试析畜产品中沙门氏菌的危害及检测方法
2019-02-20寇秋霜马超越关婷婷
秦 娜,柴 磊,寇秋霜,马超越,关婷婷
(1.焦作市畜产品质量安全监测中心,河南 焦作 454003;2.焦作市动物卫生监督所,河南 焦作 454003)
长期以来,沙门氏菌始终是一项世界性问题,尤其在畜产品中更为常见,由其引发的食物中毒概率较高,对人体生命安全构成严重威胁。对此,应对此类细菌的危害程度进行分析,并采取积极有效的检测方法。
1 畜产品中沙门氏菌的危害
1.1 容易引发细菌感染
据调查,自从20世纪80年代后,世界范围内感染沙门氏菌的人数不断增加,尤其是我国的内陆地区,因此类病菌引发的食物中毒已经位居榜首。据统计,我国全部类型的细菌中毒中,因沙门氏菌引发的比例为70~80%,而在引发此类病菌的食品中,有超过90%为肉类食品。此类食品中的营养成分较为丰富,可为沙门氏菌的寄生和繁殖提供有利环境,当人体内摄入此类病菌含量超过(105~106个/g)时,便会引发细菌性感染,在毒素的影响下导致食物中毒。
1.2 细菌来源较广
由沙门氏菌引发的疾病主要为伤寒与急性肠胃炎,其中,鼠伤寒、猪霍乱、肠炎沙门氏菌君属于污染动物性产品,成为人类食物中毒的主要诱因。此类细菌的来源较为广泛,以患病人与动物为主,通过粪便、尿液、乳汁等对饲料、水源等造成污染,尤其是水源与饲料污染,属于此类病菌传播的主要载体。据调查,多种类型的饲料中均存在不同程度的沙门氏菌,特别是鱼粉等动物性饲料,内含此类细菌的数量更多,应引起重视。
1.3 传染性较强
沙门氏菌具有较强的传染性,如鸡白痢、猪霍乱等。通常情况下,畜禽肠道的含菌量较多,当动物患有疾病后,常常出现衰弱、营养不良等情况,自身的抵抗力下降,肠道内的沙门氏菌很容易经过淋巴结进入血液之中,导致动物全身感染此类细菌,严重的情况下甚至会导致死亡[1]。
2 畜产品中沙门氏菌的检测方法
沙门氏菌的类型较多,目前在世界范围内已知的血清型有2000余个,我国当前发现200余个。在科技飞速发展之下,人们已经研制出多种便捷的检测方式,在畜产品安全检测中得到广泛应用。
2.1 生物化学鉴定实验
经过细致的筛选,将大部分非沙门氏菌进行剔除,对此类细菌进行初步鉴定。然后,从每种分离皿培养基中选出5个较为相似的菌落,在平皿中进行划线培养,培养温度设置为36±1℃,共计培养18~24h,采用纯培养物进行生化鉴定。
(1)三糖铁培养基:培养物斜面颜色泛红,低端呈现出黄色,有微微气味,形成硫化氢。当分离到乳糖阳性沙门菌时,三糖铁的斜面颜色变黄。
(2)懒氨酸脱烃反应:将培养物接种完毕后放入液体之中,待其外表呈现紫色后,说明为阳性反应。
(3)尿素酶反应:如若反应为阳性,说明尿素中氨的释放速度较快,使原本的玫红色朝着桃红色转变,然后再变为深粉色,上述反应通常在2~24h内出现。
(4)V-P反应:选取0.2ml的培养物放入灭菌试管之中,将两滴肌酸溶液加入其中,搅拌均匀后将a-奶粉乙醇溶液加入其中,剂量为三滴,充分融合后再将两滴氢氧化钾溶液加入其中,静置15min后颜色为桃红色,说明其为阳性。
2.2 肠杆菌噬菌体诊断
噬菌体对细菌裂解具有一定促进作用,主要的诊断流程分为四步:一是将样本以常规方式进行前增菌,在平皿中进行划线接种,在37℃温度下培养过夜;二是将可疑菌群放入到2ml的胨水管之中,每1ml含有的细菌数量在50~100万个之间;三是在37℃下对营养脂平板进行烘烤,去除表面水分,当平板上的菌体被烤干后,用滴管将噬菌体加入其中;四是对平板进行培养6h后观察,根据噬菌体裂解情况得出检测结果。
2.3 细胞分子生物学技术
(1)核酸探针:现阶段,沙门氏菌探针已经对鼠伤寒菌株的染色体进行克隆,并将其应用到食品安全检测之中。早在20世纪80年代,核糖体核糖核酸探针便已经被研发出来,在此基础上,以靶序列为标准对异性微生物进行探测,为细菌分类提供新路径。
(2)PCR技术:该项技术具有方便快捷、敏感性强等特征,目前在微生物检测中得到普及,特别对于困难细菌检测来说,具有无可替代的优势和效果,可使细菌鉴定准确性得到显著提升。
(3)噬菌体裂解:在对沙门氏菌快速检验过程中,对100个菌株进行裂解实验,其中有30株细菌全部为阳性,剩余非此类细菌为阴性。实验表明,沙门菌的裂解概率在95%~99.6%之间,误差较低,检测结果十分高效可靠。
3 结论
综上所述,沙门氏菌具有来源广、传染性强、易感染等特征,可对动物和人体健康构成较大威胁,需要采取科学有效的措施进行解决,如生物化学鉴定实验、肠杆菌噬菌体诊断、细胞分子生物学技术等,使此类细菌被有效识别和控制,保障畜产品安全,维护人类生命健康。