高效液相色谱法在畜产品检测中的应用微探

2019-02-12寇秋霜马超越关婷婷

兽医导刊 2019年16期

秦娜寇秋霜马超越关婷婷

(1.焦作市畜产品质量安全监测中心,河南焦作 454003;2.焦作市动物卫生监督所,河南焦作 454003)

1 高效液相色谱法概述

高效液相色谱法作为畜产品安全检测的重要分析方法，需要在高压条件下进行样品检测，使样品组分在固定相和流动相间多次连续分配，从而利用两相的不同分配系数和吸附力实现样品分离。作为化学分离分析方法的一种，高效液相色谱法具有较高分析速度，能够实现自动化操作，结果的灵敏度较高。

2 高效液相色谱法在畜产品检测中的应用

2.1 在兽药残留检测中的应用

未能科学饲养畜禽，将导致兽药使用量超出需求量，不仅无法改善畜产品品质和预防动物疾病，还将造成畜产品中残留过多未能代谢的药物及其代谢中间产物，经人体食用后将给消费者身体健康带来较大危害。按照国家标准SN/T 1751.3-2011，需要采用高效液相色谱法完成动物源性食品中喹诺酮类药物残留检测[1]。在四环素类兽药检测上，可以联合采用高效液相色谱法与质谱法。目前在猪肉、鸡肉、鸡蛋等畜产品兽药残留检测中，都可以采用高效液相色谱法，如在鸡肉中四环素类抗生素检测上，可以采用乙腈和磷酸二氢钠溶液作为流动相，利用前超声波脱气，能够快速完成兽药残留检测，并且检测结果可靠、准确性高。在家禽寄生虫病防治上，常采用伊维菌素，属于广谱抗寄生虫药。对动物血清中的伊维菌素进行测定，可以采用245nm紫外检测波长，配合采用甲醇一水流动相，方法检出限最低能够达到0.01mg/L，样品回收率在94%-100%之间。

2.2 在违禁物检测中的应用

为谋取暴利，畜产品中也会被加入“瘦肉精”、“苏丹红”等违禁物。而食用大量残留在畜产品中的“瘦肉精”，将导致人出现恶心、心慌等症状，患有甲亢、高血压等疾病的人甚至会引发疾病，严重时将导致人死亡。“瘦肉精”实际为羟甲叔丁肾上腺素，在饲料中添加能够加速动物生长，促使动物肌体瘦肉率得到提高，在动物内脏和组织中会发生蓄积性残留，带有严重毒副作用。应用高效液相色谱法进行猪肉中“瘦肉精”的检测，可以采用磷酸二氢钠和甲醇作为流动相，并且使用紫外线检测器进行检测，只需较短时间就能完成样品检测[2]。在可食用性动物产品进出口方面，将呋喃唑酮列为禁用药，因为该种物质具有较强致癌性。在鸡蛋中呋喃唑酮检测上，应用基体固相扩散和固相萃取技术完成呋喃唑酮提取和净化后，可以利用高效液相色谱法实现分离检测，回收率能够达到80%-91%，结果具有良好重现性。

2.3 在农药残留检测中的应用

在畜禽养殖期间，残留农药将通过植物果实、水等途径到达畜禽体内，超出一定量后将在畜产品中蓄积，被人食用后容易诱发糖尿病、心脑血管疾病等各种疾病。从畜产品检测情况来看，可能残留的农药包含拟除虫菊酯、有机磷等多种，可以采用高效液相色谱法进行检测。在有机磷农药检测上，相较于传统的气相色谱法，高效液相色谱法能够使样品热不稳定问题得到解决，检测结果精密度高，并且拥有较好重复性。在拟除虫菊酯农药残留检测上，常用灵敏度较高的气相色谱-质谱法，但衍生试剂拥有较大毒性，并且过程繁琐。采用高效液相色谱法，可以利用固相萃取技术完成样品萃取，然后利用Zorbox SB C18色谱柱进行分离检测，方法检出限能够达到0.78μg/ml，在畜产品农药残留检测中应用可以降低技术成本。但从总体来看，高效液相色谱法多与气相色谱法及质谱法联合使用，能够一次完成数百种残留农药的检测。

2.4 在有害物质检测中的应用

在畜产品加工期间，可能引入有害的外源性物质，并且产品本身可能存在生物毒素，如黄曲霉毒素等，从而给产品安全带来威胁。针对外源性物质进行检测，采用高效液相色谱法能够完成肉鸭加工表皮残留松香的检测，先利用固相萃取法完成样品纯化和富集，然后将纵酸当成是标记物，利用薄层色谱法完成松香残留物检测，处理过程相对复杂。在黄曲霉毒素检测中，可以利用流动相实现甲醇一水提取液净化处理，样品回收率能够达到80%以上，因此相较于商业检测方法费用更低。在霉菌霉素检测中，可以采用高效液相色谱法与质谱联用方式，具有较高的检测灵敏度。实际在方法应用过程中，需要结合生物毒素样品特征进行适合前处理方法的选择，联合采用高效液相色谱法和质谱法能够使基质复杂、存在污染物干扰等问题得到解决，因此更能在畜产品毒素检测中适用。