某规模化猪场猪伪狂犬病综合诊断研究

陈俊岭

（郏县畜牧局，河南 郏县 467100）

猪伪狂犬病为重要的传染性疾病，会给我国养猪业造成巨大的经济损失。该病可导致初生仔猪腹泻、神经症状（如发抖、角弓反张等），并出现较高的死亡率；怀孕母猪出现流产、死胎等现象；种公猪出现睾丸肿大症状，影响种猪的繁殖性能［1-2］。近年来，由于规模化养猪场对伪狂犬病的防控措施得当，使得该病在部分养殖场得到彻底的净化。但规模化猪场向外引种频繁，若将带毒种猪引进猪场，而猪场内猪群未免疫接种伪狂犬病疫苗，极易导致伪狂犬病在猪场短时间大发生，给该猪场造成难以挽回的经济损失。2019年3月初，某规模化猪场发生疑似猪伪狂犬病，通过临床诊断结合实验室诊断结果，最终判定为猪伪狂犬病野毒感染所致。

1 发病情况及临床症状

某规模化养猪场自2017年判定为猪伪狂犬病毒阴性猪场，其后未对猪群免疫接种猪伪狂犬病疫苗。自2018年9月引种以来，猪场陆续发生母猪流产、死胎等案例，且发生率逐渐上升。此外，部分仔猪出现较严重的腹泻和神经症状，最终以死亡告终。2019年5月初，猪场内很多怀孕母猪出现流产、产弱仔等临床症状，引进的种公猪表观出睾丸肿大、精神萎靡等症状。此外，大批仔猪体温升高、共济失调、呼吸困难等，部分仔猪腹泻等。直至5月中旬，已经有大批仔猪死亡，给养殖场造成巨大的经济损失。

2 病理变化

分别对死亡不久和濒临死亡的仔猪进行解剖，观察病理变化。病猪淋巴结肿大，扁桃体可见明显的化脓坏死现象；肺部表面有片状出血，肾脏表面有出血点，胃肠道黏膜有出血，为卡他性出血症状；此外，其脑膜充血、明显水肿。

根据其发病特点、临床症状和病理变化，笔者初步判断该猪群感染猪伪狂犬病毒，但不能排除其他病原感，如细菌或其他病毒等。

3 实验室诊断

3.1 细菌分离与鉴定

无菌采集病猪的脑部、肺部、肝脏和肾脏及淋巴结病理变化明显的部分，采取平板划线法分别将病料接种与兔鲜血琼脂培养基和普通琼脂培养基上，并在37℃恒温箱内培养，分别在24 h和48 h观察培养基表面是否生长菌落及菌落形态。结果显示，分别接种以上病料的2种琼脂培养基表面均未出现菌落，因此可初步确定病猪未感染细菌性疾病。

3.2 血清学诊断

颈静脉采集病猪血液10份，每份3 mL，将血液样品于室温静置4 h，吸取上清置于无菌离心管内，将离心管低速离心（3 000 r/min）离心5 min，应用猪伪狂犬病毒gE蛋白ELISA检测试剂盒分别对以上血清样品进行抗体检测。结果显示，10份血清样品中有8份检测为伪狂犬病毒gE蛋白抗体阳性，提示该猪群感染伪狂犬病毒野毒。

3.3 病原诊断

为了确定该猪群是否感染其他病毒，笔者通过RT—PCR技术和PCR技术对组织中猪伪狂犬病毒、猪蓝耳病毒、猪圆环病毒和猪细小病毒进行病原检测。结果发现，除了猪伪狂犬病毒gE基因检测为阳性外，其他病原均未检出，病原检测结果最终确定该猪群感染猪伪狂犬病毒。

4 讨论

猪伪狂犬病是由猪伪狂犬病毒（或猪疱疹I型病毒）感染猪所引起的一类强感染性传染病，各生长阶段猪群对该病毒均易感，其中以怀孕母猪和仔猪感染该病后临床症状最为明显，怀孕母猪感染该病后主要临床症状为流产、死胎等，而发病仔猪则出现腹泻、呕吐和明显的神经症状。市面上已经有多种针对猪伪狂犬病毒开发的弱毒疫苗或灭活苗，使用有效的疫苗和生物净化措施完全可以净化猪伪狂犬病毒。目前，很多猪场通过以上措施成功净化了猪伪狂犬病毒。然而，很多猪场出现猪伪狂犬病毒净化后猪群又感染野毒的案例，本文所服务的规模化猪场也是如此，由于引种过程中未对种猪进行疫病监测，导致野毒通过引进种猪带入猪场，而猪场内猪群未注射猪伪狂犬病相应疫苗，无法抵抗野毒的感染，最终导致该病在猪场内短时间大发生。

该病诊断一般包括如下3个方面，一是初步诊断。新生仔猪及4周龄内仔猪常突然发病，高烧在41℃以上，间有呕吐、腹泻及神经症状，出现运动失调、兴奋不安、身体各部分肌肉痉挛等症状，随后麻痹死亡，病程一两天，死亡率很高。4周龄左右的猪发病后只有轻微症状，有轻热、呼吸困难，时有出现腹泻和呕吐，几天内可完全康复，但也有部分猪出现神经症状后死亡。妊娠母猪常发生流产、死胎或木乃伊胎，流产发生率约为50%。成年猪一般隐性感染，有时有轻度呼吸系统症状，不吃、呕吐、委顿等。由于猪的病症复杂，若出现以上症状怀疑是伪狂犬病时，应进一步进行实验室诊断。二是实验室诊断。采用猪扁桃体、咽喉黏膜、脑、延脑、小脑和海马角等，检查细胞中有无核内包涵体。将病料接种家兔，两三天后局部出现奇痒及全身症状，常在奇痒出现后一两天病状转为麻痹而死亡。三是血清学诊断。可用直接免疫荧光法检查脑、扁桃体的压片或冰冻切片，发现核内包涵体出现荧光，有诊断价值。检查血清抗体可采用中和试验、间接血凝抑制试验、琼脂扩散试验、补体结合试验和酶联免疫吸附试验等，其中血清中和试验较为敏感、准确。

本次研究通过对该猪场发病猪群发病特点、临床和病理变化、实验室诊断结果进行总结，最终判定该猪场发生猪伪狂犬病，且为野毒感染所致。由于目前尚无治疗该病的药物，所以对于该病以防控为主，特别是针对某些伪狂犬病毒阴性猪场，应定期对猪群进行血清学或病原监测，同时加强饲养管理，提高猪群的免疫力。