发酵果渣饲料的质量控制与出厂检验

2019-02-27王忠明马春芳马建成

养殖与饲料 2019年6期

王忠明马春芳马建成

1.宁夏绿健源生物科技有限公司，宁夏吴忠 751101；2.宁夏吴忠市畜牧技术服务中心，宁夏吴忠 751100；3.宁夏利通区畜牧技术服务中心，宁夏吴忠 751100

生物饲料作为“十三五”期间新兴产业重点产品，将成为饲料产业的重要突破口，据预测到2025年，我国生物饲料总量将达到饲料总量的40%，生物发酵原料的价值已为行业广泛接受。目前，已有部分大型农牧饲料和养殖企业销售使用自产生物发酵饲料。但国家和农业部在生物发酵饲料质量控制与产品标准方面还没有统一的标准，笔者结合近几年在生产发酵枸杞果渣饲料的过程中对其质量控制与产品出厂的检验，与同行们一起分享。

发酵枸杞果渣饲料质量的检验主要从以下几个方面入手：感官指标、营养指标、加工质量指标和卫生指标。

1 感官指标

色泽与气味。发酵好的饲料具有发酵所特有的酸香味，色褐黄色，呈细粒状。用带有呼吸膜的袋装固态发酵枸杞果渣，在15℃以上的温度存放，基本24 h后就开始需氧菌的发酵过程，出现发热、胀袋，这种状态维持1周左右，随即转入兼性厌氧菌和厌氧菌的发酵过程，2周后发酵库就可嗅到一股酸香味，色泽变成褐色或棕褐色，即可初步判断已发酵成熟。

2 常规理化指标

饲料成品的常规理化指标在一般饲料厂都可以完成，通过常规理化指标的检测和感官指标，可以初步判定发酵饲料质量的优劣和稳定性。

2.1 粗蛋白

粗蛋白含量虽然不是发酵饲料的主要检测指标，但是通过检测发酵饲料粗蛋白含量，一是便于指导养殖场添加时计算日粮营养水平，二是也可作为宣传公司产品的卖点之一。粗蛋白用凯氏定氮法进行检测，所用设备型号为上海昕瑞KDN-0A，检测方法依据国标《GB/T 6432-2002》，经公司多批产品检测证实，发酵后的粗蛋白较发酵前提高了8%～10%。

2.2 水分

水是构成发酵基质的主要原材料之一。发酵饲料水分的高低直接影响成品的活菌数，为了防止城市饮用水的氯制剂对活菌的影响，宁夏绿健源生物科技有限公司利用深井水进行生产。水分检测方法依据国标《GB/T 6435-2006》执行，由于受原料水分含量和季节的影响，各批饲料监测水分在35.0%～40.0%之间波动。

2.3 灰分

灰分含量是发酵果渣类饲料的强制检测标准，检测方法依据国标《GB/T 6438-2007》执行，公司产品饲料监测灰分结果基本上都在7.2%以下。

2.4 粗纤维

粗纤维含量是发酵果渣类饲料的强制检测标准，发酵可以有效降解饲料中粗纤维，提高粗纤维的利用率。检测方法依据国标《GB/T 6438-2007》执行，检测设备使用上海乔跃电子JOYN-CXW-06粗纤维仪，发酵枸杞果渣产品粗纤维含量在7.0%左右浮动。

2.5 酸度

发酵饲料乳酸含量的高低是判断微生物发酵饲料品质优劣的一个重要指标。总酸度的测定采用酚酞指示剂法，有效酸度采用比色法进行测定。发酵枸杞果渣产品酸度在4.0～4.8之间波动。

3 加工质量指标

3.1 成品粒度

饲料粉碎粒度不仅对动物对于营养物质的消化吸收有很大影响，而且对发酵过程中微生物的发酵程度有重要的关系。一般粒度愈小，发酵程度愈高，但由于产品枸杞渣的特殊性，只能使用孔径0.84 mm筛，粒度为0.9 mm。按照国标《GB/T6435-2006》进行检测，固定每个月抽检2个批次的饲料产品，临时检测在更换筛片后进行1次监测。

3.2 混合均匀度

发酵枸杞果渣饲料的混合均匀度检测方法比较特殊，要在加入菌液前进行采样监测。如果在加入菌液后甲基紫完全溶解，影响检验结果，依据《GB/T 5918-2008》进行检验。将甲基紫充分研磨，过孔径0.104 mm筛后，按混合机饲料量的十万分之一用量加入，在混合到规定的时间后从混合机的两边的观察孔各取10份样品，每份样品约200 g，称取试料10.00 g，放在150 mL的烧瓶中，加入30 mL无水乙醇搅动混匀后，在烧瓶上盖一表面皿放置30 min后，用中速定性滤纸过滤，设722S型分光光度计波长为590 nm，以无水乙醇作空白调分光光度计的零点，用5 mm比色皿测定滤液的吸光度。枸杞果渣由于糖分高，粘性大，粉碎时需加入一定比例的辅料进行粉碎，粉碎后加入小料后进入混合机进行混合，这样粉碎加混合的多次混匀，使得发酵枸杞果渣产品的混合均匀度变异系数平均值CV≤1.0%，完全符合标准要求。

4 卫生指标

饲料中天然、次生、外源性污染、有毒有害物质及病原微生物的安全限量。

霉菌数检验。无菌称取已发酵好的检样25 g，放入含有225 mL灭菌稀释液的三角烧瓶中，置振荡器中振荡30 min或涡旋混匀器上混匀3 min，即为1∶10的稀释液。再做1∶10倍稀释2次，每稀释1次都吸取1 mL加入灭菌平皿中并注入约46℃±的高盐察式培养基，充分混匀待培养基凝固后倒置，放入25～28℃±温箱中培养3 d观察，结果判定依据《GB/T13092-2006》执行。公司生产的发酵枸杞果渣检出数≤2×102个/g。

5 总菌数检测

1）样品的处理。用经120℃干燥灭菌的牛皮纸取样袋和取样勺从已发酵好的、3个不同位置贮存的3袋饲料中取出2 000 g被检样品送入无菌间混合均匀后，检测。

2）试样稀释与培养。无菌称取试样10 g，放于含有90 mL稀释液的灭菌三角烧瓶中（瓶内预置适当数量的玻璃珠），置振荡器上振荡30 min。经充分振摇后，制成1∶10的均匀稀释液，并在涡旋混匀器上8 000～10 000 r/min的速度处理1 min。

3）用1 mL灭菌吸管吸取1∶10稀释液1 mL，沿管壁慢慢注入含有99 mL灭菌稀释液的三角烧瓶中（注意吸管不要触及管内稀释液），放涡旋混匀器上，混合1 min，混合均匀制成1∶1 000的稀释液。在稀释的同时，取该稀释度菌液1 mL注入2个平皿中，加入15 mL高盐察氏培养基，快速混匀待凝固后倒置，放入（30±1）℃的培养箱中培养72 h进行观察计数。

4）另取1只1 mL灭菌吸管，按上述操作方法，作100倍递增稀释，如此每递增稀释1次，即更换1次灭菌吸管。根据饲料产品质量标准，宁夏绿健源生物科技有限公司的企业标准是活菌数≥1.0×108CFU/g，因此我们选择 106、107、108、1094 个稀释度，分别在作100倍递增稀释的同时，以吸取该稀释度的吸管移1 mL稀释液于灭菌平皿内，每个稀释度作2个培养皿。

5）稀释液移入平皿后，应及时将凉至（48±1）℃的培养基（可放置在（48±1）℃水浴锅内保温）注入培养皿约15 mL，小心转动培养皿使试样与培养基充分混匀，从稀释试样到倾注培养基之间，时间不要超过30 min。如估计试样中所含微生物可能在培养基表面生长时，待培养基完全凝固后，可在培养基表面倾注至（46±1）℃的水琼脂培养基4 mL。待琼脂凝固后，倒置平皿于（30±1）℃恒温培养箱内培养（72±3）h取出，计算平板内细菌总数，细菌总数乘以稀释倍数，即得每克试样所含细菌总数。

6）细菌总数计算方法。做平板细菌总数计算时，可用菌落计数器或肉眼观察，如菌落形态小时，可借助于放大镜检查，以防遗漏。在计算出各平板细菌总数后，求出同稀释度的2个平板菌落的平均值。细菌总数乘以稀释倍数，即得每克试样所含细菌总数。

7）细菌总数计数的报告。细菌总数在100以内时，按其实有数报告；大于100时，采用2位有效数字，在2位有效后面的数值，以四舍五入方法修约。为了缩短数字后面的零数，可用10的指数表示。

①平板总数细菌总数的选择。选择细菌总数在30～300之间的平板作为细菌总数测定标准，每一稀释度使用2个平板菌落的平均数。2个平板其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板菌落的平均数作为该稀释度的细菌总数；若片状菌落不到平板的一半，而另一半菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘以2，以代表全平皿细菌总数。

②稀释度的选择。应选择平板细菌总数在30～300之间的稀释度，乘以稀释倍数报告之。若有2个稀释度，其生长的细菌总数在30～300之间，则视二者之比来决定。若其之比≤2，应报告其平均值；若＞2则报告其中较小的数字。若所有稀释度的平均细菌总数均大于300，则应按稀释度最高的平均细菌总数乘以稀释倍数报告之；若所有稀释度的平均细菌总数均小于30，则应按稀释度最低的平均细菌总数乘以稀释倍数报告之；若所有稀释度均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释度报告之。