多种血清肿瘤标志物联合检测在肺癌诊断中的应用研究

杜汉芳,许海军,林 丽

(十堰市太和医院：1.检验科；2.心内科Ⅱ病区，湖北十堰 442000)

肺癌是临床常见恶性肿瘤之一，且具有较高的发病率和病死率[1]。另外，近年来，肺癌发病率逐年升高，给患者家庭带来了极其沉重的负担[2]。目前，临床常用的肺癌诊断方法是依靠影像学和病理学检查，但由于肺癌具有起病隐匿的特点，发病早、中期并无明显特异性症状，所以，患者在确诊时往往已到了晚期，甚至已发生转移，大大降低了疗效及患者的生活质量[3-4]。因此，肺癌的早发现、早诊断、早治疗显得尤为重要。本研究通过检测肺癌患者、良性肺部疾病患者与健康体检者血清癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白-19片断抗原(CYFRA21-1)、鳞状上皮细胞癌抗原(SCC-Ag)、胃泌素释放肽前体(Pro-GRP)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平，进而寻找一组能对肺癌早期诊断及疗效作出准确判断的分子学指标，从而为临床诊断早期肺癌提供依据。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择2015年12月至2017年10月本院肺科、肿瘤科收治的肺癌患者120例(肺癌组)、肺部良性病变患者40例(良性肺疾病组)和来本院体检中心体检健康者40例(健康对照组)作为研究对象。纳入标准：(1)在本院经影像学和病理学检测确诊为肺癌、肺炎、炎性假瘤、肺结核及肺部血管瘤且无心脏、肝脏、肾脏等功能障碍患者；(2)健康对照组研究对象是在本院体检中心体检且结果正常无任何部位肿瘤且家族成员无癌症病史者。肺癌组患者中男69例，女51例；平均(52.3±11.8)岁；鳞癌57例，腺癌39例，小细胞癌24例。良性肺疾病组患者中男23例，女17例；平均(55.1±8.9)岁； 肺炎11例，炎性假瘤9例，肺结核14例，肺部血管瘤6例。健康对照组研究对象中男24例，女16例；平均(52.7±10.2)岁。3组研究对象性别、年龄等一般资料比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。本研究经本院伦理委员会同意，患者及家属自愿签署知情同意书。

1.2仪器与试剂 仪器为电化学发光分析仪(罗氏仪器Cobas E601)，试剂为ANAG诊断试剂盒(美国R&De公司)。

1.3检测方法 采集3组研究对象清晨空腹状态下静脉血5 mL，2 500 r/min离心常规分离，分离的血清于-20 ℃冰箱保存待测。CEA、CYFRA21-1、SCC-Ag、Pro-GRP和NSE采用电化学发光分析法检测，操作步骤严格按试剂盒说明书进行。阳性判定界值：CEA>5.8 ng/mL,CYFRA21-1>3.3 ng/mL,SCC-Ag>1.5 ng/mL,Pro-GRP>78 ng/mL,NSE>16 ng/mL。检测灵敏度=检测指标阳性例数/本组研究对象总例数。

2 结 果

2.13组研究对象血清CEA、CYFRA21-1、SCC-Ag、Pro-GRP和NSE水平比较 肺癌组患者血清CEA、CYFRA21-1、SCC-Ag、Pro-GRP和NSE水平均显著高于良性肺疾病组和健康对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。良性肺疾病组患者血清CEA、CYFRA21-1、SCC-Ag、Pro-GRP和NSE水平高于健康对照组，但差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

2.23组患者血清CEA、CYFRA21-1、SCC-Ag、Pro-GRP和NSE检测灵敏度比较 肺癌患者血清CEA、CYFRA21-1、SCC-Ag、Pro-GRP和NSE检测灵敏度均显著高于良性肺疾病组和健康对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。肺癌组患者5种指标联合检测的灵敏度显著高于5种指标的单一检测。见表2。

表1 3组研究对象血清CEA、CYFRA21-1、SCC-Ag、Pro-GRP和NSE水平比较

注：与肺癌组比较，*P<0.05；与健康对照组比较，#P>0.05

表2 3组患者血清CEA、CYFRA21-1、SCC-Ag、Pro-GRP和NSE检测灵敏度比较[n(%)]

注：良性肺疾病组与肺癌组比较，#P<0.05；健康对照组与肺癌组比较,△P<0.05

3 讨 论

肺癌因其发病率高和病死率增长快等特点已成为威胁人类健康，甚至生命安全的恶性肿瘤之一，近50年来，许多国家肺癌的发病率和病死率均在逐年升高，随着我国工业化的发展，肺癌发病率在我国男性肿瘤中已高居首位。但由于其发病隐匿、早期发病无症状，因此，临床确诊时已到了晚期，错过了手术及放、化疗的最佳时期，严重影响了患者的生活质量，且患者的5年生存率不到5.0%[5]。传统的影像学检查灵敏度较低，不足以满足筛查的需求。近年来，血清肿瘤标志物检测因其快速、方便、灵敏度高且结果稳定等特点在肺癌的早期诊断和治疗中受到了重视。有研究显示，肿瘤标志物的联合检测有助于提高肺癌诊断的灵敏度和特异度[6-7]。本研究探讨了CEA、CYFRA21-1、SCC-Ag、Pro-GRP和NSE单一检测及联合检测在肺癌早期诊断和治疗中的临床应用价值。

CEA是一种大肠癌组织产生的单体糖蛋白，广泛存在于多种肿瘤中，是消化系统癌、乳腺癌及肺癌疗效判定和预后估计的一个较好的肿瘤标志物。CEA是一种黏附分子，作用机制是在癌细胞与癌细胞或癌细胞与基质胶原间发挥效应，进而在肿瘤的生长和转移中具有重要作用[8]。CEA的基因包括2个亚组，其中一个亚组包含CEA及非特异性抗原；另一个亚组包含妊娠特异性抗原，其基因的表达受胚胎细胞有关基因调控。在细胞基因调控障碍导致癌变时CEA的表达量增加[9]。本研究结果显示，肺癌患者血清CEA水平显著高于良性肺部疾病患者和健康对照组。

细胞角蛋白19的可溶性片断CYFRA21-1，是一种酸性蛋白，相对分子质量为30×103，广泛分布于层状或鳞状上皮等正常组织表面，但在恶性的癌组织中CYFRA21-1表达量丰富。CYFRA21-1目前被认为是一种可用于检测肺癌的肿瘤标记物，尤其在非小细胞肺癌的早期诊治中具有重要意义。CYFRA21-1还与肿瘤的临床分期有关，也可作为肺癌术后或放、化疗后早期复发的指标[10]。当影像学检测肺部有不清晰阴影，且血清CYFRA21-1水平高于正常值时患支气管肺癌的可能性较高。血清CYFRA21-1水平高可能提示疾病处于进展期或预后不良。但CYFRA21-1阴性也不能排除患肺癌的可能。本研究结果显示，检测CYFRA21-1诊断肺癌的灵敏度为74.2%，良性肺疾病组阳性检出率为12.5%，表明检测血清CYFRA21-1是临床诊断的重要辅助手段，而不能作为唯一指标[11-12]。

SCC-Ag是一种糖蛋白，是肿瘤相关抗原TA-4的一个亚型，存在于子宫、子宫颈、肺等鳞状上皮细胞癌的细胞质中，尤其是在非角化癌的细胞中，表达量更多。有研究表明，SCC-Ag是一种肿瘤标志物，患者病情越严重，血清SCC-Ag水平越高[13]。与本研究结果一致。本研究结果显示，肺癌组患者血清SCC-Ag水平远高于良性肺疾病组和健康对照组。

Pro-GRP是胃泌素释放肽的前体，是一种神经肽类激素，其主要存在于脑、胃及婴儿肺的神经内分泌组织中。GRP是一种胃肠道激素的促分泌素和调节肽。有研究表明，GRP是小细胞肺癌的重要标志物。而Pro-GRP是GRP的前体，血清Pro-GRP水平可间接代表GRP的水平。本研究通过采用电化学发光法检测肺癌患者血清Pro-GRP水平及阳性检出率，结果显示，肺癌组患者血清Pro-GRP水平显著高于良性肺疾病组和健康对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。

NSE是一种神经元和神经内分泌细胞特有的酸性蛋白酶，高浓度存在于这些细胞及其所引发的肿瘤细胞中。NSE是神经内分泌肿瘤的标志物，可用于鉴别诊断疾病及评价疗效[4，14]。本研究结果显示，肺癌组患者体内NSE高度表达，其血清水平及阳性检出率均显著高于良性肺疾病组和健康对照组。

4 结 论

肺癌患者血清CEA、CYFRA21-1、SCC-Ag、Pro-GRP和NSE水平均显著高于良性肺疾病组及健康对照组。另一方面，5种标志物联合检测的灵敏度远高于单一标志物检测的灵敏度。CEA、CYFRA21-1、SCC-Ag、Pro-GRP和NSE 5种标志物的联合检测在早期肺癌的临床诊断中具有重要意义。该联合检测方案值得在临床检测肺癌中推广应用。