民族民间药四数九里香研究进展

梁 威,凌 博,陈柏冰,赵秋华,张忠伟∗

(1.右江民族医学院,广西 百色533000；2.广西大学,广西 南宁530004)

四数九里香Murraya tetrameraHuang为芸香科九里香属植物[1],全株有特殊芳香气味,全年可采收叶或带叶嫩枝入药。历版《中国药典》均未收载四数九里香,但其在民族地区和民间被广泛使用。据记载,其味辛微苦,性微温,有祛风解表、行气止痛、活血散瘀等功效,可用于治疗感冒发热、胃痛、风湿痹痛、跌打肿痛等症[2-3]。四数九里香茎叶香气浓郁,味辛辣清凉,用于泡茶可提神醒脑,而将其泡水洗澡有凉爽舒适之感。目前,研究者对四数九里香的化学成分、药理作用、驯化栽培等方面进行了探讨。为准确鉴别四数九里香的基源,有效研究开发其药物资源,本文就其相关研究报道进行梳理分析。

1 基源特征

四数九里香为小乔木,当年生枝和新叶的叶轴及花梗被稀疏微柔毛,其后变无毛。小叶5～11片,狭长披针形,两侧稍不对称或对称,干后暗褐黑色,油点微凸。伞房状聚伞花序,多花；萼片基部合生,4片；花瓣4片,白色有油点；雄蕊8枚；子房椭圆形。果圆球形,淡红色,油点甚多,种子1～3粒。花期3－4月,果期7－8月。主产于广西西部、云南东南部,常见生于光照充足的海拔400～700 m的石灰岩山地的山顶部,模式标本采自云南砚山[1]。

2 化学成分

目前,多采用硅胶柱层析、重结晶、TLC、HPLC、GCMS、MS和NMR等法研究四数九里香水提物、醇提物和挥发油的化学成分。

牙启康等[4]研究了四数九里香的非挥发油成分,首次从该植物中分离鉴定出补骨脂素等5个化合物。张柯媛等[5]以补骨脂素为指标成分建立了定性定量分析方法,测得广西德保、武鸣和河池产四数九里香的补骨脂素含量依次为0.23mg/g、0.21mg/g、0.20mg/g,为制定其药材质量标准提供了数据参考。

周颖等[6]从四数九里香中分离鉴定出β-谷甾醇、间甲基苯甲醚等9个化合物,其中有4个为首次从九里香属植物中分得,有8个为首次从该植物中分得。You等[7]从四数九里香中分离鉴定出8个化合物(2个倍半萜类和6个香豆素类),其中有1个新化合物。周永福等[8-9]前期从四数九里香叶的醇提物中分离鉴定出1-甲基-3-丙酰基咔唑、β-谷甾醇等8个化合物(7个咔唑类生物碱和1个甾体化合物)；后期又从中分离鉴定出紫苏醛、7-羟基香豆素等14个化合物(6个黄酮类、5个香豆素类、2个甾体化合物、1个不饱和脂肪酸酯),有12个为首次从该植物中分得。

研究者从多产地的四数九里香挥发油中分离鉴定出多个成分,含量较高的主要为薄荷酮、异薄荷酮、薄荷醇、柠檬烯和胡椒酮等[10-12]。陈家源等[12]从广西德保产四数九里香的挥发油中分离鉴定了37个化学成分,有15个为首次从该植物中分得。龚志强等[13]研究发现,3种提取方法所得挥发油均含薄荷酮、异薄荷酮、胡椒酮等主要成分。超临界CO2流体萃取法可得38种成分,水蒸气蒸馏法为33种,超声提取法为12种,且均以薄荷酮的含量最高(分别为38.17%、20.51%、43.45%)。不同提取方法对四数九里香挥发油的提取效率不同。超临界CO2流体萃取法得到挥发性成分最多,可能与其萃取温度低、低沸点的易挥发性组分损失较少有关。

3 药理活性作用

3.1 抗炎镇痛作用

四数九里香的醇提物、水提物和挥发油对角叉菜胶致大鼠足趾肿胀法引起的急性炎症、棉球致大鼠肉芽肿法引起的慢性炎症,以及小鼠热板法和小鼠醋酸扭体法引起的急性外周疼痛均有显著的抑制作用。四数九里香不同提取物的不同剂量与其抗炎镇痛作用密切相关。与空白对照组相比,挥发油0.4 g/kg、水提物40 g生药/kg、醇提物40 g生药/kg剂量组的效果最明显,其余剂量组也有不同程度的抑制作用[14-16]。有研究者从电生理角度初步探讨了四数九里香镇痛作用的可能机制。相同的药物作用时间内,离体蟾蜍坐骨神经动作电位振幅和动作电位传导速度的变化值基本呈同步状态,均随其水提液药物浓度的增加而增大。随药物作用时间的延长,其水提液和挥发油均导致神经复合动作电位的振幅变小、传导速度变慢,最后使神经动作电位消失。该研究结果提示了阻滞神经动作电位的传导可能是四数九里香镇痛作用的机制之一[17-18]。

3.2 急性毒性作用

黄小秋等[19]研究发现,四数九里香水提液和75%醇提液的LD50值分别为69.18g/kg、183.44g/kg,说明水提液对小鼠的急性毒性相对更大。将两种提取液经口灌胃小鼠后,显示小鼠死亡率均随给药剂量增加而升高,即两者存在正比关系。水提液和75%乙醇提液的给药剂量分别为49.70g/(kg·h)、132.07 g/(kg·h),小鼠死亡率最低。作者认为四数九里香虽为民间常用药,但应合理使用剂量,避免发生毒性反应,而不同提取液的毒性作用部位和作用机制尚需深入研究。因2种提取方法的原理不同,则四数九里香提取液中非挥发性与挥发性成分的含量存在差异,可推测其提取液的组成成分与药理毒性必然有一定的量效关系。

3.3 细胞毒活性作用

有学者以肿瘤细胞为研究模型研究了四数九里香多种化学成分对肿瘤细胞的体外生长抑制作用。You等[7]将四数九里香的2个倍半萜类和6个香豆素类对肺腺癌A549、宫颈癌HeLa、肝细胞癌SMMC-7721、膀胱肿瘤EJ、急性淋巴细胞白血病BALL-1细胞进行了细胞毒活性评价,发现不同化合物有不同的细胞毒活性。2个倍半萜类化合物对5种细胞均有明显的细胞毒活性。对于香豆素类化合物,有3个未检测到任何细胞毒活性,而其余3个均有不同的细胞毒活性。作者认为,结构相似的化合物有不同程度的细胞毒活性,可能与化学物结构中不同的取代模式有关：有长烷基取代基的化合物对肿瘤细胞有明显的细胞毒活性,而在烷基取代基上有羰基的化合物显示弱细胞毒活性。四数九里香的活性化合物可能是治疗癌症的潜在先导化合物。

周永福等[8]发现用于实验的四数九里香8个化合物中,有5个对肝癌SMMC7721表现显著的细胞毒活性；其后期又研究了四数九里香的14个化合物对结肠癌SW480、白血病HL60、肺腺癌A549、肝癌SMMC7721、乳腺癌 MCF7细胞的体外生长抑制作用[9],结果显示,14个化合物对结肠癌SW480的细胞毒活性均低于阳性对照组,而对于其余4种肿瘤细胞,多个化合物均表现出不同程度的细胞毒活性。因此,2项研究结果为四数九里香抗肿瘤细胞活性提供了实验数据,有利于进一步研究开发四数九里香和相关的抗肿瘤新药。

3.4 对血脂水平和血液流变学的影响

九里香属植物中的九里香叶总黄酮对糖尿病大鼠的血脂水平有调节作用,而其影响高脂血症的相关研究较少。杨其波等[20]探讨了四数九里香对高脂血症小鼠血脂调节作用及血液流变学的影响。与模型对照组相比,其水提物和醇提物均可不同程度抑制高脂血症小鼠的体重增加量,且以醇提物的作用更强。血脂水平测定结果显示,其水提物和醇提物均能明显降低小鼠的血清总胆固醇、甘油三酯和血清低密度脂蛋白水平,提高血清高密度脂蛋白水平。血液流变学测定结果表明,其水提物和醇提物均可有效降低小鼠高切全血黏度、中切全血黏度、低切全血黏度、血浆黏度、红细胞压积和红细胞聚集指数水平。这说明适当剂量的四数九里香提取物在一定程度上可调节血脂、有效降低血液黏度、防止红细胞聚集形成血栓。

4 四数九里香的驯化栽培研究

四数九里香野生资源有限,多生于石灰岩山地,生长较缓慢,故对其进行栽培育种研究尤为必要。闭志强等[21]对原产于广西西南石山区的野生山茶鉴定为四数九里香,并进行驯化栽培研究。四数九里香茎段经不同类型和浓度的生根剂处理后,仅GGR组有极少茎段长出新芽,但后期全部停止生长并枯蔫,发现其未长出新根。四数九里香的扦插成活率极低,可能与其生长缓慢、韧皮部薄而难诱导出根的特性有关。移栽实验表明,用50ppm的GGR对带根植株进行拌泥浆根有助于诱发新根和长出新芽,提高植株成活率。与偏酸性的红壤相比,以pH中性或略偏碱性的黑色石灰土作为栽培基质或基肥,成活率高达78.3%,更有利于四数九里香生长。

5 结语

民族民间药物疗效显著,具有悠久的应用历史,是一座医药宝库,还有赖于研究者进行发掘和研究。作为一种民族民间草药,四数九里香的使用地区具有典型的地域性。广西龙州用其作为治风湿病的主药,广西德保用其叶作冬季饮用茶叶以防寒,说明四数九里香还可用于保健茶饮。目前,对四数九里香的研究尚处于基础阶段,仅在化学成分、药理作用、驯化栽培等方面有较少报道,因此,建议进一步加强对四数九里香的人工栽培高产技术、药材采收加工、药材质量标准、新药制剂开发、药理作用的物质基础及作用的分子机制等方面的深层次研究。