CPEB4在透明细胞性肾细胞癌中的表达及其对细胞株增殖、凋亡和侵袭力的影响

王 静 周 梅 王书芹 毕 超 吕 辉 禤瑞霞 汪 芸 包贵贤

广东省中山市中医院病理科，广东中山 528400

肾细胞癌（RCC）是肾小管上皮细胞中的恶性肿瘤，较为常见的病理类型是透明细胞性肾细胞癌（CCRCC），属于泌尿系统中较为常见的恶性肿瘤，每年发病逐年出现递增趋势，对人类健康造成了一定威胁[1]。但其对传统放化疗并不敏感，大多患者在确诊时已经发生了远处转移，目前首选治疗方式为手术切除，但这类患者错过了最佳手术时机，传统靶向药物价格较高，因此需要选择新型的靶向药物治疗，在临床中具有重要意义[2]。而肿瘤的出现时多基因参与的过程，包括原癌基因的激活、凋亡与侵袭，是正常细胞恶性转变的过程，在基因的表达中具有重要意义，与癌变存在重要关系[3]。目前多项研究证实CPEB4在肿瘤细胞中存在异常表达，在基因转录中存在重要的作用[4]。本文通过将CPEB4纳入其中，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

将80例我院2016年3月～2018年3月收治的80例透明细胞性肾细胞癌患者作为研究组，选取同期我院诊治的肿瘤周围正常肾组织50例为对照组。纳入标准：（1）所有患者均经过经验病理医师确诊；（2）均为首次治疗，研究前未进行化放疗；（3）知情本文研究且愿意参加。排除标准：（1）病检组织过少，影响检测结果；（2）合并其他恶性肿瘤者；（3）难以积极沟通交流；（4）临床资料不完善者。其中研究组：女41例，男39例，年龄38～70岁，平均（45.6±5.5）岁；淋巴结转移者45例。其中Ⅰ期20例：女10例，男10例，年龄38～70岁，平均（45.2±5.2）岁。Ⅱ期18例：女9例，男9例，年龄38～70岁，平均（45.5±5.4）岁。Ⅲ期20例：女11例，男9例，年龄38～70岁，平均（46.6±5.7）岁。Ⅳ期22例：女12例，男10例，年龄38～70岁，平均（45.1±5.5）岁。对照组：女24例，男26例，年龄38～70岁，平均（45.2±5.3）岁。上述患者一般资料之间比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

用免疫组化的方法，在广州地区肾细胞癌石蜡组织中，检测CPEB4蛋白的表达。使用石蜡切片脱蜡、水化后用PBS冲洗3次，用高压锅对组织抗原进行修复，加入3%过氧化氢，以阻断内源性过氧化物酶的活性，并PBS冲洗3次，滴加CPEB4蛋白第一抗体，4℃过夜。磷酸缓冲盐溶液（PBS）冲洗3次，滴加第二抗体，室温孵育，PBS冲洗3次，滴加链霉素生物素-过氧化物酶，室温孵育，PBS冲洗3次，滴加DAB溶液，自来水冲洗，苏木素复染，0.1%氯化氢（HCL）分化，PBS冲洗返蓝[5]。

1.3 观察指标

观察两组患者CPEB4表达、细胞存活与迁移距离，及CPEB4在所有患者中的阳性率；并记录研究组不同患者的CPEB4表达情况[6]。

1.4 统计学处理

采用SPSS19.0统计软件对本研究数据进行分析，计量资料以（）表示，采用t检验，计数资料以[n（%）]表示，采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组间CPEB4表达、细胞存活与迁移距离比较

研究组CPEB4表达高于对照组，且对照组细胞存活率高于研究组，迁移距离低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 两组间CPEB4表达、细胞存活、迁移距离比较

表1 两组间CPEB4表达、细胞存活、迁移距离比较

组别 n CPEB4 细胞存活率 迁移距离（cm）对照组 50 0.069±0.011 1.05±0.06 0.68±0.10研究组 80 0.658±0.125 0.52±0.12 0.35±0.05 t-33.191 29.016 24.977 P 0.000 0.000 0.000

2.2 CPEB4在所有患者中的阳性率

其中对照组CPEB4阳性率为10.00%，Ⅳ组患者阳性率最高为100.00%，随着级别升高患者阳性率随之升高，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 CPEB4在所有患者中的阳性率

2.3 研究组不同级别之间的CPEB4表达

Ⅲ～Ⅳ期CPEB4表达高于Ⅰ～Ⅱ期，差异有统计学意义（P＜0.05），见表3。

表3 研究组不同级别之间的CPEB4表达

表3 研究组不同级别之间的CPEB4表达

组别 n CPEB4Ⅰ～Ⅱ期 38 0.423±0.025Ⅲ～Ⅳ期 42 0.746±0.112 t-17.380 P 0.000

2.4 研究组不同性别之间的CPEB4表达

研究组男女性别之间CPEB4表达差异无统计学意义（P＞0.05），见表4。

表4 研究组不同性别之间的CPEB4表达

表4 研究组不同性别之间的CPEB4表达

性别 n CPEB4女性 41 0.725±0.116男性 39 0.726±0.114 t-0.039 P 0.969

2.5 研究组淋巴结转移者的CPEB4表达

淋巴结转移者CPEB4表达高于未转移，差异有统计学意义（P＜0.05），见表5。

表5 研究组淋巴结转移者CPEB4表达

表5 研究组淋巴结转移者CPEB4表达

组别 n CPEB4淋巴结转移者 45 0.711±0.114未转移 35 0.224±0.111 t 19.173 P 0.000

3 讨论

透明细胞性肾细胞癌对于传统的治疗难以达到理想的状态，首选的治疗方式仅为手术治疗，但大多出现错过了手术时机，使得治疗效果并不理想[7-8]。在肿瘤发展期间，基因的异常表达与细胞的发展之间存在一定联系，是正常细胞恶性转变的基础，可正式转录后水平的调控，对基因具有重要的作用，与癌变也存在重要关系[9]。CPEB4对基因转录后调节起到关键作用，可介导干细胞发育、细胞分化、衰老过程，目前已经不断有研究证实，其在肿瘤细胞中较为异常，但关于其在肿瘤中的作用机制研究较少[10-11]。

本文通过将CPEB4表达纳入研究，结果显示研究组CPEB4表达高于对照组，且对照组细胞存活率高于研究组，迁移距离低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。对照组CPEB4阳性率为10.00%，Ⅳ组患者阳性率最高为100.00%，随着级别升高患者阳性率随之升高，淋巴结转移者CPEB4表达高于未转移，Ⅲ～Ⅳ期CPEB4表达高于Ⅰ～Ⅱ期。研究组男女性别之间CPEB4表达差异无统计学意义（P＞0.05）。CPEB4属于神经细胞存活蛋白，在肿瘤发展期间中，对基因转录后调节具有重要作用，可促进肿瘤细胞的生长与血管的生成侵袭[12]。目前已经有多项研究证实CPEB4基因可引起基因组变化，诱导基因组的不稳定发生，表明CPEB4蛋白在癌症发生期间出现一定作用，可能成为新的治疗靶点[13]。目前关于CPEB的研究开始转向促肿瘤发生，而CPEB在多个组织与肿瘤中出现高度表达，且部分会出现重叠。CPEB蛋白家族生物功能不止在于调节减数分裂和早期胚胎发育，在肿瘤的发展与血管生成中起到重要作用[14]。但临床仍需要不断研究CPEBs的靶向基因问题，而随着研究的不断深入，CPEB4蛋白可称为肿瘤领域新的发展潜力的诊断治疗工具[15]。但由于本研究样本容量有限，未及时进行后期随访调查，难以进一步证实该研究的准确性；后续可扩大样本容量，使得研究更加准确，明确患者治疗诊断基础。而对照组细胞存活率高于研究组，迁移距离低于对照组，能够说明CPEB的出现对细胞存在一定的侵袭力，加快了患者细胞凋亡情况。

综上所述，CPEB4在透明透明细胞性肾细胞癌中表达较高，且级别越高患者CPEB4表达越高，为后期临床治疗奠定了基础，值得应用。