三种类型HIV抗体检测技术的方法学评价

谭建兵

【摘 要】：目的：为了了解目前艾滋病抗体诊断试剂的敏感性、特异性等性能，我们利用不同原理的艾滋病病毒抗体诊断方法进行综合评价。方法：使用基础血清盘、干扰样本血清盘、线性稀释系列血清盘、精密度血清盘、CAP血清盘、商业阳转血清盘这六种血清盘对艾滋病病毒快速检测方法、酶联免疫（ELISA方法）和化学发光免疫法（CLIA）三种方法的诊断试剂进行分析，其分析的内容主要是诊断试剂的敏感性，特异性，分析灵敏度分析，特异性以及精密度等指標。结果：我们对目前被有的六种抗体进行测试，发现ABCDEF这六种试剂在适用基础血清盘进行评估的前提下，它们的敏感性为百分之百，特异性大于97.5%。在使用商业阳转血清盘进行评价的前提下，A试剂的阳性率为18.2%，B试剂的阳性率为16.7%，C试剂的阳性率为33.3%，D试剂的阳性率为37.9%，E试剂的阳性率为19.7%，F试剂的阳性率为18.2%。结论：我们发现所有参与研究的诊断试剂当中，敏感性和特异性最高的两种试剂是快速诊断试剂以及ELISA试剂，敏感性相对较高的是抗原抗体检测试剂，但CLIA试剂法在HIV抗体中具有更好的临床价值，准确性、特异性、灵敏度均高，CLIA灵敏度相对ELISA稍高。因此，以上三种试剂可以作为抗体筛选试剂。

【关键词】：艾滋病病毒；抗体诊断试剂；抗原抗体诊断试剂；重组免疫印迹试剂；快速诊断试剂；阳转血清盘

【中图分类号】R512.91 【文献标识码】A 【文章编号】1005-0019（2019）05--02

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 血清盘：本次研究使用的六种血清盘都来自艾滋病国家参比实验室，全部是使用献血者的血样来制作的血清盘，基础血清盘是由40份阳性样本和40份阴性样本组成，本次研究使用的干扰样本血清盘是由十五个乙肝表面抗原抗体阳性样本，十五个梅毒抗体阳性样本以及十个丙型肝炎病毒抗体阳性样本组成。

1.1.2 试剂：本次研究使用的八种试剂可以分为三类，它们分别是酶联免疫吸附试验法使用的万泰人类免疫缺陷病毒1+2型号的抗体免疫试剂盒，万泰人类免疫缺陷病毒抗原抗体诊断试剂盒，丽珠人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒，Bio-Rad人类免疫缺陷病毒抗原抗体诊断试剂盒。一类是胶体法使用的雅培类免疫缺陷病毒1+2型号的抗体免疫试剂盒，万泰人类免疫缺陷病毒抗原抗体诊断试剂盒。还有一类是重组免疫印迹法使用的万泰人类免疫缺陷病毒抗原抗体诊断试剂盒。

1.1.3 仪器：安图酶标仪；恒温箱；摇床 LIAISON XL发光仪

1.2 方法 ELISA 法选用的仪器及设备为BIO-RAD 680酶标仪，MINDRAY MW-12A洗板机。CLIA 法选用LIAISON XL发光仪及其配套试剂。具体检测方法：取6 ml肘正中静脉血，放置于离心管内待凝固，于4 000 r/min条件下离心10 min，取上层清液等分成两份分别放置于两个试管采用ELISA法、CLIA 法检测，所有操作必须严格按照试剂盒说明书执行。最后采用蛋白印迹检测法确证

1.2.3 统计方法：本次研究得到的数据是使用SAS9.3软件进行统计分析，分析结果会呈现出四格表的形式。

2 结果

2.1 能力检验血清盘评价人员能力结果：进行本次研究的操作人员操作水平已经能够满足专业评价实验的要求，他们进行检验得到的结果与预期检验结果一致。

2.2 敏感性及特异性：本次研究检测的两种艾滋病病毒抗体检验试剂，两种艾滋病病毒抗原抗体检验试剂以及两种艾滋病病毒快速诊断试剂的共有40支，通过数据分析，我们发现这四十支试剂的一共有四十支药剂具有敏感性，因此其敏感性达到100%；四十支药剂有三十九支具有特异性，其特异性>97.5%在使用商业阳转血清盘进行评价的前提下，A试剂的阳性率为18.2%，B试剂的阳性率为16.7%，C试剂的阳性率为33.3%，D试剂的阳性率为37.9%，E试剂的阳性率为19.7%，F试剂的阳性率为18.2%。A-DELISA 检测试剂板内精密度值介于4.40%～24.98%之间。

2.3 分析灵敏度：我们可以通过对各种试剂的检测结果相比核酸检测结果延长天数来进行分析灵敏度的评价，其具体做法是记录各种试剂在血清盘中检测出来的首份阳性样本时间与核酸检测出来首份阳性样本采集时间之间的差异以及两个时间的比值。

2.4 板内精密性：各种试剂出现的变异系数都低于25%。

3 讨论

目前，用来检测艾滋病病毒的试剂有艾滋病病毒快速检测、CLIA、ELISA等，其中最常使用的是艾滋病病毒快速检测，因为它具有操作简单、对技术人员要求不高、成本低、操作时间短等优势。

ELISA检测试剂盒的原理是将用特定酶标记的待测抗原或抗体先固定在载体表面，然后观察酶是否与待测物发生反应。本次实验的样本有限，要想真正提高艾滋病病人治疗与健康管理方面的效果，我们还需要对他们提出更多的关怀

本次研究表明，CLIA 法和ELISA 法的HIV抗体阳性检出率、阳性预测值、特异度、灵敏度等对比，差异不具有统计学意义（P>0.05），但CLIA法检测灵敏度稍高于ELISA法。

综上所述，快速检测、CLIA法和ELISA法在HIV抗体检测中均具有较高的临床价值，准确性、特异度、灵敏度均相对较高，CLIA法灵敏度相对ELISA法稍高。

参考文献

沈蕊，裴丽健，岳志远，等.三种类型HIV抗体检测技术的方法学评价[J].中国艾滋病性病，2016（5）.

韩丹.几种HIV抗体检测的方法学比较[J].临床医药文献电子杂志，2017，4（54）.

胡二红.三种HIV抗体初筛法与确证法检测结果的对比分析[J].内蒙古医学杂志，2017，49（7）.