荧光定量PCR检测HBV-DNA与化学发光酶免疫法检测乙肝五项相关性

乙肝为乙型肝炎病毒感染引起的慢性传染性肝脏疾病，在我国有较高发病率，为影响我国人们健康主要传染性疾病之一。研究指出，临床中早期、全程、规律抗病毒治疗，对延缓乙肝患者疾病发生、发展，改善患者预后非常关键[1]。临床中诊断乙肝可从病原学及免疫学方面进行检测，包括检测HBV-DNA病毒及病毒载量、检测乙肝病毒所致抗原和抗体，不同检测方法能反映患者不同感染情况和疾病状态。荧光定量PCR法为检测HBV-DNA主要方法，化学发光酶免疫法为检测乙肝五项主要方法，两种检测方法具有经济、便捷、操作简便、灵敏度和特异性高等优点[2]，为探究两种检测方法检测HBV-DNA与乙肝五项的关联性，研究如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2016年2月—2018年4月我院检验科采用荧光定量PCR检测HBV-DNA，阳性血清标本158份作为研究对象，标本患者信息：男82例，女76例；年龄16～82岁，平均（48.2±6.2）岁；住院患者118份，门诊患者40份。纳入标准：（1）所有标本经荧光定量PCR检测，其病毒载量≥5.0E+02 IU/ml，判定为HBVDNA阳性；（2）标本均有保存，能满足再次采用化学发光酶免疫法检测乙肝五项所需，且质量合格；（3）标本来源清晰；（4）向标本患者讲解本研究干预后，获得患者同意采用化学发光酶免疫法检测乙肝五项。排除标准：（1）标本剂量不足或不合格；（2）标本来源不能追踪，未能获得标本提供患者同意者。

1.2 方法

荧光定量PCR检测法：采用杭州安杰思医学科技有限公司生产的AFD-4800型核酸扩增实时荧光检测系统，其配套试剂由中山大学达安基因有限公司提供，严格按照说明书进行检测。化学发光酶免疫法：采用强生公司生产VITROS 3600型号全自动酶联免疫分析仪及同公司配套试剂盒，严格按照说明书进行检测。在检测过程中，每检测批次均设阴阳性对照、临界质控品，检测值均在控。

1.3 观察指标

（1）按照乙肝五项检测后HBsAg、HBeAg、HBsAb、HBcAb、HBeAb阳性将患者进行分组，分析HBV-DNA检测阳性标本乙肝五项检测阳性情况。（2）按照乙肝五项检测阳性情况将患者分为大三阳组和小三阳组、HBeAg阳性组和HBeAb阳性组，分别比较两组患者中HBV-DNA病毒载量情况。根据HBV-DNA载量结果分为低载量（5.0E+02 IU/ml～1.0E+05 IU/ml）、中载量（1.0E+05 IU/ml～ 1.0E+07 IU/ml）、高载量（1.0E+07 IU/ml～ 1.0E+11 IU/ml）[3]。

1.4 统计学方法

用SPSS24.0统计软件包对本研究收集和整理数据进行分析，计量资料用（±s）表示；乙肝五项阳性情况及病毒载量情况用Z检验或χ2检验。检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 乙肝五项检测阳性组合情况

HBsAg、HBcAb、HBeAb（ 小 三 阳 ） 和 HBsAg、HBcAb、HBeAg（大三阳）患者比例分别为43.04%、37.34%，显著高于其它阳性组患者（P＜0.05）。见表1。

表1 乙肝五项检测阳性组合情况

2.2 大三阳组和小三阳组HBV-DNA载量

大三阳组和小三阳组HBV-DNA载量比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 大三阳组和小三阳组HBV-DNA载量 [n（%）]

2.3 HBeAg阳性组和HBeAb阳性组HBV-DNA载量

HBeAg阳性组和HBeAb阳性组HBV-DNA载量比较有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

表3 HBeAg阳性组和HBeAb阳性组HBV-DNA载量比较 [1（%）]

3 讨论

荧光定量PCR和化学发光酶免疫法均为常用定量检验方法，但两种检测方法从不同原理检测标本，结果不能进行直接对比和比较。乙肝为我国常见慢性传染性疾病之一，为引起肝硬化、肝癌主要病因，对患者健康、生活质量造成严重影响。实验室检验为辅助诊断乙肝的主要方法，早检查、早诊断并积极干预为延缓乙肝患者疾病发生、发展，改善患者预后的关键[4]。目前，临床中定量检测并诊断乙肝可通过分子技术和免疫技术进行检验，即检验HBV-DNA载量和HBV病毒相关抗原和抗体水平[5-6]。临床中通过判读HBV病毒相关抗原、抗体阳性情况能对机体感染HBV情况及对HBV免疫情况进行判定，同时根据HBV-DNA载量情况能判定HBV感染情况和传染情况[7-8]。

本研究分别采用荧光定量PCR检测HBV-DNA，并将HBVDNA阳性标本再次采用化学发光酶免疫法检测乙肝五项指标，得出HBV-DNA阳性标本中检测出HBsAg、HBcAb、HBeAb（小三阳）和HBsAg、HBcAb、HBeAg（大三阳）患者比例分别为43.04%、37.34%，显著高于其它阳性组患者（P＜0.05）。大三阳和小三阳均为临床中反映乙肝感染的重要标准，对HBV-DNA阳性患者同时检测乙肝五项指标同样有较高的阳性率。同时本研究结果得出大三阳组和小三阳组、HBeAg阳性组和HBeAb阳性组HBV-DNA载量的差异比较有统计学意义（P＜0.05）。证实在不同乙肝感染和传染情况中，患者HBV-DNA载量同样存在差异。同样有学者研究指出，乙肝患者HBV-DNA载量与乙肝患者肝炎活动程度及传染情况有相关性[9-11]。另有学者研究指出，乙肝大三阳患者相对乙肝小三阳患者HBV-DNA病毒载量显著升高[12]。

综上所述，荧光定量PCR检测HBV-DNA和化学发光酶免疫法检测乙肝五项在乙肝患者中有较高关联性，临床中分别采用两种方法进行检测对辅助诊断和判定乙肝患者病情有重要临床价值。