太原地区汉族冠心病患者CYP2C19基因多态性研究

刘龙梅 周双艳 王仲朝 杨泽华 赵克斌

氯吡格雷是一种不可逆的P2Y12受体拮抗剂，一方面可以阻碍血小板受体被ADP诱导而过度激活，另一方面通过解除cAMP抑制作用使得对cAMP和前列腺素E1高度依赖的磷酸蛋白的磷酸化过程明显加速，阻止纤维蛋白原受体活化，完成对血小板聚集的全方位阻碍［1］。大量临床资料表明，部分患者遵医嘱服用标准剂量氯吡格雷进行抗血小板治疗，血小板并不能得到很好的抑制，称为“氯吡格雷抵抗”，导致部分患者在经皮冠状动脉介入治疗（percutaneous coronary intervention，PCI）后发生不良心血管事件。“氯吡格雷抵抗”的发生机制可能与编码代谢酶基因突变、药物互相作用、个体差异等诸多因素有关［2］。因此，本研究通过分析太原地区汉族冠心病患者CYP2C19基因代谢表型和基因表型的分布特征，对比不同地区汉族、不同民族的代谢表型、基因表型分布，为本地区汉族冠心病的临床个体化用药提供参考。

1 资料与方法

1.1 研究对象 选取2017年10月—2018年11月在山西省心血管病医院检测CYP2C19基因多态性的787例门诊及住院冠心病患者。所有患者均为太原市汉族人口，无血缘关系，否认家族遗传病病史。

1.1.1 纳入标准 ① 年龄大于18周岁的男性或非妊娠妇女；② 诊断为冠心病，包括稳定型心绞痛（stable angina，SA）、不稳定型心绞痛（unstable angina，UA）、ST段抬高型心肌梗死（ST-elevation myocardial infarction，STEMI）和非ST段抬高型心肌梗死（NSTEMI），需要服用氯吡格雷治疗的患者。

1.1.2 排除标准 ① 存在阿司匹林或氯吡格雷任何一种药物过敏或不耐受者；② 具有较高的出血倾向（有活动性消化道溃疡）者；③ 近期有非可压迫部位活动性出血者；④ 血小板数目异常者（血小板计数＞450×109/L或＜80×109/L）；⑤ 中重度贫血者；⑥ 肝肾功能异常者；⑦ 计划服用华法林或其他可能影响阿司匹林或氯吡格雷药效的药物者；⑧ 合并终末期疾病（如恶性肿瘤）、预期寿命小于1年者。

1.2 仪器与试剂 仪器为美国Applied Bios stems 7500聚合酶链式反应仪，德国Eppendorf Centrifuge 5430离心机；基因组DNA提取试剂盒购自北京天根生化科技有限公司；人类CYP2C19基因检测试剂盒购自武汉友芝友医疗科技有限公司。

1.3 CYP2C19基因检测方法 按照试剂盒说明书提取乙二胺四乙酸（ethylenediaminetetraacetic acid，EDTA）抗凝全血DNA，于-20 ℃保存。

1.4 统计学方法 应用SPSS 16.0软件进行统计分析，计量资料以均数±标准差（±s）表示；计数资料以百分率表示，组间比较采用χ2检验。P＜0.05差异有统计学意义。

2 结果

2.1 一般资料 共纳入787例冠心病患者。男性508例，女性279例；年龄40～90岁，平均（59.78±14.83）岁。所有患者的性别、年龄等一般资料比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）。

2.2 太原地区汉族冠心病患者CYP2C19基因表型和代谢表型 787例患者基因型*1/*17、*17/*17、*1/*1、*1/*2、*1/*3、*2/*17、*2/*2、*2/*3、*3/*3频率分别为2.29%、0%、42.95%、38.75%、5.34%、0.51%、6.23%、3.43%、0.51%。CYP2C19超快代谢型18例（2.29%）、快代谢型338例（42.95%）、中间代谢型351例（44.60%）及慢代谢型80例（10.17%）。

2.3 太原地区汉族与不同地区以及不同民族冠心病患者CYP2C19代谢表型的比较 将本研究结果与国内文献发表的CYP2C19代谢表型进行比较发现，太原地区汉族人群CYP2C19代谢类型的分布与蒙古族［3］、回族［4］的分布情况比较差异有统计学意义（P＜0.05），与维吾尔族［5］、苗族［6］代谢表型分布基本一致（P＞0.05），见表1。太原地区汉族人群CYP2C19代谢类型的分布与不同地区（天津、十堰、连云港）汉族［7-9］代谢表型分布基本一致（P＞0.05），见表2。

2.4 太原地区汉族与不同地区汉族冠心病患者CYP2C19基因表型分布的比较 将本研究结果与国内文献发表的不同地区汉族CYP2C19基因表型比较发现，太原地区汉族人群CYP2C19基因表型分布与十堰地区分布情况［8］比较差异有统计学意义（P＜0.05），与天津［7］、连云港［9］等城市的分布基本一致（P＞0.05）。见表 3。

表1 太原地区汉族与不同民族冠心病患者CYP2C19代谢表型的比较

表2 太原地区汉族与不同地区汉族冠心病患者CYP2C19代谢表型的比较

表3 太原汉族与不同地区汉族冠心病人群CYP2C19基因表型分布比较

3 讨论

CYP2C19作为氯吡格雷活化过程中的关键酶，参与其生物转化的两个步骤［10］。其中，正常酶活性的基因由CYP2C19*1编码，CYP2C19发生*2、*3突变，其终产物均为无催化活性的酶蛋白，降低了对经其代谢底物药物的能力。此外，大量研究表明［11-14］，CYP2C19的等位基因中*2、*3、*17对氯吡格雷代谢影响较大，携带*2、*3功能缺失等位基因会导致CYP2C19酶活性降低，携带*17功能获得基因对氯吡格雷呈高反应性，出血风险会加大。美国食品药品监督管理局（Food and Drug Administration，FDA）和大部分国内外指南已提出对服用氯吡格雷的患者可进行CYP2C19基因型检测，从而优化抗血小板药物治疗的方案。

CYP2C19基因代谢表型和基因表型的分布有明显的种族和地域差异。慢代谢型在中国人群中发生率近 15%［15］，在白种人中发生率仅为 3%［16］。本研究结果显示，787例患者基因型*1/*17、*1/*1、*1/*2、*1/*3、*2/*17、*2/*2、*2/*3、*3/*3频率分别为 2.29%、42.95%、38.75%、5.34%、0.51%、6.23%、3.43%、0.51%，CYP2C19超快代谢型18例（2.29%）、快代谢型338例（42.95%）、中间代谢型351例（44.60%）及慢代谢型80例（10.17%）。将本研究结果与国内文献发表的CYP2C19代谢表型相比较，发现太原地区汉族人群CYP2C19代谢类型的分布与蒙古族［3］、回族［4］的分布情况比较差异有统计学意义，与不同地区（天津、十堰、连云港）汉族［7-9］、维吾尔族［5］、苗族［6］代谢表型分布基本一致。将本研究结果与国内文献发表的不同地区汉族CYP2C19基因表型分布相比较，发现太原地区地区汉族人群CYP2C19基因表型的分布与十堰分布情况［8］比较差异有统计学意义，但与天津［7］、连云港［9］比较无差异。说明不同民族的CYP2C19代谢型分布会存在差异，不同地区汉族基因表型分布存在差异。因此，有必要对不同地区和民族进行CYP2C19基因型和代谢型检测，根据结果调整氯吡格雷剂量或及时更换药物，从而降低氯吡格雷抵抗引起的再发血栓事件或高反应性引发的出血事件发生率，达到个体化给药的目标。