富血小板血浆在毛发再生中的应用

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(南华大学附属第一医院美容整形外科，湖南 衡阳421001)

脱发性疾病是临床上常见的疾病。各种类型的病理性脱发可能会导致患者出现内向、抑郁和焦虑等心理问题，从而影响人际交往，降低个人的生活质量。雄激素源性脱发(Androgenetic Alopecia,AGA)是临床中最多见的病理性类型，它的特点是渐进性脱发，随着年龄的增长而加剧。目前对脱发的病因和发病机制尚不完全清楚，在大多数情况下，促进毛发再生的药物具有一定的副作用，且治疗效果并不理想。当前富血小板血浆用于毛发再生的研究已经成为热点，为研究毛囊疾病的治疗效果带来了新的希望。

1 PRP的制备和激活

富血小板血浆(Platelet-rich Plasma，PRP)是一种高浓度血小板的血浆，拥有多种生长因子，是经过自身静脉血离心得到的。PRP的制备原理是依据血液中各组分的比重不同而进行分层制备，离心后将血液分为下层、中层和上层，下层深红色液体为红细胞层，上层淡黄色液体为血浆层，二者之间一薄层白色不透明液体即富血小板血浆。目前对PRP的制备有很多种方法，不同的离心力、离心时间以及离心次数所制备成的 PRP,其血小板浓度和各种生长因子的数量与状态各不相同。其中Yin等[1]提供制备PRP的方法能保持血小板生物活性最大化的同时使血小板富集最大化，能够显著促进细胞的增殖和迁移，有利于组织的再生，因此是比较理想的制作方法。它是使用两次离心法制作的PRP，第1次以160 g的离心力离心l0 min，吸取上清液至交界面下3 mm，将吸取液移至另一离心管中，第2次再以250 g的离心力离心15 min，弃掉约75%的上清液，留取少量的上清液稀释高浓度的血小板，即为PRP。两次离心法制取的 PRP 质量最高，其在临床上的应用也最广。

大量研究证明，分离的PRP，须进一步激活成血小板凝胶[2]，以便血小板缓慢释放它们的生长因子，发挥组织修复作用。PRP的激活是a颗粒与血小板膜融合的脱颗粒过程，血小板通过脱颗粒作用才能释放高质量分数的各类生长因子，促进组织的伤口愈合，所以PRP的激活通常使用氯化钙，牛凝血酶、胶原蛋白和冻融来进行血小板的活化。

2 PRP的作用机制

PRP对细胞的分化、血管增生和细胞的增殖起着促进作用，主要是通过浓缩血小板的a颗粒分泌释放多种生长因子,其高浓度的生长因子可增强组织修复过程，如血小板源生长因子(platelet-derived growth factor，PDGF)、胰岛素样生长因子(insulin-like growth factor，IGF)、血管内皮生长因子(vascular endothel ial growth factor，VEGF)、表皮生长因子(epidermal growth factor，EGF)、转化生长因子β(transforming growth factor，TGF-β)和成纤维细胞生长因子(Fibroblast growth factor，FGF)等[3]。这些生长因子在细胞的迁移、增殖、存活以及伤口愈合的各个阶段都具有重要的调节作用。PDGF、FGF和TGF-β能够增加胶原蛋白的含量，加快伤口早期愈合的速度，有助于慢性伤口和糖尿病性溃疡的愈合，同时可促进细胞的招募、增殖和分化，从而达到增强组织的修复作用[4]。EGF在伤口愈合中能够促进肉芽组织的增生、增加伤口的拉伸程度、缩短愈合时间和加速上皮化的过程[4]。FGF、EGF和VEGF可通过调节内皮细胞增殖和迁移来刺激血管生成[4]。PRP通过增加VEGF和PDGF水平来增加滋养毛囊的血管丛，并增加了血管生成的潜力，大量新生血管的形成为细胞提供丰富的营养，可促进组织的修复[5]。 PDGF[6]是生长因子中最重要的一种，它可以诱导和维持毛发的生长期，参与毛发的形成。因为激活后的PRP能释放多种生长因子，所以具有促进伤口愈合与组织生长的作用，更能在止血和凝血过程中发挥着重要的作用，从而在临床上得到了越来越广泛的应用。

3 PRP在毛发再生中的应用

近年来，医学界越来越重视生长因子对毛发生长的调控作用，生长因子可调控皮肤表皮细胞对毛囊细胞分裂增殖的影响，且与毛发生长周期有密切关系，毛囊的生长和周期循环依赖于皮肤中上皮成分和真皮毛乳头间的相互作用，需要多种生长因子的协同作用，如血小板源性生长因子、转化生长因子β和血管内皮细胞生长因子等，他们对毛乳头细胞(dermal papilla cells，DPCs)的分化、增殖、促进血管生成和细胞外基质重塑等均有着非常重要的作用[7]。PRP中所含有的多种生长因子可刺激内皮细胞和干细胞的生长，而且有利于促进创面愈合、毛发的再生。

PRP具有促进毛发成活、增加毛发密度和促进毛囊重建的作用。Khatu等[8]报道，AGA患者注射PRP一次后，脱发显著减少。在这项研究中，头发数量从平均71个毛囊单位增加到93个毛囊单位。因此，相比每平方厘米增长22个毛囊单位。Takikawa等[9]也研究了26名头发稀疏的患者，对其注射PRP治疗，每次注射3 mL,平均随访12周。治疗3个月后，头发密度改善范围从基线测量值的13%增加至31%。注射部位的胶原蛋白和胶原纤维明显增生，以及纤维母细胞和毛囊周围的血管明显增加。另有研究表明[10]用激活后的自体PRP注射治疗6个月后，头发密度测量显示比基线值提高了56%。PRP对于头发稀疏的患者来说是一个很有前景的治疗选择。

目前，PRP已被用于毛发移植手术，在毛发移植手术中能够增加毛囊存活率。Uebel等[11]证明了在毛发移植的患者中注射PRP可以提高移植毛囊的存活率，改善头发密度，促进移植毛囊的生长。这种效应被认为是由于血小板释放的生长因子作用于毛囊干细胞的靶点，干细胞与基质细胞相互作用，刺激新毛囊的发育和促进新血管的形成，从而激活毛发的增殖阶段。用PRP预处理的AGA患者显示每平方厘米毛囊密度由16.7增加至18.7个单位，毛囊密度相比增加15.1%。由于临床上样本量相对较小，以及随访期间缺乏标准化的测试因素和测量仪器，导致PRP改善头发密度的准确程度难以从个体研究结果中获取。同时PRP的制备过程也直接影响其对AGA的疗效。然而，最近的一项Meta分析[12]认为PRP治疗ACA效果可靠，无明显副作用，PRP可作为治疗AGA的有效方法，值得临床推广应用。

PRP不仅对AGA患者有较好的疗效，最近研究显示对斑秃(Alopecia Areata，AA)患者也有较好的疗效。Shumez等[13]研究了74例AA患者，其中对照组用曲安奈德注射液(Triamcinolone Acetonide Injection，TAC)(2.5 mg/mL)，实验组注射PRP。在AA患者注射PRP治疗6周后，52.8%的患者毛发密度和质量整体得到改善，而TAC组患者的症状改善率为35.4%。Singh[14]研究了29例慢性AA患者的PRP治疗效果，这些患者每4周给予注射6次PRP，在治疗6个月后，据随访结果显示PRP改善效果明显，仅有一例患者报告有复发。

在不同程度的AA亚型中使用PRP治疗，临床应用效果显著，患者满意度高。2015年的一个病例报告[15]描述了一位患有皮质类固醇耐药匍行性脱发AA的患者，该患者注射PRP后，毛发在第1个月逐渐再生，在第3个月时可观察到毛发明显再生。匍行性脱发AA患者往往更难以治疗，这一报告显示了该人群中使用PRP治疗的可能性。另一篇病例报道[16]描述了一种慢性弥漫性AA患者，曾局部使用过皮质类固醇，米诺地尔和蒽林等多种治疗方式均治疗无效。她的头皮右侧用TAC注射(2.5 mg/mL，总共4mL)和PRP治疗，而左侧仅接受TAC注射。

PRP处理组的毛发密度相比基线值增加16%，而用TAC组仅增加12%。然而，在用PRP处理的实验组，毛干直径增加了35%，而另一组的毛干直径减少了4%。PRP可增加毛发密度和毛发直径，从而改善患者症状，但对于难治性的AA患者可被用作新的辅助治疗方法。

不同表型的PRP制剂治疗脱发疾病也有良好的改善效果。如Kang等[17]报告了注射CD34+细胞的PRP制剂对男性和女性脱发的临床疗效。其实验设计了两个组别，其中一组中男性和女性患者都使用注射CD34+细胞的PRP制剂治疗脱发，而另一组则用胞间胎盘提取物注射治疗。两个治疗组头发厚度和头发的数量都有一定的改善，但CD34+细胞的PRP治疗比胎盘提取治疗有更好的改善效果。研究表明，自体CD34+细胞的PRP制剂的胞外注射对男性和女性的脱发有积极的治疗作用，没有明显的副作用。

PRP的不同制备过程产生不同浓度的血小板生长因子，会直接影响其对脱发疾病的疗效。Shah[18]的研究中用于制备PRP的方法可以产生约血液中血小板含量的3倍，PRP治疗6个月后，观察到毛发密度显着增加。然而需要进一步研究比较PRP在不同浓度下毛发再生中的功效，以了解实现毛发再生所需的血小板生长因子的最佳浓度。MIAO等[19]能够证明裸鼠经PRP处理后，可缩短毛囊重建的时间，增加毛囊重建的数量，显著提高毛囊存活率。PRP可促进毛乳头细胞的增殖，促进毛发生长终期向毛发生长初期的转化，加速了头发形成的时间，在体内和体外可诱导毛发接近完全再生。PRP对毛发长度增长和毛囊数量增加有积极作用，可作为治疗脱发疾病的有效治疗手段。

4 当前存在的问题及展望

存在的问题：PRP在促进毛发再生中的应用与机制方面还不是很清楚，PRP的应用因个体差异而导致治疗效果不同,PRP应用的长期疗效尚需追踪，因此，PRP促进毛发再生的效果及机制需要更多的研究和证据来证明。

PRP来源于自体血液，含有多种高浓度的生长因子、白细胞及纤维蛋白等成分，可以促进趋化、细胞黏附、有丝分裂、增殖和血管生成，PRP还具有消炎及止痛作用，同时可为细胞生长提供丰富的营养物质，可以促进细胞增殖和组织的修复。PRP中各生长因子比例合理，可以发挥更好的协同作用，为其提供最佳的生长环境，无外源性生长因子的免疫排斥和传播疾病的风险，使其在创面愈合、组织修复、医学美容等领域中展现出其独特的优势，随着研究的进一步深入以及制备技术的进一步改善，PRP作为脱发疾病中的替代疗法具有广阔的应用前景。