原发性肾病综合征中性粒细胞明胶酶相关脂质转运蛋白的表达及临床意义

徐海燕,刘凌,李玉平,王旭光,刘翻利,金翠萍，王晓峰，张敏，陈琼，王颖，高桂凤

DOI：10.16662/j.cnki.1674-0742.2019.35.196

[摘要] 目的 通過检测原发性肾病综合征（PNS）患者血、尿中性粒细胞明胶酶相关脂质转运蛋白（NGAL），分析其与病理类型及临床指标的关系。 方法 方便选取2015—2018年该院50例PNS患者，根据肾活检病理结果分组，根据有无急性肾小管坏死（ATN）分急性肾损伤（AKl）组及非AKI组，25名例健康体检者作为正常对照组，检测血、尿NGAL浓度，观察NGAL在NS不同病理类型的表达水平;同时检测血白蛋白、血肌酐、24 h尿蛋白定量等临床指标。观察NGAL的变化及与临床指标的关系。结果 AKI组患者血、尿NGAL水平[（176.75±57.31）ng/mL， （241.72±78.49）ng/mL]高于非AKI组[（132.78±55.69）ng/mL，（189.36±60.10）ng/mL]及对照组[（83.41±23.45）ng/mL，（38.73±24.58）ng/mL]（t=2.085，2.328，6.305， 11.379，P=0.043，0.025，0.000，0.000）;病理类型不同，血、尿NGAL表达水平不同：其中膜性肾病组[（169.98±50.04）ng/mL，（220.84±67.24）ng/mL及局灶节段硬化组[（289.8±94.58）ng/mL，（296.14±76.22）ng/mL]较微小病变组NGAL水平[（116.63±48.55ng/mL，（173.68±63.24）ng/mL]升高（t=3.364，3.042，6.085，4.051，P=0.004，0.048，0.000，0.001）。血、尿NGAL与24 h尿蛋白定量、血尿素氮和血肌酐呈正相关（r=0.274、0.288;0.113、0.129;0.310、0.525，P<0.05） ，与血白蛋白呈负相关（r=-0.255，-0.733，P<0.05）。结论  血、尿 NGAL 可能作为早期判断PNS并发急性肾损伤的敏感、无创指标，一定程度下可预测病理类型。

[关键词] 中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白;肾病综合征;急性肾损伤

[中图分类号] R325          [文献标识码] A          [文章编号] 1674-0742（2019）12（b）-0196-03

Expression and Significance of Neutrophil Gelatinase-associated Lipocalin in Patients with Nephrotic Sydrome

XU Hai-yan， LIU Ling， LI Yu-ping， WANG Xu-guang， LIU Fan-li， JIN Cui-ping， WANG Xiao-feng， ZHANG Min， CHEN Qiong， WANG Ying， GAO Gui-feng

Department of Nephrology， Bayannaoer Hospital， Inner Mongolia， Bayannaoer， Inner Mongolia， 015002 China

[Abstract] Objective To detect the significance of Neutrophil gelatinase associated lipocalin（ NGAL） level of the patients with primary nephrotic syndrome（PNS） and the correlation with the renal pathological type and the clinical indicators. Methods Convenient selected fifty PNS patients who were in the hospital from 2015 to 2018 were selected in the study and divided according to the pathological results. Serum samples from 25 healthy persons was used as controls.The levels of NGAL were detected by ELISA. At the same time， albumin， serum creatinine and 24-hour urine protein were measured. The changes of NGAL and its relationship with serum creatinine， urine protein were observed. Results The blood and urine NGAL levels [（176.75±57.31）ng/mL， （241.72±78.49）ng/mL] in the AKI group were higher than those in the non-AKI group[（132.78±55.69）ng/mL， （189.36±60.10）ng/mL] and the control group[（83.41±23.45）ng/mL， （38.73±24.58）ng/mL] the difference was statistically significant（t=2.085， 2.328， 6.305， 11.379， P=0.043， 0.025， 0.000， 0.000）; different pathological types， different levels of blood and urine NGAL expression： membranous nephropathy group[（169.98±50.04）ng/mL， （220.84±67.24）ng/mL] and focal segmental sclerosis group[（289.8±94.58ng/mL， （296.14±76.22）ng/mL] compared with NGAL level in the minimal lesion group [（116.63±48.55ng/mL[（173.68±63.24）ng/mL] increased the difference was statistically significant（t=3.364， 3.042， 6.085， 4.051， P=0.004， 0.048， 0.000， 0.001）.Blood and urine NGAL were positively correlated with 24 h urine protein quantitation， blood urea nitrogen and serum creatinine（r=0.274， 0.288， 0.113， 0.129; 0.310， 0.525， P<0.05）， and negative with albumin. Correlation （r=-0.255，-0.733，P<0.05）. Conclusion The level of NGAL can be used as one of the sensitive indexes for early and non- invasive detection ofPNS with AKI.

[Key words] Neutrophil gelatinase-associated lipocalin; Nephrotic syndrome;Acute kidney injury

急性肾损伤（Acute Kidney Injury， AKI）是原发性肾病综合征（Primary Nephritic Syndrome， PNS）临床上常见且危重并发症之一。可发生在病程中的任何阶段。PNS合并AKI时肾脏病理主要表现为急性肾小管坏死（Acute Tubular Necrosis， ATN）和肾间质水肿。如能及早诊断并干预治疗，肾脏病变有可能恢复，若不及时治疗，则会导致不可逆的终末期肾病的发生。2010年，改善全球肾脏病预后组织（Kidney Disease： Improving Global Outcomes， KDIGO）突出强调了AKI早期诊断及干预治疗的重要性。其中把血清肌酐（Serum creatinine，Scr）做为诊断的主要指标。然而，Scr受许多因素的影响，无法早期准确反映肾功能的变化。肾活检是诊断ATN的金标准，但肾穿刺是有创并具有风险性的检查，临床应用具有一定的局限性，且基层医院无法行此项操作，因此寻找早期反映AKI的无创、特异性指标对早期诊断PNS合并AKI具有重大意义。NGAL可成为反映PNS患者AKI的敏感指标，能够动态监测，便于观察患者病情变化[1]。但在肾病综合征中的表达情况、与病理类型的关系目前研究较少。

该文通过检测该院2015—2018年50例PNS患者血、尿NGAL的水平，探讨其与原发性肾病综合征不同病理类型及临床指标的关系，从而为PNS合并AKI的早期诊断提供帮助，报道如下。

1  资料与方法

1.1  一般资料

方便选取该院50例初发、初治原发性肾病综合征患者为肾病组。所有病例均符合以下条件：符合肾病综合征诊断标准：血浆白蛋白<30 g/L，24 h尿蛋白定量>3.5 g;排除糖尿病肾病、紫癜性肾炎、乙肝病毒相关性肾炎、狼疮性肾炎等继发性肾脏损害;无严重肝肾疾病、甲状腺疾病、白细胞数异常、心功能不全、恶性肿瘤等。患者未服用糖皮质激素、免疫抑制剂、抗凝剂等药物。其中男27例，女23例，年龄22～70岁，平均年龄 （48.34±13.04）岁。根据肾脏病理有无急性肾小管坏死（ATN）分为2组AKI组：8例和非AKI组42例;根据病理类型分为，膜性肾病（membranousnephropathy  MN ） 24 例，微小病变（minimaichangedisease MCD ）18例，局灶节段性肾小球硬化（focal segmental glomerulosclerosis FSGS）组8例。随机选取患者年龄匹配的健康体检者25名为正常对照组，近期无肝肾疾病、无心血管疾病，无感染史、无糖尿病，其中男13名，女12名，年龄25～72岁，平均年龄 （42.58±14.35）岁。两组间年龄、性别，差异无统计学意义（P>0.05）。该研究经伦理委员会批准，且受试者知情同意并签署知情同意书。

1.2  方法

采用ELISA法检测所有研究对象血清、尿NGAL水平，人lipocalin2（NGAL）ELISA试剂盒来自上海西唐生物有限公司，操作严格按照试剂盒说明书执行。同时由本院实验室检测血白蛋白、血肌酐（SCR）、尿素氮（BUN）、血脂、24 h尿蛋白定量（UTP）等临床指标。

1.3  统计方法

数据应用SPSS 20.0统计学软件进行分析，其中计数资料（%）进行χ2检验，计量资料（x±s）进行t检验，P<0.05为差异有統计学意义。

2  结果

2.1  一般资料比较

肾病组及对照组一般资料比较：两组例数、性别、年龄差异无统计学意义（P>0.05）;肾病组血ALB水平低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）;Scr、UTP水平高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。AKI 组与非AKI组一般资料，差异无统计学意义（P>0.05），见表1。

表1 肾病组及对照组一般临床资料（x±s）

注：△与对照组相比P<0.05

2.2  各病理类型组血、尿NGAL的比较

PNS组患者血、尿NGAL水平高于对照组，且AKI组高于非AKI组（P<0.05），差异有统计学意义（P<0.05）。患者各病理类型之间：MN组及FSGS组血、尿NGAL水平高于MCD组，差异有统计学意义（P<0.05）。而与MN组比，FSGS组高于MN组，差异有统计学意义（P<0.05），见表2、表3。

表2   AKI组，非AKI组和对照组血、尿NGAL水平[（x±s），ng/mL]

注：△与对照组相比P<0.05，*与非AKI组相比P<0.05

表3   不同病理类型NGAL水平（x±s）

注：△与MCD组比较，P<0.05;与MN组比较，*P<0.05

2.3  血、尿NGAL与临床资料的相关性

PNS患者血、尿NGAL水平与BUN、 Scr、UTP呈正相关，与血ALB呈负相关，见表4。

表4   NGAL 与临床指标的关系

3  讨论

NS合并 AKI发病率约 2% ～11%[2]。对AKI早期诊断，早期治疗和降低死亡率具有重要意义。有学者提出某些生物学标志物可以判断肾脏疾病的进展、恢复过程、预后[3]。

中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白（neutrophil gelatinase associated lipocalin，NGAL）属于脂质运载蛋白超家族成员，为急性肾损伤的生物标志物[4]。正常情况下，NGAL主要表达于近端肾小管，在肾脏NGAL呈低表达。病理情况下NGAL由肾脏大量表达，尤其在缺血或肾毒性时，在近端肾小管上皮细胞表达更多[5]。NGAL是诊断 AKI 灵敏、特异、无创的生物学指标之一。有数据[6]表明NGAL水平对于NS合并AKI的诊断及疾病预测有重要价值。张颖等[1]发现NGAL不仅可作为反映PNS患者AKI的敏感指标，在一定程度下可评价肾小管间质病变程度。

该实验中，PNS合并AKI时血、尿NGAL表达水平为[（176.75±57.31）ng/mL， （241.72±78.49）ng/mL]，高于不合并AKI组的NGAL水平[（132.78±55.69）ng/mL，（189.36±60.10）ng/mL]，而两组间血肌酐[（87.88±17.74）μmol/L， （75.97±18.06）μmol/L]，差异无统计学意义（P>0.05），说明血尿NGAL比血肌酐更敏感、可靠地预测AKI的发生，能够作为诊断早期急性肾损伤的敏感生物学指标;该研究相关分析结果显示，血、尿NGAL水平表达与Scr、BUN呈正相关，与血ALB呈负相关（r=-0.255，-0.733，P<0.05），与刘静等[7]相关研究一致，其研究显示PNS合并ATN时血清及肾组织NGAL水平较不合并ATN时明显升高，差异有统计学意义（P<0.05），并对PNS合并ATN患者分析发现血NGAL水平100%升高，仅有23%血肌酐值升高，表明NGAL诊断AKI时早于血肌酐，与肾小球功能密切相关。

该研究中尿NGAL在MCD、MN、FSGS表达水平分别为（173.68±63.24）ng/mL，（220.84±67.24）ng/mL，（296.14±76.22）ng/mL，呈依次升高趋势，同雷文娟等[8]研究结果相似，其研究表明，尿NGAL在MCD、MN、FSGS表达水平为21.31 μg/mL，23.5 μg/mL，53.88 μg/mL，以FSGS升高最明显，与该文研究结果一致。可见NGAL在肾病综合征不同病理类型表达不同，考虑与肾病综合征不同病理类型蛋白尿发生机制不同及肾小管间质损害程度不同有关。PNS患者尿NGAL水平与肾小管萎缩程度呈正相关，与肾小球硬化、蛋白尿、GFR下降的程度相关[9]。NGAL参与尿蛋白激活NF-κB途径，造成肾小球炎症反应及肾小管间质损伤[10]。但该本试验样本量小，故还有待于扩大样本量更进一步研究证实。

该研究发现相关分析表明NGAL水平与尿蛋白定量呈正相关，PNS因遗传、免疫、感染、药物等因素导致肾小球滤过膜损伤，血浆蛋白从尿中大量丢失，形成大量蛋白尿，而NGAL参与炎症、应激等情况下的免疫反应。国内学者[11]发现NGAL水平与尿蛋白定量呈正相关，可反应肾脏损伤程度，从而证实蛋白尿是导致肾小管间质病变的因素之一。

综上所述，血、尿 NGAL可能作为早期判断PNS并发急性肾损伤的敏感、无创指标。在无法开展的肾活检的基层医院，在一定程度上可预测病理类型。

[参考文献]

[1]  张颖，唐敏，施婧，等.原发性肾病综合征患者中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的变化及意义[J].中华肾脏病杂志，2013，29（7）：493-497.

[2]  朱斌，张美娟，袭怡，等.原发性肾病综合征合并急性肾损伤危险因素分析的病例对照研究[C]//中国中西医结合学会肾脏疾病专业委员会.2016年中国中西医结合学会肾脏疾病专业委员会学术年会论文摘要編.北京：中国中西医结合学会肾脏疾病专业委员会，2016.

[3]  李秀元，高金霞，韩鹏飞，等.血清NGAL水平变化在大鼠不同程度急性肾损伤中的早期诊断价值[J].中国临床新医学，2019，12（4）：392-395.

[4]  刘艳，葛斌，徐革，等.血清NGAL水平对2型糖尿病肾脏疾病的筛查价值[J].郑州大学学报，2019，54（3）：454-457.

[5]  张莹，张碧丽，王丹.NGAL在新生儿肾损伤中的研究进展[J].医学综述，2019，25（4）：648-653.

[6]  张铿.原发性肾病综合征患者尿液NGAL、KIM-1与IL-18检测分析[J].深圳中西医结合杂志，2017，27（4）：56-57.

[7]  刘静，李紹梅，薛雯，等.原发性肾病综合征并发急性肾损伤患者血清及肾组织中NGAL的表达及意义[J].中国病理生理杂志，2012，28（11）：1982-1985.

[8]  雷文娟，张铿，潘庆军，等.原发性肾病综合征患者急性肾损伤标志物的检测及其意义[J].中国中西医结合肾病杂志，2016，17（6）：499-501.

[9]  Proletov lalu，Saganova ES，Galkina OV，et al.Diagnostic value of cystatin C and neutrophil gelatinase associated lipocalin in primary glomerulopathies[J].Ter Arkh，2013，85（6）：10-16.

[10]  甘思雨.益肾活血法干预小儿原发性肾病综合征对NGAL及L-FABP的影响[D].福州：福建中医药大学，2017.

[11]  刘洪，冯小兰，袁晓玲，等.糖尿病患者血清NGAL、MCP-1和TGF-β1的表达及意义[J].河北医药，2019，41（2）：186-189.

（收稿日期：2019-09-19）