血细胞分析仪检测血小板结果假性降低的原因及纠正探讨

史融冰 丁文艳

【摘要】目的：探讨血细胞分析仪检测血小板结果假性降低的主要原因以及其纠正方法。方法：选择2017年9月至2018年3月在我院进行血小板计数检测2008例样本为观察对象，均采用Sysmex XS-800i五分类血细胞分析仪进行检测，对检测结果PLT<100×109/L且无血小板减少症状的样本进行涂片瑞氏染色和手工显微镜计数复检，并根据实验室复检标准分析血小板计数假性减少的原因和纠正方法。结果：2008例样本中有66例出现血小板计数假性降低，其中，24例因EDTA依赖而出现假性降低，4例为血小板卫星现象，8例冷凝集，21例巨大血小板现象，9例为标本采集不当。结论：血细胞分析仪检测血小板计数具有一定的局限性，极易受抗凝剂、血小板形态缺陷、标本采集等因素影响，因此，临床应规范实验室检测操作流程，并对PLT计数<100×109/L样本严格按照复检规则进行复查，最大限度避免血小板假性降低发生，提高检测的准确性，以为临床相关疾病诊断提供准确可靠的依据。

【关键词】血细胞分析仪;血小板计数;假性降低;原因;纠正方法

【中图分类号】R181.3+2【文献标识码】B【文章编号】2095-6851（2019）01-238-01

血常规检查是临床疾病诊断及疗效评估的常用辅助手段，可让医师了解到患者血清中血细胞状态、血细胞数量以及血小板计数等情况。其中，血小板计数检测结果是临床诊断止血性、血栓性疾病的主要依据。因此，准确检测血小板计数对临床准确诊治疾病具有重要的意义。近年，随着检测技术的不断发展，血细胞分析仪因具有操作简单、检测快速、重复性强等优点而广泛应用于血小板计数检测中，但是在实际临床中受检测原理、仪器局限性、操作误差等不稳定因素影响，极易出现假性血小板减少，引起疾病误诊误治[1]。现为进一步提高血小板计数检测的准确性，本文将重点分析血细胞分析仪检测血小板结果假性降低的主要原因，并针对性提出纠正方法。

1 资料和方法

1.1 研究对象

选择2017年9月至2018年3月在我院进行血小板计数检测2008例样本为观察对象，其年龄在1d～48岁，平均年龄26岁，均采用Sysmex XS-800i五分类血细胞分析仪进行检测，对检测结果PLT<100×109/L且无血小板减少症状体征的66例样本进行涂片瑞氏染色和手工显微镜计数复检。

1.2 方法

（1）血细胞分析仪检测：2008例血样本均置于含有乙二胺四乙酸二钾（EDTA-K2）的抗凝试管中并摇匀，在采集的2h内用Sysmex XS-800i五分类血细胞分析仪进行血小板计数水平检测。（2）复检：对血细胞分析仪检测PLT<100×109/L的样本进行复检，具体参考《全国临床检验操作规程》的要求进行以下操作，①瑞氏染色镜检主要观察血小板的形态结构和分布情况;②血小板稀释液手工显微镜计数。若复检结果与血细胞分析仪检测结果一致的，可打印结果报告，但如果复检结果与细胞分析仪的检测结果不一致，则寻找其原因以及对应的纠正方法。

1.3 统计学方法

选用SPSS24.0软件，计量数据以（x±s）表示，采取t检验。P<0.05，表示差异具统计学意义。

2 结果

2008例样本中有66例出现血小板计数假性降低，占3.29%（66/2008）其中，24例因EDTA依赖而出现假性降低，4例因出现血小板卫星现象，8例因样本冷凝集，21例出现巨大血小板现象，9例为标本采集不当。寻找出影响血小板结果假性降低的原因后予以相应的纠正措施，纠正后的血小板计数结果较纠正前有显著性的差异（p<0.05），具体见表1。

3 讨论

血常规检查是临床检验的基本项目，在疾病诊断、鉴别诊断以及治疗中发挥着重要的作用。其中血小板计数变化与机体的凝血、止血功能、状态有密切的相关性，是机体检测是否存在凝血、止血障碍的主要指标[2]。目前在临床检验中，主要应用血细胞分析仪进行血小板计数检测，具有高效、方便快捷等优势，能够有效提高检验人员的工作效率。但是近年随着检测量的逐年增加，血小板计数出现假性降低的现象越来越多，引起了国内外检测工作者的高度关注。血小板结果假性降低现象不仅会增加不必要的辅助检查，加重患者的经济负担，还会导致误诊误治，给病患的生理、心理带来极大痛苦，造成医疗资源浪费。本研究结果显示2008例样本中有66例出现血小板计数假性降低，占3.29%，且发现其结果假性降低的原因既有人为操作不当，又有仪器、血样本客观原因。

3.1 抗凝剂的影响

国际血液学标准化委员会将乙二胺四乙酸二钾（EDTA-K2）推荐作为血细胞分析仪检测血小板计数的首选抗凝剂，这是因为EDTA-K2能够与血液中的Ca2+相结合形成螯合物，使Ca2+不能发挥凝血作用，防止血样本凝固，避免血小板凝集[3]。但是，近年越来越多的研究报道，在血常规检测中应用EDTA抗凝剂可导致EDTA依赖性假性血小板減少现象，引起疾病误诊误治。相关数据也显示，在我国EDTA依赖性假性血小板减少症的发生率约占0.08%～0.25%，而且随着EDTA-K2抗凝剂的应用越来越广泛，其发生率呈逐年上升的趋势。此现象的具体发生机制仍不十分明确，但大部分学者认为与血小板膜的表面存有一些隐匿性的抗原密切相关，这些抗原可与血样本中的自身抗体结合，造成血小板与纤维蛋白原聚集成团。因此，在临床实际检验中，对于疑似EDTA依赖性假性血小板减少症的样本可通过使用枸椽酸钠抗凝剂来纠正。此外，本研究还有4例血样本因出现“血小板卫星现象”而发生血小板计数假性减少。这主要是由于EDTA-K2能够使血小板膜表面的糖蛋白Ⅱb/Ⅲa与中性粒细胞发生黏附性结合，故在显微镜下可见白细胞周围有血小板黏附，俗称为“卫星现象”，易将其误当成白细胞计数，造成血小板计数检查结果减少。因此，对于血小板计数少于100×109/L的样本需对其进行血涂片复检。

3.2 血样本采集不当

本研究66例血小板计数假性降低样本中有9例是由于标本采集不当所导致的。采集样本时若操作不当易造成血管壁破损，使凝血因子进入到血液样本中产生血凝块导致血小板检测结果偏低;与此同时，当血样本量采集不足（≤1.5ml）时，血细胞分析仪只能吸取一部分的样本，导致全血象计数成比例减少，此外样本被稀释也会使血小板假性降低现象出现。因此，在临床中应加强对护理人员、检验人员进行培训，并做好檢验前质量控制，尽量避免因样本凝集、样本被稀释、样本量不足而引起血小板假性降低，以保证检测结果准确。

3.3 血标本病理因素

本研究结果还显示，有21例样本因血小板形态巨大，8例因样本冷凝集现象而出现血小板假性降低。当受检者伴有高血压、糖尿病、血液系统疾病时可加快血小板的凝集速度或易使血小板的体积偏大。而当血小板的体积超过24fl时，血细胞分析仪无法将其纳入到血小板的计数范围内，使检测的血小板计数显著减少。故当临床遇到此种情况时，可通过采用手工血小板计数法复检来纠正。此外，若受检者血液中存在过高效价的冷凝集素可使血红细胞、血小板发生凝集，造成血细胞分析仪检测到血小板计数明显偏低。因此，对于冷凝集血样本，临床可通过采集前预处理或者采集后温水水浴进行纠正。本研究最后也证实，针对血小板假性降低的原因进行相应的纠正后，受检者的血小板计数结果均较纠正前有显著的改善。

综上，血细胞分析仪检测血小板计数岁具有快捷方便、价格低等优点，但该检查方法无法很好地识别血小板形态以及其凝集情况，极易造成血小板结果假性降低现象出现，进而影响临床疾病诊治。因此，临床应规范实验室检测操作流程，并对PLT计数<100×109/L样本严格按照复检规则进行复查，最大限度避免血小板假性降低发生，提高检测的准确性，以为临床相关疾病诊断提供准确可靠的依据。

参考文献：

[1] 钱兵，尹丹丹.不同血细胞分析仪计数血小板的差异性分析[J].实用医技杂志，2014，21（9）：986-987.

[2] 张红荣.血涂片镜检对血小板假性减少的诊断价值分析[J].河南医学研究，2018，27（9）：1679-1680.

[3] 赵一兵.EDTA-K2依赖性假性血小板减少患者检测分析[J].中国民康医学，2017，29（9）：39-40.