结核分枝杆菌耐药基因检测在耐药肺结核治疗中的应用价值研究

闫芹 李君 王丽珩*（通讯作者）

（1.2 济南市长清区疾病预防控制中心 山东 济南 250399）

（3 济南市疾病预防控制中心 山东 济南 250021）

肺结核是临床中较为常见的一种疾病，相关统计显示我国是结核病高负担国家，肺结核患者的数量超过了500万，占全球患者总数的四分之一左右。药物治疗是临床中治疗肺结核患者的主要方式，但是随着临床药物使用的增加，临床中耐药肺结核患者也逐渐增多，传统的检测诊断方式检验时间长、效果差，临床应用效果不理想[1]。如何对耐药肺结核患者进行有效的诊断成为了临床研究的重点内容，本次研究就对结核分枝杆菌耐药基因检测在该疾病患者中的应用效果进行了探讨分析，详细内容如下。

1.资料与方法

1.1 一般资料

选取2006年1月-2018年12月于我单位进行检查的患者共计474例，所有患者均为肺结核患者，男365例，女109例，年龄（19～87）岁，平均年龄（46.55±3.55）岁。将所有患者的一般资料进行比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 方法

收集患者的痰，制作痰标本，进行检查工作，详细内容如下：①相关材料由我单位结核病生物分子实验室提供；痰标本其处理后使用Bactec-960仪进行培养工作，培养时间为3～7天，部分培养物用于药敏高、低浓度实验，而部分培养物则进行DNA提取工作，将其放置与-20℃环境中备用；②进行7H10培养基药敏实验以及PCR扩增和SSCP分析，采用不同的浓度分别进行实验；③异烟肼（INH，H）高浓度为10mg/L，低浓度为1mg/L；利福平（RFP，R）高浓度为250mg/L，低浓度为25mg/L；链霉素（SM，s）高浓度为100mg/L，低浓度为10mg/L；乙胺丁醇（EB）高浓度为50mg/L，低浓度为5mg/L；卡那霉素（K）高浓度为6mg/L，低浓度为50mg/L；吡嗪酰胺（PZA）高浓度为250mg/L，低浓度为50mg/L；氧氟沙星（O）浓度为2mg/L；对氨基水杨酸（PAS）浓度为6mg/L；左旋氧氟沙星（V）高浓度为5mg/L，低浓度为0.5mg/L；联合药敏浓度则为HR：H为1mg/L，R为50mg/L；HRS：H为1mg/L，R为50mg/L，S为10mg/L；HRE：H为1mgL，R为50mg/L，E为5mg/L。

1.3 观察指标

记录结核分枝杆菌不同耐药菌株数以及耐药基因突变情况。

1.4 统计学分析

使用SPSS 22.0对患者的相关参数进行分析，计数资料以率 (%)表示，采用χ2检验，P＜0.05作为差异有统计学意义。

2.结果

474例患者中，利福平敏感株433株，突变株数24株，突变率为5.54%，利福平耐药株41株，突变株数21株，突变率为51.22%，利福平高耐株30株，突变株数18株，突变率为60%，利福平低耐株11株，突变株数3株，突变率为27.27%；异烟肼敏感株393株，突变株数40株，突变率为10.18%，异烟肼耐药株81株，突变株数32株，突变率为39.51%，异烟肼高耐株53株，突变株数31株，突变率为58.49%，异烟肼低耐药4株，突变株数1株，突变率为25%；链霉素敏感株395株，突变株数96株，突变率为24.30%，链霉素耐药株79株，突变株数48株，突变率为60.76%，链霉素高耐株55株，突变株数46株，突变率为83.63%，链霉素低耐株34株，突变株数2株，突变率为5.88%；对比以上数据利福平、异烟肼以及链霉素三种耐药基因突变率随其耐药浓度的增加而增加，差异具有统计学意义（P＜0.05）。

3.讨论

肺结核是临床中极为常见的一种疾病，其严重地威胁着患者的身体健康，影响着社会稳定和发展，而随着临床药物使用频率和数量的增加，临床中耐药肺结核也呈现出明显的增加，针对患者的不同情况给予相应的治疗已经成为了临床研究的主要内容[2]。

利福平、异烟肼以及链霉素敏感株均为临床中进行耐药性检测的重要指标，并且该三种敏感株均存在基因突变的情况，研究其基因突变率耐药浓度之间的关系可以有效了解临床中耐药肺结核患者耐药情况的变化。在本次研究中发现，在实验中利福平、异烟肼以及链霉素三种敏感株的基因突变率会随着其耐药浓度的增加而增加，显示在临床中随着不规律用药时间的增加，敏感株的突变率会出现的明显的增高，导致其耐药性得到增强，说明结核分枝杆菌耐药基因检测能够在临床中对用药方案进行指导和参考。

综上所述，结核分枝杆菌耐药基因检测在临床中能够有效了解耐药肺结核患者的耐药情况变化，指导临床进行正确的用药，具有重要的临床意义，值得推广应用。