亚甲基水杨酸杆菌肽可溶性粉在靶动物兔的安全性试验

胡 雪，周婷婷，顾梦婷，卜仕金∗

（1.扬州大学兽医学院，江苏扬州225009；2.江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心，江苏扬州225009）

杆菌肽是一种由芽孢杆菌分泌产生的多肽类抗生素，具有促进动物生长、提高饲料利用率、抑制动物肠道中有害微生物生长、预防和治疗多种动物肠道疾病等多种作用，同时具有抗菌谱广、无残留、无休药期、不产生耐药性、无毒副作用、安全性好等特点，在国内外动物养殖和饲料生产中均有广泛应用［1-3］。亚甲基水杨酸杆菌肽可溶性粉作为一种新型的肽类添加剂于2012年获得我国新兽药注册证书，2013年获得药物添加剂文号，允许在肉鸡饲料中以5～40 mg／kg的剂量进行添加，以达到促进生长、改善饲料报酬的目的［4］。美国 FDA批准的亚甲基水杨酸杆菌肽适应症包括提高增重率和饲料效率、提高蛋鸡产蛋量、防治鸡坏死性肠炎、治疗火鸡传染性肠炎、预防鹌鹑溃疡性肠炎和预防猪痢疾等［5］。在欧盟该药还被推荐用于治疗由产气荚膜梭菌引起的兔坏死性肠炎，通过混饮或混饲给药，推荐用法用量为 5.7 mg／kg／d，连用 10 d。 药效学试验表明，国产亚甲基水杨酸杆菌肽可溶性粉按6 mg／kg／d浓度饮水给药，连用10 d，能有效治疗产气荚膜梭菌引起的兔坏死性肠炎。本次试验通过临床观察、病理学检查和血液学及血液化学指标测定，进行了该药在兔的靶动物安全性试验，以期为其在兔的临床合理用药提供依据。

1 材料与方法

1.1 药品与材料 亚甲基水杨酸杆菌肽可溶性粉（规格15%，以杆菌肽计，批号L110610），由浦城绿康生物科技有限公司提供。贝克曼Unicel Dxc800 synchron型全自动生化分析仪、Sysmex XE2100型全自动血液分析仪、真空采集管、一次性注射器、酒精棉球、记号笔。

1.2 试验动物及饲养管理 32只健康成年新西兰大白兔（公母各半），购自扬州市仪征安立卵生物科技有限公司，平均体重约1.66 kg，组间差异不超过9%。受试兔试验时采用耳号标记识别。

1.3 动物分组与给药 32只健康成年新西兰大白兔随机分为4组，每组8只，雌雄各半。受试药设 3 个剂量组，分别为 1 倍（6 mg／kg／d）、3倍（18 mg／kg／d）和5 倍（30 mg／kg／d）推荐剂量组，饮水给药，连续给药21 d。另设一空白对照组，饲料或饮水中不添加任何药物。

1.4 饲养管理 受试兔定时定量喂食压缩颗粒饲料，7点到19点人工采光12 h，温度在20～24℃之间，空气相对湿度保持在60%～70%之间，空气流量保持在960 m3／h，定期更换垫料以保持试验动物及动物房的清洁卫生。

1.5 评价指标

1.5.1 临床观察 在试验期间对实验动物进行监控，每天观察2次，以发现靶动物对药物有毒剂量产生的反应。主要观察受试动物的精神状况以及日常的采食饮水情况并加以记录。

1.5.2 增重和摄食情况 在试验前和第11天和第21天对各组新西兰白兔空腹进行称量，统计全期采食量，根据试验记录计算各组新西兰白兔的平均日采食量、平均日增重和料重比。

1.5.3 血液学和血清生化学检查 在给药前、给药后第11天、第21天分别采集耳缘静脉血样1.5 mL进行血液学参数和0.5 mL进行血液生化学参数的检测。血清生化指标包括白蛋白、总蛋白、球蛋白、直接胆红素、总胆红素、间接胆红素、葡萄糖、尿素氮、肌酐、钙、磷、钾、钠、氯含量，丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）、碱性磷酸酶（AKP）活性［6］。 血液学指标包括红细胞数、血红蛋白含量、白细胞数、淋巴细胞数、异嗜性粒细胞数、单核细胞数、嗜酸性粒细胞数、嗜碱性粒细胞数、淋巴细胞百分比、异嗜性粒细胞百分比、单核细胞百分比、嗜酸性粒细胞百分比、嗜碱性粒细胞百分比［7］。

1.5.4 病理学检查 对试验中死亡的兔及时进行病理剖检，进行大体和组织病理学检查。试验结束后24 h内对所有存活兔扑杀，进行大体和组织病理学检查。

1.5.5 数据统计分析 用SPSS应用软件系统进行数据的显著性检验。采用t检验比较试验组与对照组间均增重、料肉比（饲料利用率）、血液学和血液生化学等各项指标的显著性差异。

2 结果与分析

2.1 临床表现 整个试验期间，各组动物均无死亡。对照组、推荐剂量组、3倍推荐剂量组和5倍推荐剂量组中的所有试验动物健康状况良好，精神状态、饮水和采食均正常。

2.2 摄食量与体重变化 摄食量与饮水量：在整个研究期间，受试药物组平均摄食量与对照组相比提升；推荐剂量组和3倍剂量组和对照组相比饮水量上升，5倍剂量组与对照组相比下降，但各剂量组之间无差异性。亚甲基水杨酸杆菌肽可溶性粉试验期间对兔生长性能的影响结果见表1。各组实验兔初始体重差异不显著（P＞0.05），试验结束后受试药物组体重均显著高于对照组（P＜0.05），推荐剂量组和3倍推荐剂量组体重接近，均高于5倍推荐剂量组，但各剂量组之间无显著差异（P＞0.05）；推荐剂量组（P＝0.109＞0.05）、3 倍剂量组（P＝0.099＞0.05）和 5 倍剂量组（P ＝ 0.494＞0.05）日均增重接近，均高于对照组，但无显著性；与对照组相比，受试药物组料肉比均低于对照组，推荐剂量组（P＝0.009＜0.01）有极显著差异，3 倍推荐剂量组（P＝0.014＜0.05）有显著差异，而5 倍剂量组（P＝0.328＞0.05）无显著性。表明亚甲基水杨酸杆菌肽可溶性粉饮水给药对兔的生长具有一定促进作用，且推荐剂量组效果最明显。

表1 亚甲基水杨酸杆菌肽可溶性粉对兔生长性能的影响（±SD，n＝8）

表1 亚甲基水杨酸杆菌肽可溶性粉对兔生长性能的影响（±SD，n＝8）

同行数据肩标字母不同表示差异显著（P＜0.05），下同

检测指标 空白对照组 推荐剂量组／（6 mg·kg-1·d-1）3倍推荐剂量组／（18 mg·kg-1·d-1）5倍推荐剂量组／（30 mg·kg-1·d-1）初均重（kg） 1.66±0.068 1.65±0.141 1.68±0.104 1.7±0.090 11 d 重（kg） 2.16±0.136 2.25±0.122 2.25±0.144 2.19±0.105 21 d 重（kg） 2.65±0.101a 2.84±0.149b 2.87±0.217b 2.76±0.062b均增重（kg／只／天） 0.048±0.006 0.056±0.008 0.057±0.01 0.050±0.006日均采食量（g／只／天） 189.68±38.24 202.27±54.92 191.52±36.173 190.96±48.46日均饮水量（mL／只／天） 456.10±98.52 526.52±134.79 464.41±140.74 449.87±151.03料肉比 4.08±0.418a 3.59±0.37b 3.38±0.503b 3.81±0.423ab

2.3 血液生理指标及血清生化指标 各组给药前、给药期间和给药后的血液生理指标及血液生化指标测定结果分别见表2～表7。统计学数据分析显示：血液生理指标方面，与对照组相比，所有亚甲基水杨酸杆菌肽处理组，注意到白细胞数计数有所下降，但不存在显著性（P＞0.05），且无剂量上的相关性。对照组与药物处理组的红细胞平均体积、平均血红蛋白含量、红细胞分布标准差指标稍偏低于正常范围，可能与动物个体差异以及动物机体携带的微生物的数量和种类有关，与试验药物无相关性。其他血液生理指标差异不显著。血液生化指标方面，所有亚甲基水杨酸杆菌肽处理组，5倍剂量组在给药后第10天和第21天与对照组相比，尿素氮在数值上有差异（P＜0.05），其他血生化指标无显著变化。

表2 给药前第0天亚甲基水杨酸杆菌肽可溶性粉对兔血液生理指标的影响 （±SD，n＝8）

表2 给药前第0天亚甲基水杨酸杆菌肽可溶性粉对兔血液生理指标的影响 （±SD，n＝8）

血液学参数 空白对照组 推荐剂量组／（6 mg·kg-1·d-1）3倍推荐剂量组／（18 mg·kg-1·d-1）5倍推荐剂量组／（30 mg·kg-1·d-1）白细胞（×109／L） 5.44±0.94 4.41±0.85 5.39±2.44 4.90±1.27嗜酸性粒细胞（×109／L） 0±0 0±0 0.001±0.004 0.001±0.004嗜中性粒细胞（×109／L） 1.22±0.62 1.10±0.41 0.99±0.48 1.11±0.60嗜碱性粒细胞（×109／L） 0.15±0.05 0.12±0.04 0.13±0.05 0.15±0.06红细胞（×1012／L） 5.77±0.25 5.76±0.39 5.82±0.42 5.82±0.51血红蛋白（g／L） 120±5.15 119.43±7.59 120.75±9.00 121±8.04红细胞压积（L／L） 38.68±1.55 38.96±2.11 38.68±3.77 39.39±2.24红细胞平均体积（fL） 67.06±2.86 67.7±2.35 66.39±3.39 67.83±3.05平均血红蛋白含量（pg） 20.8±0.81 20.77±0.52 20.75±0.77 20.81±0.69平均血红蛋白浓度（g／L） 310.2±3.42 306.86±7.67 313.13±16.06 307.29±5.91红细胞分布宽度（%） 14.9±1.20 14.44±0.34 14.54±1.17 14.39±0.69红细胞分布标准差（%） 35.6±2.91 34.94±2.25 34.24±3.04 34.69±2.39血小板（×109／L） 283.8±92.60 253.29±53.83 311.88±245.05 318.86±131.99

表3 给药前第0天亚甲基水杨酸杆菌肽可溶性粉对兔血液生化指标的影响±SD，n＝8）

表3 给药前第0天亚甲基水杨酸杆菌肽可溶性粉对兔血液生化指标的影响±SD，n＝8）

血液生化参数 空白对照组 推荐剂量组／（6 mg·kg-1·d-1）3倍推荐剂量组／（18 mg·kg-1·d-1）5倍推荐剂量组／（30 mg·kg-1·d-1）K+（mmol／l） 4.47±0.26a 4.2±0.26b 4.33±0.31ab 4.38±0.45ab Na+（mmol／l） 133.54±1.87a 135.44±2.27b 133.13±1.97ab 133.54±2.3ab Cl-（mmol／l） 99.38±2.22a 101.06±3.34b 98.85±2.39ab 99.73±2.14ab Ca+（mmol／l） 3.28±0.26 3.16±0.45 3.22±0.28 3.05±0.21葡萄糖（mmol／l） 5.96±2.49 7.69±1.2 7.55±0.86 5.95±2.89总蛋白（g／L） 57.96±7.8a 53.1±3.8ab 51.34±2.97b 54.14±2.4ab白蛋白（g／L） 40.94±8.45a 36.48±2.37ab 34.9±2.28b 37.56±1.31a球蛋白（g／L） 17.03±5.77 16.63±1.72 16.44±2.29 16.58±1.54尿素氮（mmol／l） 4.84±1.49 4.26±1.22 4.61±1.12 3.5±2.11肌酐（umol／l） 55.63±4.21 57.88±5.89 51.38±11.26 41.88±25.45谷丙转氨酶（U／L） 40.75±6.96 33.5±6.44 38±6.26 37±9.65谷草转氨酶（U／L） 23.13±10.74 18.75±5.2 28.88±20.53 25.5±13.91 AST／ALT 0.6±0.36 0.57±0.14 0.77±0.55 0.71±0.37谷氨酰胺转移酶（U／L） 5.25±1.28 5.63±1.41 4.88±1.46 5.13±1.96碱性磷酸酶（U／L） 136.5±36.72 155.13±27.16 116.38±18.01 104±47.25总胆固醇（mmol／l） 1.65±0.59 1.72±0.51 1.61±0.36 1.19±0.71总胆红素（umol／l） 1.33±0.1 1.39±0.16 1.28±0.16 1.29±0.26

表4 给药后第10天亚甲基水杨酸杆菌肽可溶性粉对兔血液生理指标的影响（±SD，n＝8）

表4 给药后第10天亚甲基水杨酸杆菌肽可溶性粉对兔血液生理指标的影响（±SD，n＝8）

血液生化参数 空白对照组 推荐剂量组／（6 mg·kg-1·d-1）3倍推荐剂量组／（18 mg·kg-1·d-1）5倍推荐剂量组／（30 mg·kg-1·d-1）白细胞（×109／L） 12.93±12.34 8±4.253 7.79±0.552 6.42±2.663嗜酸性粒细胞（×109／L） 0±0 0.014±0.038 0.02±0.045 0.014±0.038嗜中性粒细胞（×109／L） 1.32±0.40 1.51±0.49 1.19±0.47 0.95±0.36嗜碱性粒细胞（×109／L） 0.152±0.05 0.124±0.04 0.13±0.05 0.15±0.06红细胞（×1012／L） 8.12±6.36 5.95±0.36 6.16±0.22 5.99±0.52血红蛋白（g／L） 118±7.01 122±6.93 121.8±3.77 121±9.56红细胞压积（L／L） 37.56±1.76 39.09±1.90 38.94±0.99 38.43±2.34红细胞平均体积（fL） 64.94±3.92 65.83±2.97 63.26±2.03 64.27±2.68平均血红蛋白含量（pg） 20.45±1.06 20.51±0.39 19.8±0.42 20.21±0.77平均血红蛋白浓度（g／L） 315.12±9.63 312.14±9.82 312.8±4.55 314.57±9.47红细胞分布宽度（%） 15.55±1.22 14.43±0.80 14.58±0.38 14.96±0.69红细胞分布标准差（%） 35.86±3.60 34.14±2.28 33.08±1.48 34.44±2.61血小板（×109／L） 375.38±233.64 317.57±167.12 331.2±63.30 345.43±62.97

表5 给药后第10天亚甲基水杨酸杆菌肽可溶性粉对兔血液生化指标的影响（±SD，n＝8）

表5 给药后第10天亚甲基水杨酸杆菌肽可溶性粉对兔血液生化指标的影响（±SD，n＝8）

血液生化参数 空白对照组 推荐剂量组／（6 mg·kg-1·d-1）3倍推荐剂量组／（18 mg·kg-1·d-1）5倍推荐剂量组／（30 mg·kg-1·d-1）K+（mmol／L） 5.26±0.15 5.19±0.17 5.23±0.19 5.14±0.11 Na+（mmol／L） 137.85±5.2 139.26±2.19 138.5±2.9 139.34±1.23 Cl-（mmol／L） 91.14±5.4 95.24±2.29 94.41±4.24 96.86±2.39 Ca+（mmol／L） 3.75±0.2 3.7±0.2 3.73±0.22 3.71±0.12葡萄糖（mmol／L） 7.07±0.49 7.19±0.38 6.25±2.59 7.6±0.33总蛋白（g／L） 47.5±3.55 47.1±2.68 47.81±3.74 48.76±3.18白蛋白（g／L） 19.8±1.49 20.14±1.47 21.08±0.96 20.67±1.69球蛋白（g／L） 27.69±3.54 27±2.05 26.71±3.64 28.13±2.45尿素氮（mmol／L） 5.37±0.61a 5.51±1.14ab 6.48±2.54ab 6.66±1.2b肌酐（umol／L） 59.79±3.93 61.01±6.7 60.94±17.01 66.65±11.42谷丙转氨酶（U／L） 39.25±5.68 31.75±6.69 39.25±9.47 40.5±14.5谷草转氨酶（U／L） 30.88±22.6 38.88±29.42 52.25±66.17 39.5±23.74 AST／ALT 0.77±0.48 1.19±0.85 1.26±1.36 1.14±0.86谷氨酰胺转移酶（U／L） 6.75±1.39 5.25±1.58 7.25±2.82 6.38±1.19碱性磷酸酶（U／L） 130.5±26.18 152.38±30.93 140.13±21.76 136.13±25.19总胆固醇（mmol／L） 1.38±0.34 1.21±0.54 1.37±0.39 1.37±0.44总胆红素（umol／L） 2.03±0.36 2.08±0.72 2.06±0.47 2.06±0.39

表6 给药后第21天亚甲基水杨酸杆菌肽可溶性粉对兔血液生理指标的影响（±SD，n＝8）

表6 给药后第21天亚甲基水杨酸杆菌肽可溶性粉对兔血液生理指标的影响（±SD，n＝8）

血液学参数 空白对照组 推荐剂量组／（6 mg·kg-1·d-1）3倍推荐剂量组／（18 mg·kg-1·d-1）5倍推荐剂量组／（30 mg·kg-1·d-1）白细胞（×109／L） 7.88±1.08a 4.61±1.88b 6.38±1.45a 6.17±1.56ab嗜酸性粒细胞（×109／L） 0.002±0.00 0.004±0.00 0.002±0.00 0±0嗜中性粒细胞（×109／L） 2.67±0.73 1.67±1.01 2.4±1.00 2.09±0.96嗜碱性粒细胞（×109／L） 0.294±0.30 0.116±0.06 0.17±0.04 0.212±0.12红细胞（×1012／L） 6.03±0.50 5.34±1.49 5.85±0.34 6.09±0.38血红蛋白（g／L） 124.2±9.81 110.24±27.20 124.8±6.98 128.4±3.85红细胞压积（L／L） 39.96±2.41 35.38±8.63 39.56±1.95 41.5±0.76红细胞平均体积（fL） 66.38±3.00 66.84±3.64 67.72±2.80 68.3±3.89平均血红蛋白含量（pg） 20.94±0.99 20.8±1.21 21.36±0.90 21.14±1.19平均血红蛋白浓度（g／L） 315.8±0.99 311.4±5.03 315±5.79 309.4±7.13红细胞分布宽度（%） 15.86±1.64 15.86±1.46 15.22±1.30 15.78±2.60红细胞分布标准差（%） 37.24±2.91 37.88±3.50 36.82±1.79 38.4±5.06血小板（×109／L） 200.2±79.51 137.4±67.51 215.8±76.33 117±49.52

表7 给药后第21天亚甲基水杨酸杆菌肽可溶性粉对兔血液生化指标的影响（SD，n＝8）

表7 给药后第21天亚甲基水杨酸杆菌肽可溶性粉对兔血液生化指标的影响（SD，n＝8）

血液生化参数 空白对照组 推荐剂量组／（6 mg·kg-1·d-1）3倍推荐剂量组／（18 mg·kg-1·d-1）5倍推荐剂量组／（30 mg·kg-1·d-1）K+（mmol／L） 4.23±0.11 4.31±0.17 4.21±0.06 4.38±0.22 Na+（mmol／L） 141.34±1.93 139.47±2.34 139.87±2.93 141.03±1.16 Cl-（mmol／L） 99.31±2.44 98.96±2.8 99.33±3.61 100.65±2.56 Ca+（mmol／L） 3.57±0.08 3.62±0.11 3.51±0.41 3.68±0.17葡萄糖（mmol／L） 6.79±0.25a 7.75±1.08a 7.45±0.42b 7.78±0.73a总蛋白（g／L） 57.15±3.66 56.4±3.1 50.2±12.75 56.35±2.5白蛋白（g／L） 37.15±1.56 37.26±1.93 33.07±6.26 36.85±1.3球蛋白（g／L） 20±2.48 19.14±1.35 17.13±6.64 19.5±1.56尿素氮（mmol／L） 5.91±1.54a 6.31±1.22ab 6.83±1.42a 5.78±0.57b肌酐（umol／L） 63.88±6.96 65.57±7.3 67.67±12.34 66.25±4.5谷丙转氨酶（U／L） 57.5±11.82 51.86±13.67 54±14 62.75±9.46谷草转氨酶（U／L） 75±67.42 57±42.67 68.67±68.97 30.75±4.72 AST／ALT 1.28±1.02 1.12±0.82 1.17±0.99 0.5±0.08谷氨酰胺转移酶（U／L） 4±0.76 4±1.14 5.33±4.16 4.75±0.96碱性磷酸酶（U／L） 114.5±28.5 135.57±28.55 116.67±30.29 120.25±25.38总胆固醇（mmol／L） 0.97±0.25 1.21±0.35 0.92±0.42 7.78±0.73总胆红素（umol／L） 1.48±0.17 1.63±0.13 1.33±0.25 1.58±0.05

2.4 眼观和组织病理学检查 试验结束后对各组存活的兔全部处死剖检，均未见明显的眼观病理变化。对5倍剂量组和对照组的存活兔进行组织病理学检查，显微检查结果显示，高剂量组中除1只兔的肝组织出现部分肝细胞肿胀现象，其他主要脏器均未见明显异常。对照组和5倍推荐剂量组中动物的主要脏器剖检病理检查部分结果见图1～图12。

图1 对照组 心 （HE染色×400）

图2 5倍剂量组 心（HE染色×400）

图3 对照组 肝 （HE染色×400）

图4 5倍剂量组 肝（HE染色×400）

图5 对照组 脾 （HE染色×400）

图6 5倍剂量组 脾 （HE染色×400）

图7 对照组 肺（HE染色×400）

图8 5倍剂量组 肺（HE染色×400）

图9 对照组 肾 （HE染色 ×400）

图10 5倍剂量组 肾（HE染色 ×400）

图11 对照组 胃 （HE染色 ×100）

图12 5倍剂量组 胃（HE染色 ×100）

3 讨论与结论

杆菌肽口服进入动物肠道后几乎不被吸收，且95%经过粪便排出体外，极少量被吸收后通过肾小球过滤后排出体外［1，8］。李美同等对猪连续饲喂3个月的杆菌肽后，停药当天即检测猪可食性组织中杆菌肽的残留量，但均未检测出杆菌肽残留［9］。FDA资料显示，饲喂小鸡 1100 mg／kg亚甲基水杨酸杆菌肽8周和产蛋鸡5个月，在鸡组织、蛋清和蛋黄中也均未检出杆菌肽残留［10］。因此，杆菌肽不存在药物残留问题，在畜禽生产过程中没有毒副作用，安全性良好［11］。亚甲基水杨酸杆菌肽可溶性粉是国家近年来批准的唯一新药物饲料添加剂，是一种多肽类的抗生素，主要作用于革兰氏阳性菌，具有促进生长作用，同时亦能控制引起动物肠道疾病的病原菌［4］。郝晔等报道表明日粮中添加亚甲基水杨酸杆菌肽对新西兰白兔的生产性能和屠宰性能有促进作用，且以50～100 mg／kg的添加剂量效果最佳［12］。对鸭的试验结果显示，在相同饲养条件下，亚甲基水杨酸杆菌肽对番鸭的屠宰性能均无明显影响，但能在一定程度上降低番鸭的死亡率，并提高番鸭的日增重和饲料利用率［13］。本次试验结果表明，受试药物组与对照组动物初始重量无显著差异，但终末增重较对照组存在显著差异（P＜0.05），表明亚甲基水杨酸杆菌肽可溶性粉对兔的生长具有积极促进作用。

细胞肿胀（cell swelling）是指细胞内水分增多，胞体增大，胞浆内出现微细颗粒或大小不等的水泡，多发生于肝细胞、肾小管上皮细胞和心肌细胞，也可见于皮肤和粘膜的被覆上皮细胞，是一种常见的细胞变性。引起细胞肿胀的原因有机械性损伤、缺氧、缺血、电离辐射、中毒、脂肪过氧化、细菌及病毒感染、免疫反应等［14］。本次试验显微结果显示，高剂量组中兔的肝组织出现部分肝细胞肿胀现象，分析可能与脏器采集过程中造成的机械性损伤有关。血液是构成有机体内环境的重要组成部分，内环境的变化可能导致血液组成成分或性质发生特征性的变化，血液的生理生化常值是反映机体健康状况的主要指标，也是疾病诊断和监测的指标之一。血液中参与机体免疫的成分主要有中性粒细胞和淋巴细胞［15］，血液中的白细胞总数的多少提示动物的易感性和侵入微生物的毒力等。红细胞计数、血红蛋白浓度、红细胞压积、平均红细胞体积、平均红细胞血红蛋白含量和平均红细胞血红蛋白浓度可用于贫血的诊断［16］。本试验将亚甲基水杨酸杆菌肽可溶性粉以1倍、3倍、5倍的推荐剂量混饮给药，观察比较给药前后兔的临床症状、血液生理生化参数，结果显示试验兔在整个研究期间，精神状态、食欲、饮水及粪便情况未出现异常，部分血液学、血液生化指标有不同程度的波动，但均在正常参考值范围内。由此表明亚甲基水杨酸杆菌肽可溶性粉按推荐给药方案混饮给药，连用21 d，对靶动物兔具有很高的安全性。