马铃薯糖苷生物碱对化疗性静脉炎模型中bFGF及TNF-α表达水平的影响分析

王楠

（浙江中医药大学附属江南医院手外科 浙江 杭州 311201）

静脉输注化疗药物极易导致化疗性静脉炎的发生，早期的护理措施及药物干预效果显著。新鲜马铃薯外敷作为一种传统的方式防治静脉炎被基层广泛应用，其主要药理成分马铃薯糖苷生物碱具有良好的消炎镇痛作用。发生静脉炎的血管在创伤及修复的过程中伴随着各类细胞因子的释放[1]，用于检测静脉炎症反应的指标主要分为两类，一类是促血管生成因子，如bFGF；一类是炎症因子，如TNF-α。课题组化疗性静脉炎造模后，检测穿刺点周围血清中bFGF和TNF-α的水平，探讨马铃薯糖苷生物碱防治化疗性静脉炎的效果。

1.资料与方法

1.1 动物及试剂

32只新西兰大白兔，体重2.2kg，雌雄各半。α-茄碱，α-卡茄碱，硫酸长春新碱，500g/L硫酸镁，兔抗bFGF、TNF-α的ELISA检测试剂盒，全自动酶标仪等。

1.2 药膏制备

精确称取α-茄碱3mg和6mg，分别称取30g凡士林，将α-茄碱分别倒入均匀混合。4℃冰箱保存备用。α-卡茄碱配置方法同上。

1.3 实验分组

A组：0.5g空白霜膏兔耳静脉涂抹。

B组：500g/L硫酸镁湿敷于兔耳静脉，30min，保持湿润。

C组：新鲜马铃薯洗净去皮捣泥，沿兔耳静脉外敷，透明膜覆盖固定，共1 h。

D1、D2组：0.5g 100mg/kg及200mg/kgα-茄碱霜膏兔耳静脉涂抹均匀。

E1、E2组：0.5g 100mg/kg及200mg/kgα-卡茄碱霜膏兔耳静脉涂抹均匀。

F组：无外敷处理。

各组给药至48 h。其中A、D1、D2、E1、E2涂抹霜膏一天三次。B组每次湿敷30 min，一天三次。C组马铃薯泥外敷1h，一天三次。

1.4 静脉炎造模

兔双耳备皮，暴露耳缘静脉。麻醉后，在兔耳缘静脉距耳尖2cm处穿刺，先推注2mL生理盐水，再推注长春新碱药液，剂量为0.2mg/kg，双侧耳缘静脉同时注射，兔耳缘静脉注射速度控制在0.5mL/min，推注2mL生理盐水冲洗。（F组将长春新碱置换为等量生理盐水，其他操作相同）最后一次给药后，分析静脉炎的严重程度。

1.5 观测指标

穿刺点处采集1mL血液，室温放置20min，2000～3000r/min离心20min，分离血清，置于-20℃冰箱内保存。采用ELISA法测定各组标本中bFGF和TNF-α表达含量。

1.6 统计学处理

组间分析单因素方差分析，两两比较时，选用最小显著差异法LSD进行检测。结果用平均值±标准差（Mean±SD）表示。P＜0.05视为具有显著差异，P＜0.01视为具有极其显著差异（*，P＜0.05；**，P＜0.010）。

2.实验结果

表1和图1为各组血清bFGF表达水平，表2和图2为各组血清TNF-α表达水平。结果可见，与F组相比，A组兔子血清bFGF、TNF-α表达水平均显著增加。与A组相比，药物外敷后，B、C、D1、D2、E1、E2组兔子血清bFGF、TNF-α表达水平均有不同程度的降低。200mg/kg α-茄碱霜膏效果优于100mg/kg α-茄碱霜膏；200mg/kg α-卡茄碱霜膏优于100mg/kg α-卡茄碱霜膏。

图1 各组血清bFGF表达水平（n=8）

表1 各组血清bFGF表达水平浓度

表2 各组血清TNF-α表达水平浓度

图2 各组血清TNF-α表达水平（n=8）

3.讨论

3.1 马铃薯糖苷生物碱在防治化疗性静脉炎中的研究

新鲜马铃薯外敷是一种防治输液性静脉炎的常见手段，操作简单、经济实用、疗效良好。其特有的马铃薯糖苷生物碱，有效缓解局部无菌性炎症，缓解痉挛、减少渗出[2]。石喜妹[3]应用不同的外敷方法防治静脉炎，观察发现新鲜马铃薯片持续外敷可有效预防静脉炎的发生，优于硫酸镁外敷。然而，新鲜马铃薯应用不便，有效物质不明确，质量标准可控性差，不能长期保存，缺乏直接的实验依据。

α-茄碱和α-卡茄碱是马铃薯糖苷生物碱的主要形式，具有广泛的药理学活性：①抗病原微生物。能够抑制病原微生物生长，抗病毒、抗真菌、抗癌细胞等[4]；②增强机体免疫力。作为新型的免疫佐剂，增强细胞的免疫反应；③抗炎镇痛作用。对局部水肿情况产生明显的抑制作用，对透明质酸酶活性起抑制作用，提高机体的抗过敏、抗组胺作用等。

3.2 化疗性静脉炎模型兔血清中bFGF及TNF-α表达水平的意义

化疗性静脉炎的血管伴随着各类细胞因子的释放。化学刺激会引起静脉管壁的通透性增加，激活炎症介质对血管内皮造成损害，引起血管内皮细胞凋亡，炎性细胞的浸润。检测静脉炎发展情况的细胞因子主要分为两类，一类是血管生成因子，bFGF、VEGF等；一类是炎症因子，TNF-α、IL-6等。正常血管中存在少量的bFGF和VEGF，当血管受损时，表达会有不同程度增高。黄山[5]等通过检测炎症因子TNF-α来分析冠状动脉血管狭窄及阻塞情况，判断其是否存在功能性的改变。本课题组选择检测血清中bFGF及TNF-α表达水平，来反应局部静脉的炎症程度。

3.3 血清中bFGF和TNF-α表达水平的差异分析

A组作为造模组，局部血清中bFGF和TNF-α表达浓度分别为45.876±2.316pg/ml和67.958±8.887pg/ml远高于F组。两者表达浓度的升高直接反应局部静脉炎的程度。B组硫酸镁湿敷、C组新鲜马铃薯外敷、D组α-茄碱霜膏外涂、E组α-卡茄碱霜膏外涂后，兔耳缘静脉穿刺血清中bFGF和TNF-α表达水平显著低于A组。选用的不同药物外敷，均能在一定程度上控制化疗性静脉炎的局部炎症反应。D组和E组各采用100 mg/kg和200 mg/kg两种不同浓度的糖苷生物碱霜膏外敷，bFGF和TNF-α表达水平显示，高浓度组表达水平低于低浓度组，说明高浓度的马铃薯糖苷生物碱，更有利于控制局部静脉炎的症状。

综上所述，马铃薯糖苷生物碱（α-茄碱和α-卡茄碱）外敷能明显改善兔耳缘静脉化疗性静脉炎的局部症状，有效改善组织发红、肿胀、疼痛、血管硬化等症状，有效控制血清中bFGF和TNF-α的表达水平。相比于新鲜马铃薯外敷，有效物质明确，质量标准可控，能长期保存，对临床防治化疗性静脉炎外敷制剂的开发应用提供新思路。让病人有较好的血管条件去接受化疗计划，保证所制定的化疗方案顺利实施。