开心散合安神汤对慢性不可预知应激刺激抑郁模型大鼠行为学及海马5-羟色胺的影响

2019-01-03郭盼盼

实用中医药杂志 2018年12期

郭盼盼

（河南省南阳市中心医院中药科，河南南阳 473000）

抑郁症属中医“郁证” 范畴［1］。研究发现，开心散可改善慢性应激抑郁大鼠的抑郁行为、调节中枢单胺类神经递质的表达［2］、含药血清对Aβ诱导的神经细胞损伤有修复作用［3］等。本研究用慢性不可预知应激刺激建立大鼠抑郁模型，探讨开心散合安神汤对抑郁大鼠的治疗作用及其机制。

1 材料与方法

实验材料：开心散合安神汤（人参7.5g，莲肉12g，莲须3g，麦冬6g，远志6g，芡实6g，甘草3g，茯苓135g，石菖蒲67.5g，购自张仲景大药房）按方剂组成的10倍，称取饮片，加水浸泡1 h，水煎2 次，取滤汁，合并药液，浓缩至含生药1 g/mL，4℃冰箱冷藏备用。盐酸氟西汀（礼来苏州制药有限公司）。

模型制备［4］：采用慢性不可预知刺激，刺激种类包括昼夜颠倒、4℃冷水游泳、45℃热水游泳、水平震荡、鼠笼倾斜45°饲养24h、夹尾、禁食、禁水、禁食禁水、束缚、湿垫料等12种刺激，每天两种无规律刺激，连续刺激28天。

动物分组及处理：（180±20）g雄性SD大鼠60只，购自河南省实验动物中心。随机抽出15只为正常组，剩余45只给予慢性不可预知刺激造模，并随机分为模型组、阳性组、合方组。造模同时给予药物，阳性组给予盐酸氟西汀2.5g/kg，合方组给予以原生药12g/kg。连续灌胃给药28天，正常组和模型组每天灌胃生理盐水。

2 观测指标

体质量：实验开始前称量大鼠体质量，28天实验结束时称量大鼠体质量并记录。

糖水消耗量：给药28天进行糖水消耗，禁食禁水20h，每个鼠笼上方两个给水瓶，1瓶纯水，1瓶1%的糖水，测量2h后每只鼠的饮水量（纯水、1%糖水），计算糖水消耗量。糖水消耗量=1%糖水消耗量/（纯水消耗量+1%糖水消耗量）×100%。

旷场实验：于实验前、给药28天进行旷场实验。旷场箱地面有等大的25个方格。每只大鼠放置于中央格内，四爪进入同一方格内计水平运动1次，两前肢离地计垂直运动1次。记录4min内大鼠的水平运动次数和垂直运动次数。

海马5-HT测定：实验结束，每组大鼠采用断头处死的方法，处死并取脑内海马组织，所有操作在冰上进行，采用ELISA法检测海马5-HT，Bio-Rad 680型酶标仪检测酶标板各孔光密度（OD）值，计算5-HT含量。

统计处理：用SPSS18.0软件进行单因素方差分析（One-Way ANOVA）统计处理，如若方差齐采用ANOVA/LSD方法，如若方差不齐则采用Dunnett' s T3方法，P＜0.05为差异有统计学意义。

3 结果

各组大鼠体质量及糖水消耗率见表1。

表1 各组大鼠体质量及糖水消耗率比较（±s）

注：与正常组比较，*P＜0.05；与模型组比较，△表示P＜0.05。

组别体重（g）糖水消耗率（%）例实验前 28d 实验前 28d正常组 15 191.36±6.18 328.66±7.39 75.33±1.64 78.32±2.45模型组 15 190.29±5.87 271.72±7.11* 74.61±1.53 53.67±4.46*阳性组 15 188.96±5.56 307.21±6.95*△ 75.75±2.02 72.04±5.42*△合方组 15 189.77±6.43 295.18±6.37*△ 73.11±1.96 65.14±5.35*△

各组大鼠行为见表2。

表2 各组大鼠行为比较（±s）

注：与正常组比较，*P＜0.05；与模型组比较，△P＜0.05。

组别水平运动次数（次）垂直运动次数（次）例实验前 28d 实验前 28d正常组 15 79.86±5.85 81.24±6.74 30.64±4.24 31.63±5.13模型组 15 81.36±6.71 50.52±5.37* 31.08±4.65 10.64±2.63*△阳性组 15 80.86±7.56 76.43±4.41*△ 30.73±3.43 24.35±4.26*△合方组 15 81.44±7.32 66.22±6.63*△ 29.97±4.86 17.57±4.35*△

各组大鼠5-HT比较见表3

表3 各组大鼠5-HT比较（mg/mL，±s）