2型糖尿病合并Hp感染者游离脂肪酸表达水平及氧化应激反应的变化研究

杨文东 安振国

相关研究显示，胰岛素抵抗与氧化应激是导致2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus，T2DM)患者并发心、脑、肾等重要器官功能和结构改变的主要原因，且幽门螺旋杆菌(helicobacter pylori，Hp)感染可加剧病情的发生及发展[1-3]。为此，笔者鉴于游离脂肪酸(free fatty acid，FFA)表达水平的升高与胰岛素抵抗密切相关[4-5]，丙二醛(malondialdehyde，MDA)的表达水平及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)的活性可直接反映氧化应激的程度[6]，遂于本研究中对比观察了T2DM合并Hp感染对血清FFA、MDA表达水平及SOD活性的影响，以期为T2DM合并Hp感染者易患心、脑、肾等重要器官疾病的作用机制提供理论依据，现报告如下。

1 临床资料

1.1 研究对象

选取2017年1月至2018年6月利津县第二人民医院收治的160例T2DM患者(设为T2DM组)及50例健康体检者(设为对照组)作为研究对象，其中T2DM组男性96例、女性64例，年龄(58.1±10.3)岁；对照组男性29例、女性21例，年龄(57.6±9.8)岁。两组研究对象性别分布情况对比采用四格表资料的卡方检验，χ2=0.063，P=0.801，P>0.05，差异无统计学意义，具有可比性；年龄对比采用t检验，t=0.303，P=0.762，P>0.05，差异无统计学意义，具有可比性。本研究经利津县第二人民医院伦理委员会批准，且所有研究对象均签署了知情同意书。

1.2 纳入标准

(1)T2DM组患者：符合2013年中华医学会糖尿病学分会制定的中国糖尿病防治指南中的诊断及分型标准[7]；对本研究知情，并自愿签署知情同意书。(2)对照组健康体检者：经体检科体检，身体基本健康；对本研究知情，并自愿签署知情同意书。

1.3 排除标准

(1)患有严重心、脑、肝、肾等重要器官疾病者；(2)患有严重血液系统疾病者；(3)患有精神疾病者；(4)因各种原因无法配合完成试验者。

1.4 主要试剂与仪器

FFA检测试剂盒：上海申能-德赛诊断技术有限公司提供；SOD活性检测试剂盒：美康生物科技股份有限公司提供；MDA检测试剂盒：南京建成生物工程研究所提供；14C-尿素胶囊及HUBT-20P型幽门螺旋杆菌测试仪：深圳市中核海得威生物科技公司提供；AU680全自动生化分析仪：美国贝克曼库尔特有限公司提供；752型紫外可见分光光度计(532 nm)：上海现科分光仪器有限公司提供。

2 方法

2.1 标本采集

晨起(空腹10 h以上)抽取肘部静脉血5 mL，并于自然凝固后1400 g离心10 min，取2 mL血清备用(需12 h内使用完毕)。

2.2 标本检测

标本采集完毕后，按照试剂盒说明书采用酶联免疫吸附法检测血清中FFA的表达水平、TBA法检测血清中MDA的表达水平、比色法检测血清中SOD的活性。

采用14C尿素呼气试验(14C-UBT)检测研究对象的Hp感染情况：空腹或进食2 h后漱口并用约20 mL的温开水送服1粒尿素胶囊，静坐25 min后行呼气试验。

2.3 Hp感染诊断标准

14C-UBT测定值<50 dpm/mmol CO2为Hp阴性；14C-UBT测定值≥50 dpm/mmol CO2为Hp阳性，即现存Hp感染。

2.4 统计学处理

3 结果

3.1 血清FFA、MDA表达水平及SOD活性对比

T2DM组患者血清FFA表达水平为(0.78±0.21)mmol/L、MDA表达水平为(11.17±2.48)nmol/mL、SOD活性值为(91.53±8.79)U/mL，对照组健康体检者血清FFA表达水平为(0.47±0.14)mmol/L、MDA表达水平为(4.81±1.04)nmol/mL、SOD活性值为(135.90±9.99)U/mL，两组研究对象血清FFA、MDA表达水平及SOD活性对比，P均<0.01，差异具有统计学意义(表1)。即T2DM患者体内FFA表达水平明显升高，氧化应激反应明显增强。

表1 两组研究对象血清FFA、MDA表达水平及SOD活性对比Table 1 Comparison of the expression levels of FFA and MAD, and SOD activity between the two

注：两组研究对象血清FFA、MDA表达水平及SOD活性对比，P均<0.01，差异具有统计学意义

Note: Statistically significant differences were observed when the expression levels of serum FFA and MDA, and SOD activity were respectively compared between the two groups, allP<0.01

3.2 Hp感染情况及Hp感染者与非感染者血清FFA、MDA表达水平与SOD活性对比

对照组健康体检者均无Hp感染；T2DM组患者中存在Hp感染者69例(Hp感染率为43.1%)，其中男性39例、女性30例，年龄(59.7±9.4)岁；非Hp感染者中男性57例、女性34例，年龄(56.9±9.9)岁。Hp感染者与非感染者性别分布情况对比采用四格表资料的卡方检验，χ2=0.612，P=0.515，P>0.05，差异无统计学意义，具有可比性；年龄对比采用t检验，t=1.811，P=0.072，P>0.05，差异无统计学意义，具有可比性。

Hp感染者血清FFA表达水平为(0.91±0.24)mmol/L、MDA表达水平为(14.65±2.30)nmol/mL、SOD活性值为(77.49±7.98)U/mL，非Hp感染者血清FFA表达水平为(0.68±0.16)mmol/L、MDA表达水平为(8.53±1.97)nmol/mL、SOD活性值为(102.17±9.05)U/mL，Hp感染者与非感染者血清FFA、MDA表达水平及SOD活性对比，P均<0.01，差异具有统计学意义(表2)。即Hp感染者体内FFA表达水平显著升高，氧化应激反应明显增强。

表2 两组患者血清FFA、MDA表达水平及SOD活性对比Table 2 Comparison of the expression levels of FFA and MAD, and SOD activity between Hp-infected T2DM patients and Hp-free T2DM

注：Hp感染者与非感染者血清FFA、MDA表达水平及SOD活性对比，P均<0.01，差异具有统计学意义

Note: The expression levels of serum FFA and MDA, and SOD activity were respectively compared between Hp-infected T2DM patients and Hp-free T2DM patients, which all showed statistically significant differences,P<0.01

3.3 T2DM合并Hp感染者血清FFA表达水平与其他各项指标的相关性分析

Pearson相关性分析结果显示，以血清MDA表达水平和SOD活性为自变量、FFA表达水平为应变量，T2DM合并Hp感染者血清FFA表达水平与MDA表达水平呈显著正相关(r=0.482，P<0.01)、与SOD活性呈显著负相关(r=-0.409，P<0.01)。即T2DM合并Hp感染者血清FFA表达水平与氧化应激反应密切相关。

4 讨论

相关研究显示，T2DM患者极易引发心、脑、肾等重要器官功能和结构改变，且Hp感染可加剧此类患者病情的发生及发展，而目前我国人群Hp感染率已高达59%，由此导致的T2DM并发疾病增多的现实问题不容乐观[8-9]。本研究中，笔者观察了T2DM合并Hp感染对血清FFA、MDA表达水平及SOD活性的影响，旨在探寻T2DM合并Hp感染者易患心、脑、肾等重要器官疾病的作用机制，为此类患者的进一步临床防治提供思路与帮助。

4.1 持续高血糖状态可提高T2DM患者血清FFA的表达水平及氧化应激反应程度

本研究结果显示，T2DM组研究对象血清FFA及MDA表达水平明显高于对照组、SOD活性明显低于对照组，P均<0.01，差异具有统计学意义。即持续高血糖状态可提高T2DM患者血清FFA的表达水平及氧化应激反应程度，其原因可能为：持续的高血糖状态可导致胰岛素抵抗加剧，致使脂肪降解速度增快，进而引起血清FFA的表达水平升高，而高水平的FFA又可加剧胰岛素抵抗，最终形成恶性循环[10-11]。持续高血糖状态可诱发产生过量的活性氧簇，进而损坏线粒体功能，降低机体的抗氧化能力，引发氧化应激反应[12-13]，最终表现为血清MDA表达水平升高及SOD活性降低。

4.2 Hp感染可提高T2DM患者血清FFA的表达水平

FFA是脂肪组织的降解产物，可反映血脂代谢状态，适量的FFA是机体的供能物质，而高浓度的FFA具有较强的细胞毒性，可损伤细胞膜及线粒体、溶酶体等细胞器[14]。本研究结果显示，T2DM合并Hp感染者血清FFA表达水平明显高于非感染者，P<0.01，差异具有统计学意义。即Hp感染可提高T2DM患者血清FFA的表达水平[15]，其原因可能为：Hp持续感染可影响胃肠道激素的分泌及pH值而引发血脂代谢紊乱，从而导致FFA的表达水平升高[16-18]。

4.3 Hp感染可增强T2DM患者的氧化应激反应程度

血清MDA表达水平可反映机体的氧化应激状态，血清SOD活性可反映机体的抗氧化能力[19]。本研究结果显示，T2DM合并Hp感染者血清MDA表达水平明显高于非感染者、SOD活性明显低于非感染者，P均<0.01，差异具有统计学意义。即Hp感染可降低T2DM患者的抗氧化能力，增强患者的氧化应激反应程度，其原因可能为：高浓度的FFA可损伤细胞膜及线粒体、溶酶体等细胞器，促使活性氧簇的生成增加，进而导致患者的抗氧化能力降低，氧化应激反应增强。与本研究中T2DM合并Hp感染者血清FFA表达水平与MDA表达水平呈显著正相关、与SOD活性呈显著负相关的结果一致。

综上所述，持续的高血糖状态及Hp感染均可提高T2DM患者体内FFA及MDA的表达水平，降低SOD的活性，增强患者体内的氧化应激反应程度，且以T2DM合并Hp感染者最为显著，而高浓度的FFA及高强度的氧化应激反应均可损伤胰岛β细胞的功能，进而引发胰岛素抵抗，加剧T2DM患者心、脑、肾等重要器官疾病的发生发展[20]。纠正T2DM合并Hp感染者的血脂代谢紊乱及抗Hp感染治疗可能是延缓T2DM患者心、脑、肾等重要器官疾病发生发展的策略之一。