3——标样溶液中硝磺草酮峰面积的平均值；

A4——试样溶液中硝磺草酮峰面积的平均值；

m1——标样的质量，单位为g；

m2——试样的质量，单位为g；

w——标样中硝磺草酮（或异丙甲草胺或莠去津）的质量分数，以%表示；

2 结果与讨论

2.1 流动相比例的选择

为了实现硝磺草酮、莠去津、异丙甲草胺的有效分离，先后试验了（乙腈）：（水）：（冰乙酸）=60：40：0.1、（乙腈）：（水）：（冰乙酸）=80：20：0.1、（甲醇）：（水）：（冰乙酸）=60：40：0.1的多种流动相配比进行反复试验，最后确定（乙腈）：（水）：（冰乙酸）=60：40：0.1、为试验的流动相。硝磺草酮、莠去津和异丙甲草胺分离效果好，峰型对称，保留时间适中，可以满足分析要求[3]。

2.2 波长的选择

在190～310nm波长范围内对试样进行紫外扫描，发现208nm作为检测波长时，硝磺草酮、莠去津和异丙甲草胺具有较强吸收，最终选择208nm作为检测波长[3]。

2.3 方法的线性关系测定

图3 46%硝磺·异甲·莠可分散油悬浮济中硝磺草酮线性关系曲线

线性关系是称取不同量的标样（5组）稀释至相同的体积进行分析，得到响应值，以质量浓度为横坐标，与其相应的峰面积为纵坐标，绘制线性关系曲线（见图3、4、5）。得到硝磺草酮在0.63～5.47mg/50 mL的质量浓度内有良好的线性关系，其回归方程为y=5.4131x-0.1817，R2=0.9999；莠去津在2.15～17.90 mg/50 mL的质量浓度内有良好的线性关系，其回归方程为y=6.4982x-0.7514，R2=0.9999；异丙甲草胺在2.08～18.12 mg/50 mL的质量浓度内有良好的线性关系，其回归方程为y=1.6316x-0.1066，R2=0.9998[4]。

图4 46%硝磺·异甲·莠可分散油悬浮济中莠去津线性关系曲线

图5 46%硝磺·异甲·莠可分散油悬浮济中异丙草胺线性关系曲线

2.4 方法精密度测定

选取一批46%硝磺·异甲·莠可分散油悬浮剂样品，从称样开始，按上述色谱操作条件独立平行测定8次，考察方法的精密度（见表1）3种成分的变异系数分别为1.44,0.83,0.83，可见该方法精密度较好。

2.5 方法准确度测定

称取5个已知质量分数的46%硝磺·异甲·莠可分散油悬浮剂试样，分别加入一定量的硝磺草酮、异丙甲草胺和莠去津标准品，按上述色谱操作条件的分析方法分别测定其中的硝磺草酮、异丙甲草胺和莠去津质量并计算回收率，试验数据见表2、3、4。

3 结论

通过实验表明：本方法可以同时测定46%硝磺·异甲·莠可分散油悬浮剂的3种有效成分，方法操作简单、快速、分离效果好，精密度和准确度高，符合定量分析要求，可以满足生产企业中的质量控制分析。

表1 46%硝磺·异甲·莠可分散油悬浮剂有效成分测定方法精密度试验数据

表2 46%硝磺·异甲·莠可分散油悬浮剂中硝磺草酮测定方法准确度试验数据（硝磺草酮标样质量分数98.6%，试样中硝磺草酮质量分数6.2%）

表3 46%硝磺·异甲·莠可分散油悬浮剂中异丙甲草胺测定方法准确度试验数据（异丙甲草胺标样质量分数98.8%，试样中异丙甲草胺质量分数20.1%)

表4 46%硝磺·异甲·莠可分散油悬浮剂中莠去津测定方法准确度试验数据（莠去津标样质量分数98.5%，试样中莠去津质量分数20.2%）