血清同型半胱氨酸和血浆C 反应蛋白、D-二聚体在癫痫患者中的表达水平及与服药种类的关系

郭亚培 刘恒方 张敏 石磊 赵幸娟 李建章

郑州大学第五附属医院神经内科（郑州450052）

癫痫是常见的中枢神经系统疾病，据世界卫生组织（World Health Organization，WHO）估计，全球大约有五千万癫痫患者，我国的癫痫患病率在4‰～7‰之间，据此估算，我国约有600 万左右的活动性癫痫患者，同时每年有40 万左右新发癫痫患者，癫痫患者的死亡危险性为一般人群的2～3 倍［1］。癫痫患者经过正规治疗，仍有1/3 患者不能完全控制发作，为难治性癫痫，对患者的认知、记忆、生存质量、社会心理及儿童的生长发育造成影响［2］。近年来，虽然影像学、脑电图、遗传学等诊断技术不断提高，多种新型抗癫痫药物问世，但仍存在部分活动性癫痫［3］，因此，在临床工作中，探索控制癫痫的新方法尤为重要。研究［4］发现癫痫患者存在高同型半胱氨酸（homocysteine，Hcy）血症。C 反应蛋白（C⁃reactive protein，CRP）与脑卒中、阿尔茨海默病、帕金森病有关［5-6］；D⁃二聚体（D⁃Dimer，D⁃D）与脑卒中、脑损伤、衰老、恶性肿瘤等有关［7］，血浆CRP、D⁃D 在中枢神经系统疾病中起一定作用。但三者在难治性癫痫，服用多种药物，不同脑电图表现患者血中的表达变化还没有明确，本文对该问题进行统计分析，并探讨其在该疾病中的作用，期待寻找难治性癫痫诊治的新方法。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集2015年1月至2017年6月在郑州大学第五附属医院神经内科门诊就诊及住院的难治性癫痫患者（IE 组）37 例，其中男20 例，女17 例，其中脑电图正常组4 例，脑电图轻度异常组11 例，脑电图中度异常组12 例，脑电图重度异常10 例，其中服用2 种抗癫痫药物8 例，服用3 种抗癫痫药物15 例，正在调整用药种类14 例。抗癫痫药物控制良好（NE 组）患者52 例，男28 例，女24例，其中脑电图正常组36 例，脑电图轻度异常组10 例，脑电图中度异常组6 例，其中服用1 种抗癫痫药物29 例，服用2 种抗癫痫药物13 例，调整用药种类4 例，未规律服药6 例。另选择52 例性别相匹配的体检患者（对照组），其中男28 例，女24 例。3 组的年龄、性别等资料相比，差异无统计学意义（P＜0.05）。

纳入标准：长期在郑州或周边城市，知情同意，愿意接受随访者。排除标准：（1）有严重脏器功能衰竭患者，包括心、肝、肾功能不全者；（2）有甲状腺功能障碍、肿瘤、严重胃肠道疾病、精神疾病及其他代谢性疾病者；（3）同时服用利尿剂等影响血清Hcy 水平的药物者；（4）炎症疾病、血栓性疾病等可能影响CRP 及D⁃D 结果。

1.2 方法

1.2.1 血清Hcy 和血浆CRP、D⁃D 检测 收集入组患者晨起空腹外周静脉血3～5 mL，血清Hcy 检测采用奥林巴斯生化分析仪及台塑生医试剂盒，血浆CRP 测定采用上海奥普生物有限公司的试剂盒，用胶体金法，血浆D⁃D 测定采用德国罗氏公司提供的试剂盒，用免疫比浊法，所有测定严格按照说明书执行。

1.2.2 脑电图检查 采用16 导数字化无纸记录脑电图仪对研究对象进行检查，依据国际10/20 系统安置头皮电极，并采用常规单极及双极导联进行描记，严格按照动态脑电图操作流程，描记包含至少1 个觉醒-睡眠周期，参考黄远桂《临床脑电图学》成人诊断标准将患者分为正常（枕区α 或β 节律为主，左右对称）、轻度异常（节律不规则或慢波增多）、中度异常（节律减慢，左右不对称，或出现局灶性δ 波等）、重度异常（广泛弥漫性慢波或周期样放电）4 组。

1.3 统计学方法 数据的整理和分析采用SPSS 19.0 统计软件，正态分布计量资料以表示，多组间差异采用单因素方差分析，P＜0.05 为差异有统计学意义。组间两两比较采用LSD 法。

2 结果

2.1 3组患者血清Hcy 和血浆CRP、D⁃D 水平比较 IE 组患者血清Hcy 和血浆CRP、D⁃D 水平均明显高于对照组和NE 组（P＜0.05），NE 组患者血清Hcy 和血浆CRP、D⁃D 水平均明显高于对照组（P＜0.05）。见表1。

表1 3 组血清Hcy 和血浆CRP、D⁃D 比较Tab.1 Comparison of the plasma CRP，D⁃D and serum Hcy within three groups±s

表1 3 组血清Hcy 和血浆CRP、D⁃D 比较Tab.1 Comparison of the plasma CRP，D⁃D and serum Hcy within three groups±s

注：与对照组比较，*P＜0.05；与NE 组比较，△P＜0.05

组别对照组NE 组IE 组P 值例数52 52 37 Hcy（μmol/L）12.73±5.25 15.97±7.81*22.36±10.08*△0.000 CRP（mg/L）1.88±1.30 3.96±2.35*5.71±3.94*△0.000 D⁃D（mg/L）0.23±0.21 0.56±0.71*1.05±1.29*△0.000

2.2 不同脑电图组癫痫患者血清Hcy和血浆CRP、D⁃D 比较 脑电图重度异常组患者血清Hcy、血浆CRP 水平均明显高于脑电图正常组及轻度、中度异常组（P＜0.05），随着脑电图异常逐渐严重，血清Hcy、血浆CRP 水平逐渐增高（P＜0.05），血浆D⁃D 在各组中的表达差异无统计学意义（P＞0.05）。见表2。

表2 癫痫患者不同脑电图组血清Hcy 和血浆CRP、D⁃D 比较Tab.2 Comparison of plasma CRP，D⁃D and serum Hcy in different EEG groups of patients with epilepsy ±s

表2 癫痫患者不同脑电图组血清Hcy 和血浆CRP、D⁃D 比较Tab.2 Comparison of plasma CRP，D⁃D and serum Hcy in different EEG groups of patients with epilepsy ±s

注：与正常组比较，*P＜0.05；与轻度异常组比较，#P＜0.05；与中度异常组比较，△P＜0.05

脑电图结果正常轻度异常中度异常重度异常P 值例数40 21 18 10 Hcy（μmol/L）13.34±4.31 17.62±7.97*22.93±11.18*#29.92±11.76*#△0.000 CRP（mg/L）3.11±1.56 4.61±2.71*6.33±3.46*#9.55±3.73*#△0.000 D⁃D（mg/L）0.52±0.62 0.57±0.39 0.65±0.44 0.68±0.69 0.79

2.3 不同种类用药组患者血清Hcy 和血浆CRP、D⁃D 水平比较 3 种用药组患者血清Hcy 明显高于1 种和2 种用药组（P＜0.05），2 种用药组患者血清Hcy 高于1 种用药组（P＜0.05），3 种、2 种、1 种用药组血浆CRP 及D⁃D 结果差异无统计学意义（P＞0.05），见表3。

表3 3 组不同用药种类血清Hcy，血浆CRP，D⁃D 比较Tab.3 Comparison of plasma CRP，D⁃D and serum Hcy among groups of three different antiepileptic drugs ±s

表3 3 组不同用药种类血清Hcy，血浆CRP，D⁃D 比较Tab.3 Comparison of plasma CRP，D⁃D and serum Hcy among groups of three different antiepileptic drugs ±s

注：与1 种用药组比较，*P＜0.05；与2 种用药组比较，#P＜0.05。IE 组正在调整用药种类14 例，NE 组调整用药种类4 例，未规律服药6 例

用药种类1 种2 种3 种P 值例数29 21 15 Hcy（μmol/L）14.23±3.18 19.01±6.41*25.00±9.70*#0.000 CRP（mg/L）3.42±1.95 3.92±2.25 5.01±3.88 0.089 D⁃D（mg/L）0.46±0.60 0.58±0.58 0.91±0.79 0.164

3 讨论

癫痫是一种常见病，研究表明约10%的人一生中有一次以上的痫性发作，在癫痫人群中约20%～30%的癫痫药物治疗效果差，为难治性癫痫［8］。脑血管疾病、颅脑外伤、脑肿瘤、脑炎、皮质发育不良等为难治性癫痫的重要病因［9］，在儿科疾病中West 综合征、Lennox⁃Gastaut 综合征、结节性硬化等只要确诊即为难治性癫痫［10］。近年来研究发现［11-12］，多种因子与癫痫的发生、发展有关。如白细胞介素1β、白细胞介素6、白细胞介素2、肿瘤坏死因子α、干扰素γ、趋化因子及转化生长因子β、前列环素等。

血清Hcy 和血浆D⁃D、CRP 是临床工作中常用的检测指标。本研究对这些指标进行统计分析，发现难治性癫痫血清Hcy 和血浆D⁃D、CRP 水平高于控制良好癫痫患者，癫痫患者上述指标高于正常人。随患者脑电图逐渐严重，癫痫患者血清Hcy、血浆CRP 水平逐渐升高，而血浆D⁃D 无明显变化。随应用抗癫痫药物种类增多，癫痫患者血清Hcy 水平升高，而血浆CRP、D⁃D 无明显变化。

正常情况下，Hcy 在体内被分解代谢，处于低浓度。传统抗癫痫药物如卡马西平、苯妥英钠等均可通过肝酶诱导作用促使叶酸代谢增加，从而升高Hcy 水平，血中Hcy 水平提高可直接或间接地导致血管内皮细胞损伤，高Hcy 可削弱血管内皮细胞NO 的生物活性，到最后血管内皮损害［13-14］。Hcy 作为一种兴奋性神经递质可增加内皮细胞通透性，刺激脑内皮细胞神经传导，在癫痫发作中起推动作用［15］。动物实验表明给小鼠注射Hcy，可导致癫痫发作及增加癫痫发作的程度和次数，揭示有致惊厥作用［16］。严重的高Hcy 血症可引起癫痫发作，增加癫痫发作次数和程度，减弱患者对抗癫痫药物的反应性，增加抗癫痫治疗的难度，增加难治性癫痫的发生［17］。本研究与以上观点相一致，结果显示难治性癫痫组血清Hcy 高于控制良好癫痫组，揭示高Hcy 血症在癫痫的难治性中起作用。本研究发现随着脑电图异常逐渐加重，血清Hcy 逐渐增高，及多种抗癫痫药物联合应用增加血清Hcy 水平。进一步提示癫痫患者，尤其难治性癫痫患者检测Hcy 的重要性，必要时给予降Hcy 治疗，减少癫痫发作及合并心脑血管疾病风险。

炎症反应与癫痫有密不可分的关系［18］，过度炎症反应可促进癫痫发生［19］。CRP 是重要的急性期反应蛋白，正常人群在10 mg/L 以下，在炎症等多种疾病时表达升高［20］。研究［12］显示，神经递质失调、炎性反应、离子通道功能异常等均与癫痫发病有关，复杂致病机制导致癫痫治疗的困难性。但目前CRP 与癫痫关系的研究很少。本研究示癫痫患者血浆CRP 升高，难治性癫痫患者CRP 升高更加明显。推测炎症反应在癫痫反复发作中起一定作用，血浆CRP 高的患者，更可能是难治性癫痫；癫痫发作导致一定程度的自身损伤，可释放多种炎症因子。

血浆D⁃D 为体内高凝状态和纤溶亢进的特异性分子标志物，血栓在纤溶酶作用下降解成大小不规则的多态小片段，其中最简单片段降解产物为D⁃D［21-22］。D⁃D 在许多疾病中扮演着重要角色：如静脉血栓栓塞、肿瘤、弥散性血管内凝血、动脉粥样硬化、血管性痴呆等［23］。在导致癫痫发作的颅内静脉及静脉窦血栓等疾病中D⁃D 升高［24］。D⁃D 与癫痫的关系研究较少，本研究发现在难治性癫痫患者血浆D⁃D 水平明显升高，可能的机制为：脑损伤组织释放组织因子可引起凝血活性升高；颅内压升高，脑缺氧也可能通过不明原因的神经或激素源性途径激活凝血，凝血机制启动后引起继发性纤溶亢进［25］。推测癫痫发作次数频繁加重脑损伤，颅内压升高，脑缺氧等，而这些正是激活凝血途径的因素，难治性癫痫患者的血凝或纤溶系统可能存在异常；反复癫痫发作，可能造成脱水，衰竭，进一步可促使形成颅内静脉血栓，升高D⁃D 水平。

本研究的病例数较少，且为临床观察，对于不同病因的癫痫，具体服用每种抗癫痫药物患者血清Hcy，血浆D⁃D，CRP 的表达水平及临床意义有待进一步研究。