忌酸颗粒的药效学实验研究

马旭冉，王彦礼，刘佳星，宋红新，杨伟鹏

(中国中医科学院中药研究所，北京 100700)

稽延性戒断症状是毒品急性戒断综合征阶段之后，持续存在且强度较弱的一组综合征。在经过急性戒断综合征的治疗后，患者的神经生理功能仍未复原，尚处于再调整阶段，如不进行药物干预或治疗，稽延性戒断症状很难自行消除。稽延性戒断症状是导致复吸的主要原因之一[1]。忌酸丸记载于清代医家何书田著《救迷良方》[2]，经现代考证，忌酸丸组成为东洋参15 g，炒白术9 g，白当归7.5 g，真川柏12 g，川黄连12 g，炙甘草9 g，广陈皮7.5 g，生柴胡10.5 g，明天麻9 g，广木香7.5 g，炙黄芪9 g，绿升麻0.5 g，沉水香7.5 g，生附子2.1 g，鸦片膏16.8 g组成，各药以面糊为丸服用，具有温补脾肾，益气升阳，滋阴平肝，制瘾戒毒的功效。

忌酸颗粒是根据戒毒古方忌酸丸进行组方优化而成，在忌酸丸原方基础上，去鸦片膏，用西洋参等量替代东洋参，加洋金花0.5 g,酸枣仁12 g,延胡索12 g，制成颗粒制剂后，成人日用量为生药27 g/天，用于治疗阿片类毒品急性戒断之后稽延性症状的治疗，本研究通过镇痛、镇静、抗疲劳等试验来考察忌酸颗粒的药效作用。

1 实验材料

1.1 动物

KM小鼠，SPF级，中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心提供，许可证号SCXK(军)2012-0004。

1.2 药品及试剂

忌酸颗粒，由中国中医科学院中药研究所中药制剂研究中心提供；阿司匹林，sigma进口分装，批号20120928001；戊巴比妥钠，北京化学试剂公司，批号020919；佐匹克隆片，北京益民药业有限公司，批号20140810；人参皂苷片，吉林省白山市茂竹保健品有限责任公司，批号20170501；盐酸小檗碱，广西天天乐药业股份有限公司，批号170902；冰醋酸，国药集团化学试剂有限公司，批号20140829。

1.3 仪器

HH-1恒温水浴锅，常州国华电器有限公司；YLS-1A多功能小鼠自主活动记录仪，济南益延科技发展有限公司。

2 实验方法与结果

2.1 小鼠热刺激甩尾实验

KM小鼠50只，体质量18～20 g，雄性，按体质量随机分为5组，对照组、阳性药阿司匹林组、忌酸颗粒高、中、低剂量组(20、10、5 g/kg)，每组10只，测定各组小鼠痛阈(小鼠自尾尖浸入50℃温水中至尾部甩起的时间，以下称甩尾潜伏期)，忌酸颗粒各剂量组连续给药3 d，对照组给同体积蒸馏水，阿司匹林100 mg/kg(实验当日给1次)，末次给药后1 h，以50℃温水浸烫鼠尾2 cm，分别记录给药30 min、60 min、120 min、240 min、360 min后5个时间点入水至甩尾出水的潜伏期[3]，进行组间t检验。

结果显示，忌酸颗粒各剂量组在30 min～360 min各时间点均能明显提高小鼠痛阈，与对照组相比有显著性差异。结果见表1。

表1 忌酸颗粒对小鼠热刺激甩尾的影响

注：与对照组相比，*P<0.05，**P<0.01

2.2 小鼠醋酸扭体实验

KM小鼠50只，体质量18～20 g，雄性，按体质量随机分为5组，对照组、阳性药阿司匹林组、忌酸颗粒高、中、低剂量组(20、10、5 g/kg)，每组10只，忌酸颗粒各剂量组连续给药3 d，对照组给同体积蒸馏水，阿司匹林100 mg/kg(实验当日给1次)，末次给药后1 h，腹腔注射0.6%醋酸溶液0.2 mL/只，观察给醋酸后15 min内出现的扭体反应(腹部内凹、伸展后肢、臀部抬高)，记录扭体次数和第一次扭体的时间[3]，进行组间t检验。

结果显示，忌酸颗粒各剂量组均能减少醋酸所致小鼠扭体次数，延长扭体潜伏期，其中高剂量组与对照组相比有显著性差异。结果见表2。

表2 忌酸颗粒组合物对小鼠醋酸所致扭体的影响

注：与对照组相比，*P<0.05，**P<0.01

2.3 小鼠自主活动实验

KM小鼠50只，体质量18～20 g，雄性，按体质量随机分为5组，对照组、阳性药佐匹克隆组、忌酸颗粒高、中、低剂量组(20、10、5 g/kg)，每组10只，忌酸颗粒各剂量组连续给药3 d，对照组给同体积蒸馏水，佐匹克隆片100 mg/kg(实验当日给1次)，末次给药后1 h，将小鼠放入自主活动箱内，适应3 min，分别测定5 min和10 min内活动次数[4]，进行组间t检验。

结果显示，忌酸颗粒各剂量组均能减少小鼠5 min和10 min的自主活动次数，但与对照组相比，无统计学意义。结果见表3。

表3 忌酸颗粒对小鼠自主活动的影响

2.4 小鼠戊巴比妥钠协同睡眠实验

KM小鼠50只，体质量18～20 g，雄性，按体质量随机分为5组，对照组、阳性药佐匹克隆片组、忌酸颗粒高、中、低剂量组(20、10、5 g/kg)，每组10只，忌酸颗粒各剂量组连续给药3天，对照组给同体积蒸馏水，佐匹克隆片100 mg/kg(实验当日给1次)，末次给药后1 h，ip戊巴比妥钠50 mg/kg，以翻正反射消失为入睡时间，从翻正反射消失至恢复为睡眠持续时间并记录[3]，进行组间t检验。

结果显示，忌酸颗粒各剂量组对于睡眠潜伏期无明显影响，但各剂量组均能明显延长睡眠时间，与对照组相比具有显著性差异。结果见表4。

表4 忌酸颗粒对小鼠戊巴比妥钠协同睡眠的影响

注：与对照组相比，*P<0.05，**P<0.01

2.5 小鼠游泳实验

KM小鼠50只，体质量18～20 g，雄性，按体质量随机分为5组，对照组、阳性药人参皂苷片组、忌酸颗粒高、中、低剂量组(20、10、5 g/kg)，每组10只，忌酸颗粒各剂量组连续给药5 d，对照组给同体积蒸馏水，人参皂苷片2 g/kg(实验当日给1次)，末次给药后30 min后将小鼠放入容器内游泳，水深20 cm，水温20℃左右，尾部负重2 g，当小鼠头部沉入水中10 s不能浮起者即为体力耗竭，计时为游泳时间[5]，进行组间t检验。

结果显示，忌酸颗粒各剂量组可延长负重小鼠的游泳时间，其中低剂量组与对照组相比具有显著性差异。结果见表5。

表5 忌酸颗粒对小鼠负重游泳的影响

注：与对照组相比，*P<0.05，**P<0.01

2.6 止泻实验

KM小鼠50只，体质量18～20 g，雄性，按体质量随机分为5组，对照组、阳性药盐酸小檗碱组、忌酸颗粒高、中、低剂量组(20、10、5 g/kg)，每组10只，用0.3 g/mL的番泻叶煎剂给小鼠灌胃，每次0.5 mL/只，连续6 d，各组同时给药，对照组给同体积蒸馏水，盐酸小檗碱30 mg/kg，末次给药后，小鼠单笼饲养，笼下铺置滤纸，每1 h换滤纸1次。连续观察5 h，统计数据计算小鼠腹泻指数[3]。

腹泻指数=稀便率 ×稀便级

稀便率=每只动物的稀便次数/大便的总次数(稀便以滤纸上有无污迹为标准)

稀便级根据滤纸上污迹范围的大小分为4级：1级：污迹直径<1 cm；2级：污迹直径<1～1.9 cm；3级：污迹直径<2～3 cm；4级：污迹直径>3 cm。

统计时先逐个统计每堆稀便的级数，然后将该鼠所有稀便级数相加除以稀便次数得稀便的平均级数。

结果显示，忌酸颗粒各剂量组在2～4 h内能降低小鼠的腹泻指数，与模型组相比具有显著性差异(中、低剂量组4 h除外，无统计学意义)。见表6。

表6 忌酸颗粒对番泻叶致泻小鼠腹泻指数的影响

注：与模型组相比，*P<0.05，**P<0.01

3 讨论

海洛因依赖者稽延性戒断症状主要表现在三个方面：一是睡眠障碍，包括入睡难、易醒、早醒；二是躯体症状，包括肌肉关节疼痛、全身难受、四肢不适、全身乏力；三是焦虑情绪，包括心慌、烦躁不安、纳差等[6]。

忌酸丸原方用于久吸阿片成瘾之脾肾不足，气虚阳陷，而见倦怠乏力，食少呕恶，大便溏泻，萎黄羸瘦，心烦头痛，周身痠疼，头晕目眩，盗汗遗精，脉虚无力者，符合稽延性症状的各个症候群的表现。综观忌酸颗粒的组方配伍，实以附子补火助阳、温运脾土、行经止痛，通行十二经脉，黄芪补中益气、升阳举陷，合用温补脾肾，益气升阳，先天后天并调为主药。白术健脾益气，柴胡、升麻升举阳气；木香行气止痛、健脾消食；陈皮燥湿健脾、调中快膈，均可增强主药健脾升阳，理气和胃，快膈消食之功，共固中州之本，同为辅药。当归、黄连、黄柏养血滋阴、清热泻火、凉血除蒸，既可泄妄动之相火，以止梦遗滑精，又合附子以阴合阳，阴阳并调，且可抑附子辛热温燥之毒性；元胡活血行气止痛、酸枣仁养心安神、天麻平肝潜阳，以制阴虚阳亢、风阳上扰之势，平眩止晕、共为佐药。甘草消解烟毒、调和药性为使药。洋金花以制瘾志、止诸痛。诸药合用，共奏温补脾肾，益气升阳，滋阴平肝，制瘾戒毒之效。本方寒热并用，阴阳气血并调，攻补兼施，扶正戒毒，相行不悖，实为戒断之妙方也。

本研究针对稽延性症状的不同表现，通过镇静、镇痛、抗疲劳、止泻等实验来验证忌酸丸制剂的药效，结果显示，忌酸丸制剂具有较好的镇痛和镇静作用，具有一定的抗疲劳和止泻作用。对于稽延性症状所表现的睡眠障碍、躯体疼痛、乏力以及泄泻等均有较好的治疗作用。