小半夏加茯苓汤研究进展

魏梦琳

小半夏加茯苓汤是一种传统的中药复方，出自《金匮要略》卷中，由半夏、生姜和茯苓三味药材组成，有和胃止呕、引水下行的功效，临床上主要用于各类呕吐、眩晕的治疗。目前日本已有此方的市售颗粒剂，对于其临床用途，作用机制和成分分析等的现代化研究也越来越丰富。下面从临床研究、现代药理、质量控制和工艺配伍等方面，对近年来小半夏加茯苓汤的研究进展作综述。

1 临床研究

1.1呕吐

1.1.1妊娠呕吐自上世纪50年代起，就陆续有此方治疗妊娠恶阻的报道。最新的临床研究表明，在80例妊娠恶阻患者中，40例采用常规治疗为对照组，40例在常规治疗基础上加用小半夏加茯苓汤辅助治疗为治疗组，进行比较。结果治疗组对于妊娠恶阻改善效果更为明显[1]。

1.1.2化疗呕吐近年来，小半夏加茯苓汤逐渐普及于化疗相关性呕吐的预防和治疗中。少量研究直接比较单用本方治疗前后患者的恶心呕吐情况。例如张明利等[2]发现，采用高效抗逆转录病毒疗法治疗的艾滋病患者24例，服用小半夏加茯苓汤后较服用前纳呆、呕吐、恶心、腹胀的消化道症状积分显著性下降，本方治疗恶心、呕吐总有效率均达90%以上。还有部分研究则以单用本方治疗直接与单用化学药物治疗进行比较。例如陈娟等[3]以服用小半夏加茯苓汤的46例各类癌症患者为治疗组，以采用甲氧氯普胺治疗化疗所致呕吐的45例患者为对照组进行比较，发现治疗组较对照组的有效率显著提高。但大多数研究则是采用中西药结合治疗与单用化学药物治疗进行比较。所选用的化学药物通常为5-HT3受体阻断药(如格拉司琼、阿扎司琼)或甲氧氯普胺。小半夏加茯苓汤通常在使用化学药物的同时，于化疗前给1～3天至化疗后5～7天给与。结果均显示加用中药复方的预防和治疗效果更优[4～7]。

1.1.3其他呕吐另外，小半夏加茯苓汤在治疗周期性呕吐[8]、顽固性呕吐[9]、胃切除术后胃轻瘫[10]等其他类似病症中的使用亦有个案报道和疗效观察，为其在消化科的进一步应用奠定基础。

1.2眩晕使用小半夏加茯苓汤治疗眩晕常与泽泻合用。武子华[11]、闵照国[12]、刘杰等[13]，分别采用加味小半夏加茯苓汤治疗高血压、梅尼埃病、颈椎病、脑梗死、椎-基底动脉供血等不同病因引起眩晕64例、38例和40例，总有效率分别为96.88%、94.74%、95.00%。亦有对照实验观察小半夏加茯苓汤合泽泻汤加味治疗颈性眩晕疗效，对照组和治疗组各40例均采用丁咯地尔注射液静脉滴注，治疗组加用小半夏加茯苓汤和加味泽泻汤口服，治疗组总有效率为92.5%，显著高于对照组72.5%[14]。盛国强[15]观察小半夏加茯苓汤对顽固性梅尼埃病患者的疗效，对照组37例行口服氟桂利嗪、甲磺酸倍他司汀，注射庆大霉素等常规治疗，观察组在此基础上加用小半夏加茯苓汤加味方。治疗结果以症状评分和眩晕残障程度评定量表评分进行比较，观察组各项评分均低于对照组，总体有效率亦显著高于对照组。张智勇[16]对照银杏达莫注射液和倍他司汀氯化钠注射液静脉滴注，与加用泽泻汤合小半夏加茯苓汤治疗各类周围性眩晕的疗效，各42例。结果发现合用中药复方的总有效率为92.9%,显著高于单用化学药物。

1.3其他2000年以来，也有小半夏加茯苓汤成功治疗小儿秋季性腹泻[17]、反流性食管炎[18]、心功能不全[19]以及病毒性心肌炎[20]的疗效观察与对照实验研究。这些新用法是否可进一步普及推广，有待进一步验证。

2 现代药理

对本方的现代药理学研究，主要包括止吐和抗肿瘤两类药理活性的作用机制研究。

2.1止吐陈晓燕等[21]用顺铂造家鸽和犬呕吐模型，研究小半夏加茯苓胶囊制剂的止吐机制，荧光分光光度法测定药物干预前后血清、脑干及小肠中5-羟色胺(5-HT)的浓度，发现本方的止吐作用可能与抑制5-HT的生成与释放有关。冯泳等[22～24]进行了一系列实验，同样以顺铂造家鸽呕吐为模型，研究小半夏加茯苓汤颗粒对抗化疗呕吐的作用机制，发现小半夏加茯苓汤汤剂和颗粒剂与阳性药物昂丹司琼类似，可显著降低家鸽脑干内5-HT水平、升高血浆胃动素水平和血清胃泌素水平。另外还有文献报道本方可兴奋家兔离体胃底和胃窦平滑肌，抑制十二指肠平滑肌收缩，对氯化乙酰胆碱所致胃肠平滑肌强制痉挛有拮抗作用，对阿托品所致十二指肠平滑肌收缩减弱有协同作用，可见本方止吐机制可能与M胆碱受体有关[25]。臧春宝等[26，27]发现小半夏加茯苓汤预防性给药可减轻顺铂所致大鼠异食癖。大鼠异食癖行为等同于恶心呕吐行为。实验以阿瑞吡坦为阳性对照，并采用免疫组化法和实时荧光定量PCR法测定，发现其作用机制可能与降低由顺铂引起的延髓和胃窦NK1受体(NK1R)蛋白、P物质(SP)蛋白及相应mRNA的表达增高有关。

2.2抗肿瘤小半夏加茯苓汤及其成药制剂抗癌机制的血清药理学研究，主要的实验方法是使用细胞模型，如胃癌SGC-7901细胞、肝癌SMMC-7721、HepG2细胞，采用复方汤剂和(或)成药制剂的含药血清给药，观察细胞存活率并研究其机制。通常设有空白对照组、原汤剂组、不同剂量成药制剂组、阳性药物组(常用阳性药物为顺铂)。实验发现，小半夏加茯苓汤汤剂及其成药颗粒制剂，对肿瘤细胞的生长增殖均有抑制作用。复方给药后，其作用效果呈现时间依赖性和剂量依赖性[28]；下调细胞B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)基因表达，说明作用机制可能与诱导细胞凋亡或细胞毒作用有关[29，30]；其阻滞细胞周期于S期，半胱天冬酶-3 (caspase-3)表达呈药物剂量依赖性，说明本方可能通过激活caspase-3蛋白表达，诱导细胞凋亡[31]。贾亚玲等[32]和闫文娟等[33]的研究，以肝癌HepG2细胞、胃癌BGC-823细胞为模型，直接以不同浓度的小半夏加茯苓汤醇提物给药，探讨本方抗癌机制。结果发现，其对细胞增殖的抑制作用呈剂量依赖性，给药组bax、cjun、Cyt-c基因的表达显著性上调，Bcl-2基因表达显著性下调，说明本方诱导模型细胞凋亡的作用机制可能是激活线粒体途径。在动物实验中，小半夏加茯苓汤亦表现出对肿瘤生长的抑制作用。动物模型多采用H22荷瘤小鼠和S180荷瘤小鼠，设有动物模型组、不同剂量的复方汤剂给药组、阳性对照组(环磷酰胺或顺铂)。结果发现，小半夏加茯苓汤对几类模型动物的肿瘤均有抑制作用，作用强度呈现一定剂量依赖性[34]。与模型动物组相比，复方汤剂给药组增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达显著下降，肿瘤坏死因子(TNF-α)水平显著性升高，脾脏指数、胸腺指数、淋巴细胞刺激指数显著性增大，说明本方抗肿瘤的作用机制可能与激活免疫细胞、增强免疫功能有关[35，36]。另外不同剂量的复方汤剂给药，可使颗粒酶B与穿孔素的基因表达和蛋白表达显著性上调，说明其作用机制可能与颗粒酶B和穿孔素诱导的“非自愿细胞凋亡”有关[34]。杨林森等[37]的研究还设有多糖组和姜辣素组，结果发现复方汤剂组的肿瘤抑制效果强于多糖组和姜辣素组，caspase-3基因的表达亦显著多于单类化学成分组，本方的抗癌机制可能与增强凋亡基因caspase-3表达有关。

2.3其他宋殿荣等[38]采用小鼠胚胎干细胞，以小半夏加茯苓汤含药血清给药，证实了本方给药后96小时内对细胞活力的增长没有影响，对小鼠胚胎干细胞分化为心肌细胞的肌球蛋白重链基因β-MHC的表达也没有显著影响，说明本方无明显胚胎毒性。刘洋等[39]的研究发现，小半夏加茯苓汤可以延长小鼠心脏移植术后移植心脏的存活时间，作用机制可能是诱导T细胞的产生，改变实验动物体内辅助性T淋巴细胞1(Th1)、辅助性T淋巴细胞2(Th2)细胞因子的平衡和抑制白介素-2(IL-2)、γ-干扰素(IFN-γ)来减少心脏受损。

3 质量控制

3.1药效物质基础研究刘文等[40]采用正交设计法探究煎煮时间、加水倍数和粉碎度等提取工艺的不同对复方疗效及方中生物碱含量的影响。以硫酸铜致家鸽呕吐模型验证疗效，以酸提碱沉后减重法测定总生物碱含量。结果显示，提取所得总生物碱含量越高，呕吐潜伏期越长，呕吐次数越少，以此推测方中生物碱类成分为小半夏加茯苓汤止吐的药效活性成分。曾万玲等[41]建立了小半夏加茯苓汤的高效液相色谱特征图谱，并通过对照保留时间的方法鉴定了6-姜酚、8-姜酚、10-姜酚以及芦丁四种单体成分。其中6-姜酚在紫外波长220 nm下响应最好，占23个标记特征峰总峰面积的20%，含量较高，结合文献调查结果，提示姜酚可能是本方止吐作用的药效物质基础之一。但受提取方法和检测方法的影响，组方中一些小极性或紫外响应不好的成分可能未被提取和检出，因此半夏及茯苓中的药效成分并没有得到体现。另外还有研究采用均匀设计法优化不同配比的半夏生物碱、茯苓多糖及姜辣素的的肿瘤抑制和免疫调节效果。通过比较H22荷瘤模型小鼠的瘤重，得出茯苓多糖0.005 mg、姜辣素0.195 mg时，抗肿瘤效果最佳。原中药组方也具有类似效用，但是效果略逊于顺铂组和单体成分最优配比组。通过比较免疫器官指数和血清中TNF-α、IL-2的浓度，还发现中药复方和天然药物成分还具备阳性药物不具备的免疫调节作用。半夏生物碱、茯苓多糖及姜辣素可能为小半夏加茯苓汤的抗肿瘤活性成分[42]。

3.2化学成分的鉴定与含量测定李香等[43]通过系统溶剂提取法和核磁共振氢谱从小半夏加茯苓汤的醇提取物中，分离并鉴定了6-Shogaol黄酮、Kaempferol黄酮醇，Leucine氨基酸，β-sitosterol甾醇和Guanosine嘌呤核苷五种化合物。但并未对化合物在方中的归属做出区分。对小半夏加茯苓汤的单体成分的含量测定，目前多采用反相高效液相色谱法，C18色谱柱，乙腈与含无机酸的水为流动相梯度洗脱，紫外分光光度法进行检测。测定的成分主要包括鸟苷、腺苷、盐酸麻黄碱、芦丁、6-姜酚、8-姜酚、10-姜酚、去氢茯苓酸、茯苓酸。用此类方法可快速准确对本方中多种单体成分同时进行含量测定[44～47]。这些测定方法的建立可为本方的质量控制研究做出参考。

4 工艺配伍

对于小半夏加茯苓汤的配伍研究，多比较原复方、拆方和单味药材总体药效差异或方中有效成分的含量差异。

冯泳等[48]以硫酸铜致家鸽呕吐为动物模型，呕吐潜伏期与呕吐次数为评价指标，对比小半夏加茯苓汤复方及拆方止吐效果。结果原复方在预防和治疗呕吐方面的效果均最好，半夏+生姜次之。还有文献观察药液对家兔离体胃肠运动的影响来验证药效，得到的结论仍是全方效果优于拆方和单味药材[25]。

叶继锋等[49]对比单味药材煎煮液、单味药材煎煮合并液与整方合并煎煮液中多糖含量的差异。多糖含量测定采用硫酸-苯酚法，比色法测定。最终发现，小半夏加茯苓汤整方煎煮较单味药材煎煮合并后的多糖含量多。李力等[50]采用类似的方法也证实整方中多糖含量高于拆方。另有文献比较小半夏加茯苓汤整方及拆方中生物碱含量的差异，用酸性染料比色法测定，结果复方中总生物碱含量大于拆方及单味药材[51]。郭延红等[52]建立高效液相色谱法测定腺苷含量，发现其总百分含量以复方煎剂最大，去茯苓拆方次之，单味半夏最小。

以上研究均证实了原复方在合并煎煮时具有更好疗效和更大的单类活性成分含量。

5 讨论

小半夏加茯苓汤目前已经广泛用于妊娠呕吐和化疗相关呕吐的治疗。临床研究还证明，治疗化疗呕吐，配合常规的化学药物预防性使用本复方效果显著。联合泽泻使用，对于各类中枢性眩晕和周围性眩晕疗效确切。

对本方的现代药理研究证明，其止吐的作用机制可能与M胆碱受体、抑制5-HT的生成与释放、升高血浆胃动素水平、升高血清胃泌素水平、下调延髓和胃窦NK1R蛋白、SP蛋白及相应mRNA的表达有关。另外，小半夏加茯苓汤及其成药制剂的抗肿瘤作用已经在细胞实验和动物实验阶段得到了初步体现。但是本方在抗癌方面的临床应用前景并不明朗，缺乏疗效观察和对照实验的研究证实。

小半夏加茯苓汤中总生物碱(主要为半夏生物碱)、茯苓多糖、生姜中姜辣素类(姜酚、姜脑等)，以及部分黄酮类化合物可能为其发挥药效的物质基础。但目前该类研究还不够深入，几乎尚未有对单体成分进行分离鉴定、归属以及药理作用验证。未来的研究可采用专属性更高的检测方法，并使用细胞或动物模型进行验证，以便得到更加明确的结果，方便进一步研究本方的作用机制以及建立质量控制方法。

对本方的工艺配伍研究，多次证实了本复方相较拆方以及单味药材的疗效优势。但经过药效验证的研究并不多见，所测定的单体成分也应与药效物质基础研究相结合。比色法等检测方法快速简便，但缺乏一定的专属性，容易造成假阳性结果。这是日后配伍研究应该注意和改进的地方。

综上所述，小半夏加茯苓汤的现代化研究已经渗透到方方面面，但各项研究仍有进一步细化和深入的前景。