4种植物源杀虫剂对蝴蝶兰异迟眼蕈蚊幼虫的活性研究

程东美，张 蕊，张志祥

(1.仲恺农业工程学院植保系,广东广州510225；2.华南农业大学天然农药与化学生物学教育部重点实验室，广东广州510642)

异迟眼蕈蚊(BradysiadifformisFrey)，双翅目(Diptera)，长角亚目(Nematocera)，眼蕈蚊科(Sciaridae)，迟眼蕈蚊属(Bradysia)，是食用菌、药用菌和园林植物的重要害虫，美国、英国、日本、俄罗斯、荷兰、南非等国家均有报道[1-5]，我国于2009年在云南首次报道其为害蘑菇[6]。该虫在我国分布较广，与韭菜迟眼蕈蚊(Bradysiaodoriphaga)形态相似，普遍混合发生，是一些地区韭菜种植区的优势种[7]。2009年广东省现代农业产业体系花卉创新团队调查发现，迟眼蕈蚊为害蝴蝶兰、长寿花、丽格海棠、虎刺梅、一品红和花叶万年青，个别花场受害率达到100%[8-9]，韩群鑫等[10]研究表明，蝴蝶兰上危害严重的是异迟眼蕈蚊。

异迟眼蕈蚊以幼虫咬食蝴蝶兰根、靠近基质表面的幼苗叶片，甚至钻入植株茎部为害，被害幼苗根部变黑、腐烂，严重时叶片萎蔫，甚至全株枯死[10]。该虫个体小，为害隐蔽，不易识别，花卉上的防治主要参照韭菜及蘑菇上方法，以防虫网、粘虫板、诱虫灯配以杀虫剂，其中喷洒杀虫剂是生产中最常用的措施。防治常用药剂包括辛硫磷、毒死蜱、吡虫啉、丙硫克百威、溴虫腈、敌百虫、丁硫克百威等传统品种，灭蝇胺、阿维菌素、印楝素、灭幼脲等也逐渐受到市场欢迎[9,11-13]。

植物源农药具有安全、低毒、低残留及害虫不易产生抗药性等优点，但在花卉害虫防治上应用还较少，笔者选择印楝素和鱼藤酮等4种植物源杀虫剂，测试了对蝴蝶兰异迟眼蕈蚊的活性及生长发育的影响，以期为其安全防治提供参考。

1 材料与方法

1.1 供试材料

异迟眼蕈蚊由仲恺农业工程学院韩群鑫教授提供，在养虫室((27±1)℃，RH(65±5)%以豆渣(Glycinemax)饲养[10]。

供试药剂：印楝素44.95%原粉、除虫菊素90%原药、苦参碱86.7%干粉、鱼藤酮44.53%干粉，均由华南农业大学农药工程与安全评价中心提供。

1.2 试验方法

4种杀虫剂均先用乙醇溶解，然后用含体积分数2%吐温80的水溶液将各供试药剂稀释至50 mg/L和100 mg/L进行活性测定。根据预备试验，各药剂毒力测定的系列质量浓度分别为：除虫菊素12.5，25，50，100，200 mg/L，印楝素和苦参碱均为25，50，100，200，400 mg/L，鱼藤酮为50，100，200，400，800 mg/L。对照以含体积分数2%吐温80的水溶液处理。

1.2.1 浸虫法活性测定 参照文献[14]方法并改进，挑取20～30头刚孵化的3龄幼虫放入药液中30 s，然后吸去多余药液，将试虫放垫有滤纸保湿的培养皿(d=7 cm)中，加入2～3 g豆渣饲养，处理后培养皿表面盖上深色湿毛巾进行保湿和保持黑暗条件。所有处理重复3次，调查时以毛笔轻触虫体，不动者计为死亡，计算死亡率和校正死亡率。

1.2.2 混合法活性测定 将豆渣在供试药液中浸润，然后置于垫有滤纸的筛网上，挤去多余药液至豆渣呈松散状备用。挑取20～30头刚孵化的3龄幼虫，以处理后的豆渣饲喂，对照采用对应的助溶剂溶液处理，重复3次。饲养及检测方法同1.2.1。用Excel数据表[15]计算毒力回归方程、相关系数、致死中浓度LC50及其置信区间。

1.2.3 杀虫剂亚致死浓度对幼虫的影响 根据1.2.2测定的毒力方程计算理论LC20和LC40。试验参照慕卫等[12,16]方法，质量浓度为各药剂的LC40与LC20，以混合法处理试虫，每处理约20头，重复3次，处理后观察试虫的存活情况。然后采用同样方法处理试虫100头，72 h记录幼虫存活幼虫数，并挑出外形健康的幼虫补至每重复20头幼虫，正常饲养，连续观察并记录LC40与LC20处理试虫的累积化蛹率、平均雌蛹质量、累积羽化率。

2 结果与分析

2.1 4种杀虫剂对异迟眼蕈蚊幼虫的活性

4种植物源杀虫剂对眼蕈蚊6日龄幼虫的活性测定结果见表1和表2。由表1可知，浸虫法处理，除虫菊素的活性最高，质量浓度100 mg/L处理后24，48，72 h的校正死亡率分别为81.53%、86.84%和90.60%；其次为印楝素和苦参碱，校正死亡率分别为40.08%、57.14%、65.38%和43.19%、55.78%、64.29%，鱼藤酮的效果较差。

表1 4种植物源杀虫剂对异迟眼蕈蚊幼虫的活性(浸虫法)

表中数据为3个重复的平均数；纵列数字后小写字母相同者，表示经方差分析在5%水平上差异不显著(下同)

Data in the table was averaged by three repetitions,data with the difference letters in column are significant difference at 5% level (The same as following tables)

混合法测定结果(表2)与浸虫法相近，除虫菊素的活性最高，其次为苦参碱和印楝素，鱼藤酮的效果较差。

表2 4种植物源杀虫剂对异迟眼蕈蚊幼虫的活性(混合法)

2.2 印楝素、鱼藤酮对异迟眼蕈蚊不同龄期幼虫的活性

印楝素、鱼藤酮对眼蕈蚊2龄幼虫的活性高于3龄和4龄幼虫(表3)，200 mg/L印楝素处理48 h后对各龄幼虫校正死亡率分别为79.32%、70.20%和62.09%。浓度和幼虫龄期一致时，印楝素的活性高于鱼藤酮，200 mg/L鱼藤酮处理的效果与100 mg/L印楝素的效果差异不显著。

表3 印楝素、鱼藤酮对异迟眼蕈蚊不同龄期幼虫的活性

横行大写字母相同者，表示经方差分析(DMRT法)在5%水平上差异不显著

Data with the difference capital letters in row are significant difference at 5% level

2.3 4种杀虫剂对异迟眼蕈蚊幼虫的毒力

4种杀虫剂对异迟眼蕈蚊3龄幼虫毒力测定结果见表4。由表可见，除虫菊素的毒力最好，LC50为20.39 mg/L；其次为苦参碱、印楝素，LC50分别为132.25 mg/L和151.81 mg/L；鱼藤酮的毒力最差，LC50值为385.91 mg/L。

表4 4种植物源杀虫剂对异迟眼蕈蚊3龄幼虫的毒力

表5 4种植物性杀虫剂亚致死浓度对异迟眼蕈蚊幼虫存活的影响

2.4 4种杀虫剂亚致死浓度对异迟眼蕈蚊幼虫存活的影响

4种植物性杀虫剂亚致死浓度对异迟眼蕈蚊幼虫存活的影响结果见表5。由表可见，在亚致死浓度下，试虫的死亡率和理论计算有差异，处理后48 h，印楝素在34 mg/L(理论LC20)时下，校正虫口减退率仅为1.67%，另3种药剂的结果相似；理论LC40浓度处理时，除虫菊素的虫口减退率接近40%。所有处理的校正死亡率均随处理时间的延长而提高。

2.5 4种杀虫剂对异迟眼蕈蚊化蛹和羽化的影响

4种杀虫剂在亚致死浓度下对异迟眼蕈蚊化蛹、羽化的影响见表6。由表可见，除虫菊素在6.3 mg/L(LC20)时幼虫化蛹率较高(72.41%)，但仍明显低于对照(87.10%)；在供试条件下，另3种杀虫剂处理的幼虫化蛹率均明显低于对照。

表6 4种植物性杀虫剂亚致死浓度对幼虫生长发育的影响

印楝素和鱼藤藤处理幼虫后，异迟眼蕈蚊蛹质量明显低于对照；苦参碱和除虫菊素的处理与对照差异不显著。印楝素处理对蛹羽化也有抑制作用，34.1 mg/L和96.7 mg/L(LC20和LC40)处理后的羽化率为72.73%和76.19%，与对照差异显著，其他3种植物源农药处理的羽化率与对照差异不显著。

3 结论与讨论

植物源杀虫剂来源于天然植物，具有选择性强，安全性高，在环境中易降解等优点，符合农业可持续发展的需要。鱼藤酮、除虫菊素、印楝素、苦参碱是广泛应用的植物源农药，对多种农业害虫具有较好的防治效果[17]。植物源杀虫剂防治眼蕈蚊的研究和应用也逐年增加，印楝素、莨菪碱、烟碱和苦参碱对韭菜迟眼蕈蚊幼虫的毒力与阿维菌素相近，亚致死剂量的苦参碱和印楝素能够降低试虫的存活率和成虫产卵率，延长幼虫发育历期[18]。除虫菊素、苦参碱对平菇厉眼蕈蚊(Lycoriellapleuroti)幼虫具有较高毒力，LC50值分别为10.42 mg/L、20.10 mg/L[19]。每667 m2用1.1%苦参碱粉剂2 kg可有效防治韭蛆，防效在90%以上，持效期30 d 以上，与 48%乐斯本乳油的防治效果相当[20]。1%苦皮藤素乳油和0.6%印楝素乳油对食用菌异迟眼蕈蚊(24 h)的LD50分别为16.77 mg/L和19.92 mg/L，50 mg/L浓度处理幼虫，校正死亡率均达80%以上[21]。本文研究结果也表明，除虫菊素对异迟眼蕈蚊幼虫具有良好的生物活性，但印楝素和苦参碱的活性和毒力均与文献报道有差异，致死浓度明显高于已有的文献，原因还有待于进一步研究。

印楝素等植物源杀虫剂对害虫的抑制效果慢，综合效应好，具有持续控制作用。采用LC20和LC40浓度处理供试幼虫，具有速效杀虫作用的除虫菊素的实测死亡率与理论死亡率相近，印楝素的实测死亡率明显低于理论死亡率，但降低了存活幼虫的化蛹率、雌蛹质量及蛹的羽化率，推迟羽化了时间，表明印楝素的影响是综合性的，具有持续控制效应。因此植物源杀虫剂对害虫种群控制的综合作用较强，在异迟眼蕈蚊的防治中具有广阔的应用前景。