灭活疫苗在虹鳟鱼养殖中应用技术初探

文/刘园园

虹鳟鱼属鲑形目、鲑科鱼类。目前是葫芦岛市冷水鱼类养殖的主要品种。然而，随着虹鳟鱼养殖规模的不断扩大，养殖产量、产值的不断提高，疫病问题也日渐突显，特别是近年来，困扰笔者和养殖户的传染性造血器官坏死病（IHN），给养殖户造成极大的经济损失，严重的挫伤了养殖者的积极性，也给科技人员带来了很大困扰。2017年4月结合辽宁省水产技术推广总站实施的“虹鳟鱼IHN疫苗的初步应用”项目，葫芦岛市水产技术推广站在本地区采用灭活疫苗分别进行了注射灭活疫苗与无注射鱼苗的对比、注射不同部位及运用浸泡灭活疫苗的方法的对比试验。本人有幸参与了项目全程，现将试验情况总结如下：

一、材料与方法

（一）试验时间与地点

本次试验时间为：2017年4月27日～2018年4月30日；试验地点选在建昌县文臣冷水鱼养殖专业合作社。

（二）试验材料

1.接种疫苗、试验物质的准备

此次虹鳟鱼灭活疫苗是由辽宁出入境检验检疫局技术中心动物检验科利用辽宁省本溪市虹鳟鱼养殖场发病鱼研制的油乳剂灭活疫苗。疫苗性状为乳白色油状液体，规格500mL；麻醉药品为乙二醇苯醚（分析纯AR）；注射器选择一次性1mL兽医用塑料注射器。另备有16号针头、抄网、矮凳、鱼桶、下水裤、手套、水质监测仪、酒精、棉签、食盐等。

2.接种虹鳟鱼的选择和暂养

本次接种疫苗的虹鳟鱼为养成商品鱼的鱼种和亲鱼，虹鳟鱼的选择要求规格一致、健康。本试验选择的是25g/尾～30g/尾的虹鳟鱼鱼种。

3.注射前的准备工作

（1）麻醉药物的配制和鱼体麻醉操作：将50g乙二醇苯醚加入200L清水进行稀释配制成麻醉液，然后将麻醉液放入鱼桶中。将挑选后需要接种疫苗的虹鳟鱼鱼种放入盛有麻醉液的鱼桶中进行麻醉（图1），以鱼种在鱼桶中不游动为宜，然后开始疫苗接种。

（2）暂养网箱制作与安装：暂养网箱采用的是聚乙烯网布，网目为0.1cm。框架为“田”规格为1.2m×0.8m×0.3m，材料采用Φ10螺纹钢进行焊接，在“田”字形框架中间用螺纹钢焊接，以增加框架强度。整体网用直径为3mm的聚乙烯绳与框架固定。暂养网箱一般安装在要注射疫苗的鱼池中，要求网箱柱脚距池底8cm为宜，便于水体流通。

（3）注射部位及剂量的选择：本次疫苗注射部位为背鳍基部或腹鳍基部注射（图2）；注射剂量是0.1mL/尾。

（三）试验方法

1.注射法接种疫苗效果试验

图1 工作人员对虹鳟鱼苗进行麻醉

图2 工作人员对虹鳟鱼苗进行灭活疫苗注射

本次试验所用对象为虹鳟鱼和金鳟鱼，规格为25g/尾～30g/尾，体长为10cm～13cm。试验鱼种共60尾，30尾虹鳟鱼和30尾金鳟鱼。先将选择好的虹鳟鱼和金鳟鱼放入事先配制好的麻醉液中进行麻醉。待所有鱼种麻醉好后，以每尾鱼0.1mL的剂量进行疫苗注射接种。30尾虹鳟鱼进行腹鳍基部注射，30尾金鳟鱼进行背鳍基部注射。具体操作方法是用手托住麻醉好的鱼，针头与注射部位成45°夹角，注射深度0.3cm～0.5cm，注射剂量是0.1mL/尾。然后迅速将注射疫苗后的鱼放入暂养网箱中，并监测和记录接种疫苗后虹鳟鱼的相关数据（表1）。同样，对照组所用的网箱、鱼体的规格及养殖条件和管理水平要与试验组相同，并做好相关数据的监测和记录，以便于对比。

从表1可以看出：注射疫苗的虹鳟鱼的成活率远远大于无注射疫苗的虹鳟鱼；背鳍基部部位注射的虹鳟鱼成活率大于腹鳍基部注射的虹鳟鱼。

2.浸泡法接种灭活疫苗效果试验

浸泡灭活疫苗试验是水温在13℃～18℃时进行的。浸泡苗种规格为25g/尾～30g/尾，体长在10cm～13cm虹鳟鱼苗。方法是先按0.5%疫苗浓度进行配置于鱼桶中，并加入充氧设备，然后将需接种的虹鳟鱼放入盛有疫苗的鱼桶中进行浸浴接种；一般每次接种时间2h为宜。本试验接种虹鳟鱼数量为300尾（试验数据见表2）。

表1 注射灭活疫苗对虹鳟鱼预防效果的试验统计

表2 浸泡灭活疫苗对虹鳟鱼预防效果的试验统计

从表2可以看出浸泡法接种该疫苗，免疫效果也很好，成活率可达90%。

二、结果与讨论

利用传染性造血器官坏死病毒灭活疫苗进行预防接种在本地区虹鳟鱼养殖中尚属首次，从试验效果来看，不管是注射法还是浸泡法接种，免疫效果都很好，接种后虹鳟鱼的成活率都达到90%以上。试验证明接种虹鳟鱼IHN疫苗是预防虹鳟鱼传染性造血器官坏死病毒病很好的方法。

从试验结果来看，注射法和浸泡法接种该疫苗，在虹鳟鱼成活率上还有不同，注射法接种成活率要高于浸泡法接种，分析其原因主要是注射法接种疫苗直接注射到鱼体肌肉中，疫苗的免疫效果直接也较快，再就是鱼体获得的疫苗量准确。浸泡法接种是通过鱼体的渗透作用原理使疫苗进入鱼体的，受水温、疫苗浓度、每次接种鱼的数量等原因影响，所以接种效果就差些。但注射法接种在技术操作中专业性较强，如果操作不熟练或操作不当对鱼体的损伤较大，相反浸泡法接种操作相对简单些、实用些，对鱼体伤害也较小。建议在实际操作过程中要根据具体情况，选择适合的方法，要具体分析，因人而异。

本次接种疫苗的虹鳟鱼规格为25g/尾～30g/尾，接种剂量是项目专家组的建议的用量即注射剂量是0.1mL/尾、浸浴浓度为0.5%。但在实际生产中，虹鳟鱼的规格不可能都是25g/尾～30g/尾，可能大也可能小，因此接种剂量也要不同，具体采取什么浓度需要在今后的试验中继续总结。

众所周知，疫苗的制作一般是使用当地病鱼的病毒，再对该地区的鱼进行接种免疫是最科学，效果也是最好的。本次试验的疫苗是取自本溪市患病的鱼体，由辽宁出入境检验检疫局研制的虹鳟鱼IHN灭活疫苗。而本地区本批虹鳟鱼的发眼卵来自本溪，试验证明，本次试验的免疫效果也很好。如若采用本地区的虹鳟鱼发病的鱼制作疫苗效果可能会更好。