四川、西藏产野生当归挥发油成分的GC-MS分析

广东省清远市中医院，广东 清远 511500

当归为伞形科植物当归[Angelicasinensis(Oliv.) Diels]的干燥根，具有补血活血、调经止痛、润肠通便的功效[1]。挥发油是当归的有效成分之一，研究表明当归挥发油中含有藁本内酯、正丁烯内酯、当归酮、月桂烯等多种成分，具有广泛的药理活性。近年来当归挥发油在心血管系统、消化系统、呼吸系统、脑神经系统和抗肿瘤方面的相关研究取得了较好的成绩[2]。

当归主产于我国西北和西南海拔1800～3000 m的高寒地区，根据产地的不同又有秦归(产甘肃、陕西)、云归(产云南)和川归(产四川)之分，其中甘肃岷县为当归的道地产区。张宏意等[3]2008年通过实地调查甘肃、四川、云南、湖北、青海和西藏林芝等当归产区，发现野生资源稀少。孙红梅等[4]通过对当归药材资源调查与分析发现，由于需求量的增加，生态环境的破坏，导致野生资源匮乏，目前现在市场上流通的当归药材商品均为栽培品种。本研究通过分析对比西藏林芝和四川平武的野生当归挥发油中的成分和含量，对比其差异性，以期为当归野生药用植物资源的开发利用提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 药材 西藏林芝野生当归采于海拔 3100 m左右的灌木林下，土壤类型为灰棕色土壤，PH值微碱性；四川平武野生当归实地采于海拔 2700 m左右的灌木林下，土壤类型为棕色土壤，PH值微碱性。采集时间为2018年9月，经广东药科大学张宏意博士鉴定为伞形科植物当归[Angelicasinensis(Oliv.) Diels]。分离根茎叶，除去须根和泥沙，待水分稍蒸发后，置于40℃烘箱中，烘48 h后粉碎过40目筛。

1.2 仪器 烘箱；粉碎机；电热套; 挥发油测定器; 冷凝管; 胶管；HP5890GC/HP5972MS气/质联用仪；赛多利斯—sartor ious/BP210D电子天平；岛津AY120托盘电子分析天平(称量样品)；具塞锥形瓶；HH—6恒温水浴锅；国家统一标准检验筛：40目，孔径0.45 mm，浙江上于县杜浦江山筛具厂。

1.3 方法

1.3.1 样品前处理 分别称取两地野生当归粉末50克(40目)，置于2000 mL圆底烧瓶中，加入800 mL蒸馏水，置挥发油测定器中，共水蒸馏提取8 h，静置30 min，收集得到黄褐色透明油状物，封装备用。取两地当归挥发油样品，用岛津AY120托盘电子分析天平精密称定10 mg，用三氯甲烷溶解使浓度为10 mg/mL，作为样品供试液备用。

1.3.2 色谱条件仪器 HP5890GC/HP5972MS 气/质联用仪；色谱柱: Cp sil 5CB(Varian) 30 m×0.25 mm×0.25 μm (100%苯甲基硅氧烷)；柱温: 50℃保持6 min，2℃/min升温至100℃保持10 min，1℃/min升温至160℃，2℃/min升温至220℃保持15 min；运行146 min；载气：He气；柱Flow=1.0 mL/min ；进样方式：不分流；进样量：1 μL；进样口温度：280℃。

1.3.3 质谱条件 离子源为EI；电离电压: 70 ev；电子倍培电压:1 882 mV ；质谱Temp=171℃；Vacuum:65 mTorr ；溶剂延时:6 min；质谱扫描范围:50～550 amu；质量范围：50～550 m/z；样品经峰纯度检测: Wiley 138谱库检索。

1.3.4 样品定性、定量分析 分别取两地野生当归挥发油样品供试液，精密吸取1 μL，按“1.3”项下色谱条件和质谱条件进样测定，得到相应的质谱图，与 Wiley 138谱库标准物质质谱图进行对比分析，确认两地野生当归挥发油各成分，用峰面积归一化法计算出各组分相对百分含量。

2 结果与分析

2.1 挥发油含量 取两地野生当归各50 g粉末，照《中国药典》(2015版)(通则2204乙法)项下挥发油测定法测定挥发油含量，结果西藏林芝野生当归挥发油含量为1.22%(mL/g)，四川平武野生当归挥发油含量为1.16%(mL/g)。

2.2 挥发油成分 通过对西藏林芝野生当归挥发油中各成分 GC—MS 分析，检出的各成分与 Wiley 138谱库标准物质质谱图进行对比分析，检测到35 个色谱峰，鉴定出22种化合物，总含量占总检出峰的 91.699 % (色谱图如图 1 所示，化学成分见表 1)。其中含量最多的是2-氢正丁烯基苯酞(70.184%)，其次是正丁烯基苯酞(9.288%)，另外含量较多的还有十八碳二烯酸(3.171%)、十六烷酸(2.761%)、1.2-二烯基环丙烷(2.122%)，石竹烯(1.428%)等，其他成分含量则较低(低于1%)。

四川平武野生当归挥发油中检出的各成分与 Wiley 138谱库标准物质质谱图进行对比分析，检测到35 个色谱峰，鉴定出17种化合物，总含量占总检出峰的 97.675 % (色谱图如图 2 所示，化学成分见表 1)。其中含量最多的是2-氢正丁烯基苯酞(92.551%)，其次是正丁烯基苯酞(3.037%)，其他成分含量则较低(低于1%)。

通过对西藏林芝和四川平武两地产野生当归挥发油成分的GC—MS分析对比(见表1)，发现两地挥发油中共有8种相同的成分，分别是：β-罗勒烯、1，3-异苯并呋喃二酮、石竹烯、(+-)-裸丁二烯、β-法尼烯、β-红没药烯、正丁烯基苯酞和2-氢正丁烯基苯酞；8种共同成分相对含量分别占总成分的81.709%(西藏林芝)和96.17%(四川平武)。

表1 西藏林芝和四川平武野生当归挥发油化学成分检索结果对比

另外，西藏野生当归中还含有1-α-松油醇、9-甲基-十一碳烯、1-苯基辛酮、γ-榄香烯、β-蛇床烯、 1,3-苯二氧、4-甲氧-6-(2-丙烯基)、法尼烯、 1.2-二烯基环丙烷、十五烷酸、十六烷酸、十八碳二烯酸甲酯、13-二十二烯酸甲酯、十九烷酸甲酯、13-二十二烯酸甲酯等成分；四川平武野生当归中还含有2,4,6-三甲基-1,3-苯二胺、2,4,5-三甲基苯甲醛、1-苯基戊酮、(+)-香树烯、喇叭烯、β-雪松烯、斯巴醇、2.3-二氢四甲基苯骈吡咯等成分。

3 讨论

本研究结果显示，西藏林芝野生当归挥发油的含量和成分比四川平武的多；而在所有成分中，含量最多的是2-氢正丁烯基苯酞，且四川平武的2-氢正丁烯基苯酞(92.551%)比西藏林芝(70.184%)的多；另外，在本研究中，西藏林芝和四川平武野生当归挥发油中都未检测出藁本内酯，有文献曾报道过用水蒸汽蒸馏法提取当归挥发油会破坏藁本内酯的结构，使其分解产生其他物质[5-6]；也有研究表明当归挥发油很不稳定，主要成分藁本内酯在室温容易异构化[2]；还有研究发现当归属于短日照植物，较长的日照不利于以藁本内酯为主的挥发性成分含量增加[7]；因此，造成两地野生当归挥发油中的成分和含量差异及未检测出藁本内酯这一结果的原因还有待进一步研究。